Izolace (mikrobiologie)

InoculationEdit

Laboratorní technici inokulujte vzorek na určité pevné agarové desky s streak plate metoda nebo do tekuté kultivační médium, v závislosti, co je cílem izolace je:

  • Pokud někdo chce izolovat pouze určité skupiny bakterií, jako jsou Skupiny A Streptococcus z krku výtěr, jeden může používat selektivní médium, které bude potlačují růst doprovodné bakterie očekává, že v mixu (tím, že antibiotika přítomná v agaru), tak, že pouze Streptokoky jsou „vybrány“, tj. viditelně vyčnívat. K izolaci hub lze použít agar Sabouraud. Alternativně, smrtící podmínky pro streptokoky a gram-negativní bakterie, jako jsou vysoké koncentrace solí v Mannitol salt agar prospěch přežití nějaké stafylokoky přítomné ve vzorku střevní bakterie, a fenolové červeně na agar působí jako ph indikátor ukazuje, v případě, že bakterie jsou schopné kvasit mannitol by vylučovat kyseliny do média. V jiných agarech se přidávají látky, které využívají schopnost organismu produkovat viditelný pigment (např. granada médium pro streptokoky skupiny B), které mění barvu bakteriální kolonie nebo rozpouští krevní agar hemolýzou, aby mohly být snadněji spatřeny. Některé bakterie, jako jsou druhy Legionella, vyžadují k růstu zvláštní živiny nebo toxin vázající se na uhlí, a proto musí být použita média, jako je agar s extraktem z pufrovaného uhlí.
  • Pokud někdo chce izolovat jako mnoho nebo všechny kmeny možné, různých živných médiích, stejně jako obohacená média, jako je krevní agar a čokoládový agar a anaerobní kultivační média, jako jsou thioglykolát vývar musí být naočkována. Výčet růst, bakterie mohou být pozastavena do roztaveného agaru, než se stane pevné, a pak se vlije do petriho misky, tzv. kultivační metoda, která se používá v environmentální mikrobiologie a mikrobiologie potravin (např. mléčných testování) vytvořit tzv. aerobních mikroorganismů‘.

IncubationEdit

Po vzorku se inokuluje do, nebo na výběr média, jsou inkubovány za vhodných atmosférických nastavení, jako jsou aerobní, anaerobní nebo microaerophilic podmínek nebo s přídavkem oxidu uhličitého (5%), v různých teplotních nastavení, například 37 °C v inkubátoru nebo v chladničce pro studené obohacení, za vhodných světlo, například striktně bez světla zabalené v papíru nebo v tmavé láhvi pro scotochromogen mykobakterie, a pro různé délky času, protože různé bakterie rostou různou rychlostí, různou od hodin (Escherichia coli) do týdnů (např. mykobakterie).

v pravidelných, sériových intervalech laboratorní technici a mikrobiologové kontrolují média na známky viditelného růstu a zaznamenávají je. Inspekce opět musí dojít za podmínek, které zvýhodňují izolovat přežití, tj. v ‚anaerobní komory‘ pro anaerobe bakterie, například, a za podmínek, které neohrožují člověka při pohledu na desky z nakažení, zejména infekční mikrob, tj. na základě biologické bezpečnosti kabinet pro Yersinia pestis (mor) nebo Bacillus anthracis (antrax), například.

Identifikaceeditovat

když bakterie viditelně rostou, jsou často stále smíšené. Identifikace mikroba, závisí na izolaci jednotlivých kolonií, jako biochemické vyšetření mikroba určit jeho různé fyziologické funkce závisí na čisté kultury.Aby subkultury, znovu pracuje v aseptické techniky v mikrobiologii, zvedání jedné kolonie z agaru povrch s poutkem a pruhy materiál do 4 kvadrantů z agarové plotny nebo celé, pokud kolonie byla singulární a nevypadal smíšené.

Gram barvení surového vzorku před inkubací nebo barvení čerstvě dospělý kolonie materiál pomáhá určit, je-li kolonie se skládá z rovnoměrně se objevují bakterie, nebo je smíšené, a barva, a tvar bakterií umožní první klasifikace na základě morfologie. V klinické mikrobiologii se používá řada dalších barvicích technik pro konkrétní organismy (kyselé rychlé bakteriální barvení pro mykobakterie). Imunologické barvení techniky, jako jsou přímé imunofluorescence byly vyvinuty pro medicínsky významné patogeny, které jsou pomalu rostoucí (Auramine-rhodamine barvení mykobakterií) nebo obtížné pěstovat (jako je Legionella pneumophila druhů) a kde je výsledek testu by změnit standardní řízení a empirické terapie.

Biochemické vyšetření bakterií zahrnuje sadu lze testovat kolonie v injekčních lahvičkách k oddělení pohyblivých od non-pohyblivé bakterie.V roce 1970 zmenšená verze byla vyvinuta, tzv. analytický profil indexu.

úspěšná identifikace pomocí např. sekvenování genomu a genomika závisí na čistých kulturách.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.