zona pellucida on soluton takki, joka ympäröi täysikasvuisten nisäkkäiden munasolujen plasmakalvoa.ja joka suorittaa erilaisia tärkeitä tehtäviä oogeneesin, hedelmöityksen ja preimplantaation kehityksen aikana. Tässä tutkimuksessa hiiren munasolun zona pellucida proteiinit on tunnistettu ja määritelty käyttämällä zonae pellucidae-bakteeria, joka on eristetty yksittäin täysikasvuisista varhaismunasoluista suulla toimivilla mikropipeteillä. Eristettyjen zonae pellucidae-lajien puhtauden arvioimiseksi käytettiin erilaisia morfologisia ja biokemiallisia kriteerejä, ja useimmissa tapauksissa niiden todettiin olevan käytännöllisesti katsoen vapaita muiden munasoluproteiinien aiheuttamasta kontaminaatiosta. Määriteltiin, että jokainen zona pellucida sisältää 4.8 ng proteiinia, joka vastaa vähintään 80% zona pellucidan kuivapainosta ja noin 17% munasolun kokonaisproteiinista. Elektroforeettiset analyysit niinkin muutamasta kuin viidestä eristetystä zonae pellucidae-bakteerista, joita hoidettiin diatsotoidulla jodosulfaniilihapolla, paljastivat, että niissä oli vain kolme radioaktiivisesti merkittyä proteiinia, ZP1, ZP2 ja ZP3. Samat kolme proteiinia tunnistettiin Coomassie blue-värjäyksellä, kun suuri määrä eristettyjä zonae pellucidae-heimoon kuuluvia (noin 750) altistettiin SDS-polyakryyliamidigeelielektroforeesille. Nämä kolme proteiinia vaeltavat leveinä kaistoina SDS-polyakryyliamidigeeleissä, jotka ovat sopusoinnussa glykoproteiinien kanssa ja joiden näennäinen molekyylipaino on 200 000 (ZP1), 120 000 (ZP2) ja 83 000 (ZP3). Samat proteiinit merkittiin radioaktiivisesti, kun ehjiä varhaismunasoluja hoidettiin diatsotoidulla jodosulfaniilihapolla, reagenssilla, joka ei läpäise munasolun plasmakalvoa, tai kun eristettyä zonae pellucidae-bakteeria hoidettiin 3H-merkityllä 1-dimetyyliaminonaftaleeni-5-sulfonyylikloridilla. Yksittäisten proteiinien aminohappoanalyysin ja korkean erotuskyvyn kaksiulotteisen elektroforeesin tulokset viittaavat siihen, että kukin proteiini edustaa ainutlaatuista polypeptidiketjua. Proteiinit ZP1, ZP2 ja ZP3 edustavat vastaavasti noin 36, 47 ja 17% zona pellucida-proteiinin kokonaismäärästä. Zona pellucidan hajoamista aiheuttavien pelkistävien aineiden läsnä ollessa ZP1 muuttuu lajiksi, joka vaeltaa näennäisen molekyylipainonsa ollessa 130 000, mikä viittaa siihen, että se on olemassa oligomeerina, disulfidisidosten stabiloimana, pelkistymättömässä tilassa. Näiden kokeiden tuloksia käsitellään zona pellucidan ominaisuuksien kannalta ennen hedelmöitystä ja sen jälkeen, ja niitä verrataan tuloksiin, jotka on saatu käyttämällä vitelline-kuoria, jotka ovat peräisin ei -ammalilaisista eläinlajeista.