yleiskatsaus: tällä menetelmällä luomme puhtaan ja saastuttamattoman itiöruiskun. Ruisku täytetään kuumennetulla ja steriloidulla vedellä ja annetaan jäähtyä. Itiöt siirretään sitten itiöjäljestä ruiskun liuokseen puhdistetun ja puhdistetun shottilasin avulla. Tämän Tek: n valmistuttua olet luonut itiöliuosruiskun, joka on valmis käytettäväksi missä tahansa mikroskopiassa.
HUOMAA: Nämä ohjeet ovat tehokkaimpia, kun ne suoritetaan steriilimmässä ympäristössä. Suositeltuun menetelmään kuuluu alla olevien ohjeiden noudattaminen työskenneltäessä puhtaassa ja steriilissä Gloveboxissa tai laminaarisen liesituulettimen edessä. Jos et halua rakentaa Gloveboxia tai sinulla ei ole sellaista, seuraavat vaiheet on suoritettu menestyksekkäästi työskentelemällä perusteellisesti puhdistetulla ja puhdistetulla työtasolla. Vapaa käyttö spray desinfiointiaine ja laimennettu valkaisuainetta liuos on suositeltavaa puhdistaa ja puhdistaa työalueen.
tarvittavat materiaalit:
tyhjät steriilit ruiskut
kaksi litraa (tai suurempi) keittokattilaa
yksi pullo 91-prosenttista isopropyylialkoholia
useita paperipyyhkeitä
kevyempi tai alkoholiliekki
Shottilasi
steriili itiöjälki
menettely yksi: steriilin ruiskun tekeminen
1. Täytä keittoastiasi puoliksi hanalla tai tislatulla vedellä (käytä tislattua vettä, jos vesijohtovesi sisältää enemmän mineraaleja ja kemikaaleja).
2. Keitä vesi kattilassa korkealla vähintään kymmenen minuuttia, tämän pitäisi riittää steriloimaan ja puhdistaa kaikkien bakteerien, virusten ja homeitiöiden vesi.
3. Ota tyhjä ruisku ja täytä se kiehuvalla vedellä. Anna sen istua kaksi minuuttia kuumalla vedellä sisällä. (Jos ruiskusi oli steriili, ohita vaiheet 4 ja 5).
4. Tyhjennä kuuma vesi ruiskusta lavuaariin, älä takaisin kattilaan.
5. Toista vaiheet 3 ja 4 vielä kaksi kertaa. Toisen kerran jätä kuuma vesi ruiskuun.
6. Aseta ruisku viileään vetämättömään paikkaan, mieluummin puhtaaseen vetoketjulliseen pussiin
7. Anna jäähtyä useita tunteja ennen siirtymistä toiseen toimenpiteeseen.
menettely kaksi: Tulostaa itiöitä ruiskuun
1. Puhdista ensin työtilasi. Tämä voi edellyttää kaikkien työpintojen pyyhkimistä laimennetulla valkaisuaineliuoksella ja alueen suihkuttamista runsaasti desinfiointiaineella, kuten lysolilla.
2. Aseta seuraavat materiaalit gloveboxiin tai puhdistetulle ja puhdistetulle työtasolle: Shottilasi, jäähdytetyt ruiskut, alkoholipullo, paperipyyhe, sormenjälkesi (edelleen vetoketjullisessa pussissa) ja sytytin tai alkoholiliekki.
3. Pese kädet antibakteerisella saippualla ennen kuin jatkat eteenpäin.
4. Taita paperipyyhe ¼ osaan ja liota siitä nurkka alkoholin kanssa.
5. Alkoholin liotetulla pyyhkeellä pyyhi shottilasin sisäpuoli, lähinnä steriloimalla pinta, jota aiot käyttää siirrossa. Anna shottilasin kuivua, kestää vain muutaman sekunnin.
6. Poista neulan suojus steriilistä ruiskusta ja steriloi neula liekillä. Ota sitten alkoholilla liotettu paperipyyhe ja pyyhi neula edelleen avuksi steriloinnissa. Pyri välttämään neulan koskettamista muihin pintoihin, ellei toisin neuvota.
7.Huomautus: tässä vaiheessa on tärkeää työskennellä mahdollisimman nopeasti, jotta voidaan torjua mahdollisuuksia saastuttaa homeita ja bakteereja, jotka joutuvat työalueeseesi ja siten pilata ruiskusi.
8. Poista jälki sen säilytyspussista. Avaa se paljastaaksesi itiöt. Aloita kevyesti raaputus ruiskun neulalla ja poista osa tulosteesta shottilasiin. Keskikokoisesta painoksesta riittää yleensä raaputtaa pois enintään 1/5 kokonaispainosta.
9. Shottilasissa on pieni havaittavissa oleva itiökokoelma. Poista nyt enintään puolet ruiskun vedestä shottilasiin ja sekoita itiöt kevyesti liuokseen.
10. Ime itiövesiliuos ruiskuun. Saatat joutua poistamaan lisää vettä shottilasiin ja imemään uudelleen auttaaksesi vangitsemaan kaikki itiöt ruiskuun.
11. Kun olet saanut itiöliuoksen takaisin ruiskuun, sinun pitäisi huomata, että vesi sisällä on hieman tummunut ja saatat nähdä pieniä itiöpesäkkeitä, jotka kelluvat liuoksessa. Tämä on hyvä, olet suorittanut prosessin.
12. Steriloi neula uudelleen alkoholilla kastetulla paperipyyhkeellä, vaihda neulansuojus ja aseta ruisku takaisin puhtaaseen vetoketjulliseen pussiin.
13. Ruiskun annetaan seistä vähintään 12 tuntia ennen käyttöä mikroskopiassa tai syötävien lajikkeiden inokuloinnissa. Mitä vanhemmaksi tulosta käytetään, sitä enemmän itiöt ”kuivuvat”. Asianmukaisen mikroskopian havainnointia tai itämistä, itiöt on annettava nesteytyä.