Co je Verhoeff-van Gieson je skvrna?
Ira Van Gieson poprvé popsal protokol barvení Verhoeff-van Gieson (VVG) v roce 1889 jako metodu hodnocení kolagenových vláken v nervové tkáni. Frederick Herman Verhoeff, Americký chirurg a patolog, pak upravený skvrnu v roce 1908, jako způsob, jak odlišit kolagen a jiné pojivové tkáně, a zvýraznit elastických vláken, zejména.
co to skvrny?
elastická vlákna jsou vlákna pojivové tkáně, která umožňují roztažení tkání a jsou hojná například v aortě, kde poskytují flexibilitu této velké krevní cévě. Jsou také přítomny v jiných tkáních, které potřebují flexibilitu, jako je kůže a plíce.
na Těchto jemných elastických vláken, nemůže obvykle být viděn na rutinní hematoxylin a eosin (H&E)-barevné části tkáně, tedy speciální skvrny jsou povinni upozornit na ně. Více o H&E si můžete přečíst v těchto článcích z mikroskopického a zobrazovacího kanálu-Část 1:Metoda a tipy, část 2: recepty a materiály.
ačkoli existuje mnoho speciálních skvrn pro identifikaci elastických vláken, VVG se nejčastěji používá, protože je rychlý a vytváří intenzivní barvení elastických vláken.
Obecné zásady skvrna
VVG je dva-část kombinace skvrna, která umožňuje diferenciaci některých komponent pojivové tkáně v tkáň, která nejsou snadno rozpoznatelná podle H&E barvení:
Verhoeff skvrna složka: iron-hematoxylin skvrna, která je specifická pro elastická vlákna. Vytváří silné vazby s elastinem, hlavní složkou elastické pojivové tkáně.
van Gieson stain component: protistain, který je specifický pro kolagen. Bylo pojmenované po Americký bakteriolog Ira van Gieson, a skládá se ze dvou kyselá barviva – kyselinou pikrové a kyselým fuchsinem.
tato technika zahrnuje barvení tkáně vzorku s hematoxylin skvrna se skládá z chloridu železitého a jód, a zahrnuje dva hlavní kroky:
(1) Overstaining: tento krok zahrnuje komplex hematoxylin–chlorid železitý–jód. Tyto dvě složky působí jako mořidla opravit hematoxylin barvení tkáně, a také působit jako oxidační činidla pomoci převést hematoxylin na haematein. Barvení mechanismus pravděpodobně zahrnuje tvorbu vodíkové vazby mezi hematoxylin a tkáně, ačkoli specifika této reakce nejsou známé. Vzhledem k tomu, že elastin má silnou afinitu k komplexu železo-hematoxylin ve skvrně, drží barvivo déle než jiné tkáňové složky. Elastin proto zůstává obarven i po odbarvení jiných tkáňových prvků.
(2) diferenciace: tento krok používá přebytečný chlorid železitý mordant k rozkladu komplexu tkáňově-mořidlo-barvivo. Thiosíran sodný se používá pro odstranění přebytečného jódu, a van Gieson counterstain se používá k výrobě kontrastu s hematoxylin skvrnu. Barvivo je přitahováno k velkému objemu mořidla v diferenciačním roztoku a odstraněno z tkáně. Elastická tkáň má na druhé straně nejsilnější afinitu k železné složce skvrny.
v důsledku toho, konečný produkt reakce je taková, že elastická vlákna a jádra buněk jsou obarveny černou Verhoeff součásti. Kolagen a sval jsou zbarveny červeně van Gieson counterstain, což také vede ke žlutému zbarvení buněčné cytoplazmy a dalších tkáňových složek.
kdo používá van Gieson skvrnu?
tato skvrna se široce používá jak pro diagnostické, tak pro výzkumné účely.
v diagnostických laboratořích se VVG používá k identifikaci přítomnosti nebo nepřítomnosti elastických vláken v tkáních. Například, patologové mohou používat to, aby prokázat, ztráta elastické tkáně v plicích u pacientů s rozedmou plic, a řídnutí a ztráta elastických vláken v krevních cévách pacientů s arteriosklerózy.
Podobně, vědci vyšetřující některý z těchto typů onemocnění může také běžně prozkoumat VVG-barevné části tkáně k detekci přítomnosti nebo absence elastických vláken v tkáních zájmu. Jiní vědci mohou skvrnu jednoduše použít k odlišení vláken pojivové tkáně v tkáních, které jsou předmětem zájmu.
jak používáte verhoeff-van Gieson skvrnu ve vaší laboratoři?
pomohlo vám to? Pak prosím sdílejte s vaší sítí.