mikä on Verhoeff-van Giesonin tahra?
Ira Van Gieson kuvasi ensimmäisen kerran Verhoeff-van giesonin (VVG) värjäysprotokollan vuonna 1889 hermokudoksen kollageenisäikeiden arviointimenetelmäksi. Yhdysvaltalainen kirurgi ja patologi Frederick Herman Verhoeff muokkasi tahraa vuonna 1908 menetelmäksi, jolla erotettiin kollageeni ja muut sidekudokset ja korostettiin erityisesti elastisia kuituja.
mitä se tahraa?
elastiset kuidut ovat sidekudossyitä, jotka mahdollistavat kudosten venymisen, ja niitä on runsaasti esimerkiksi aortassa, jossa ne tarjoavat notkeutta tälle suurelle verisuonelle. Niitä on myös muissa joustoa vaativissa kudoksissa, kuten ihossa ja keuhkoissa.
näitä hienoja kimmokuituja ei yleensä voi nähdä tavanomaisissa hematoksyliini-ja eosiinitahroissa (H&E) – värjätyissä kudososissa, joten niiden korostamiseen tarvitaan erityisiä tahroja. Voit lukea lisää h&E näistä artikkeleista mikroskopian ja kuvantamisen kanavalta-Osa 1:Menetelmä ja vinkit, Osa 2: Reseptit ja materiaalit.
vaikka elastisten kuitujen tunnistamiseen on lukuisia erikoistahroja, VVG: tä käytetään yleisimmin, koska se on nopea ja aiheuttaa elastisten kuitujen voimakasta värjäytymistä.
yleiset periaatteet
VVG on kaksiosainen yhdistelmätahra, joka mahdollistaa tiettyjen sidekudoskomponenttien erilaistumisen kudoksessa, jota ei ole helppo erottaa h&E-värjäyksen:
Verhoeff-tahrakomponentti: elastisille kuiduille ominainen rauta-hematoksyliinitahra. Se muodostaa vahvoja sidoksia elastiinin, elastisen sidekudoksen pääkomponentin, kanssa.
van Gieson stain component: kollageenille ominainen vasta-aine. Se on nimetty yhdysvaltalaisen bakteriologin Ira van Giesonin mukaan, ja se koostuu kahdesta happamasta väriaineesta: pikriinihaposta ja happamasta fuchsinista.
menetelmässä kudosnäyte värjätään hematoksyylitahralla, joka koostuu ferrikloridista ja jodista, ja siinä on kaksi päävaihetta:
(1) Ylipitäminen: tässä vaiheessa muodostuu hematoksyliini–ferrikloridi–jodi-kompleksi. Kaksi jälkimmäistä komponenttia toimivat peitteenä hematoksyliinitahran kiinnittämiseksi kudoksiin ja toimivat myös hapettavina aineina, jotka auttavat muuttamaan hematoksyliinin hemateiiniksi. Värjäysmekanismiin liittyy todennäköisesti vetysidoksen muodostuminen hematoksyliinin ja kudoksen välille, joskaan tämän reaktion erityispiirteitä ei tunneta hyvin. Koska elastiinilla on voimakas affiniteetti tahrassa olevaan rauta-hematoksyliinikompleksiin, se pitää väriaineen pidempään kuin muut kudososat. Elastiini jää siis värjäytymään senkin jälkeen, kun muut kudoselementit on dekoloroitu.
(2) erilaistuminen: tässä vaiheessa käytetään ylimääräistä ferrikloridi mordanttia hajottamaan kudos-mordantti-väriainekompleksi. Natriumtiosulfaattia käytetään ylimääräisen jodin poistamiseen, ja van Giesonin vastapainoa käytetään tuottamaan kontrastia hematoksyliinitahran kanssa. Väriaine vetää puoleensa differentiaaliliuoksen suuren määrän mordanttia ja poistuu kudoksesta. Elastisella kudoksella taas on vahvin affiniteetti tahran rautaosaan.
näin ollen reaktion lopputuote on sellainen, että verhoeff-komponentti värjää kimmoiset kuidut ja solujen tumat mustiksi. Van Giesonin vastaväri värjää kollageenin ja lihaksen punaisiksi, jolloin myös solujen sytoplasma ja muut kudososat värjäytyvät keltaisiksi.
kuka käyttää Van Giesonin tahraa?
tätä tahraa käytetään laajalti sekä diagnostisiin että tutkimustarkoituksiin.
diagnostisissa laboratorioissa VVG: tä käytetään tunnistamaan elastisten kuitujen esiintyminen tai puuttuminen kudoksista. Esimerkiksi, patologit voivat käyttää sitä osoittamaan menetys elastisen kudoksen keuhkoissa potilailla, joilla on emfyseema, ja harvennus ja menetys elastisten kuitujen verisuonissa potilailla, joilla on arterioskleroosi.
vastaavasti minkä tahansa tämäntyyppisen sairauden tutkijat voivat rutiininomaisesti tutkia myös VVG: n värjäämiä kudososia havaitakseen elastisten kuitujen esiintymisen tai puuttumisen kiinnostavissa kudoksissa. Toiset tutkijat saattavat käyttää tahraa yksinkertaisesti vain sidekudossyiden erottamiseen kiinnostavissa kudoksissa.
miten Verhoeff-van gieson-tahraa käytetään laboratoriossasi?
onko tämä auttanut sinua? Jaa sitten verkkosi kanssa.