Klonogenní test

experiment zahrnuje tři hlavní kroky:

  1. ošetření se aplikuje na vzorek buněk.
  2. buňky jsou „pokoveny“ v tkáňové kultivační nádobě a ponechány růst.
  3. vzniklé kolonie jsou fixovány, obarveny a počítány.

na konci experimentu se měří procento buněk, které přežily léčbu. Grafické znázornění přežití versus koncentrace léčiva nebo dávky ionizujícího záření se nazývá křivka přežití buněk.

Pro Mobilní zabíjení Částic testy, přežívající frakce buněk se používá pro aproximaci Poissonova Rozdělení virových částic mezi buňkami, a proto určit počet CKPs, s nimiž se každá buňka.

Jakýkoliv typ buňky by mohly být použity v experimentu, ale protože cílem tyto experimenty v onkologickém výzkumu je nalezení efektivnější léčby rakoviny, lidské nádorové buňky jsou typické volby. Buňky buď připraven „buněčné linie“, které byly dobře studoval a jehož obecné charakteristiky jsou známy, nebo z biopsie nádoru u pacienta. Buňky se vkládají do Petriho misek nebo do talířů, které obsahují několik kruhových „jamek“.“Konkrétní počty buněk jsou umístěny v závislosti na experimentu; pro experiment zahrnující ozáření je obvykle na desce větší počet buněk se zvyšující se dávkou záření. Například, v dávce 0 nebo 1 šedá záření, 500 buněk může být pokovené, ale na 4 nebo 5 šedá, 2500 může být pozlacené, od velmi velkého počtu buněk jsou zabiti při této úrovni radiace a účinky specifické léčby by být nepozorovatelné.

počítání buněčných kolonií se obvykle provádí pod mikroskopem a je docela únavné. Nedávno byly vyvinuty stroje, které používají algoritmy k analýze obrázků. Ty jsou buď zachyceny obrazovým skenerem nebo automatizovaným mikroskopem, který může zcela automatizovat proces počítání. Jeden takový automatizovaný stroj funguje tak, že přijímá určité typy buněčných desek prostřednictvím slotu (ne na rozdíl od CD přehrávače), pořizuje fotografii a nahrává ji do počítače pro okamžitou analýzu. Spolehlivé počty jsou k dispozici během několika sekund.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.