Il miele ha un effetto antifungino contro le specie di Candida

Abstract

L’incidenza delle infezioni da Candida sta aumentando in tutto il mondo. La natura grave di queste infezioni è aggravata dall’aumento dei livelli di resistenza ai farmaci. Segnaliamo che alcuni mieli hanno una significativa attività antifungina contro isolati clinici di specie di Candida. È importante sottolineare che la concentrazione minima inibitoria di questi mieli sarebbe realizzabile in un ambiente clinico.

Introduzione

Il miele è stato usato come medicina per migliaia di anni ed è stato trovato per essere un efficace agente antimicrobico 1. Questa attività antimicrobica deriva principalmente dalla produzione di perossido di idrogeno da glucosio e ossigeno da glucosio ossidasi, un enzima derivato dalle api 2. Il miele di alcune specie di flora di Leptospermum originaria dell’Australia e della Nuova Zelanda contiene ulteriori componenti fitochimici che migliorano ulteriormente la sua attività antibatterica 3. La natura precisa di questi componenti deve ancora essere identificata.

Sebbene diversi studi in vitro abbiano dimostrato le proprietà antibatteriche del miele 3-5, pochi hanno esaminato l’azione contro i funghi. L’incidenza di infezioni fungine è in aumento sia in comunità che in ambienti ospedalieri, con Candida spp. tra i principali organismi. Candida albicans provoca infezioni orali, oltre il 50% dei casi di candidemia 6-9 e più del 90% della candidosi vaginale 10, 11. Recentemente ci sono stati rapporti aumentati di specie Candida non C. albicans negli studi clinici. Candida glabrata è diventata la dominante non-C. albicans Candida specie coinvolte nel flusso sanguigno e infezioni vaginali 9, 12-14, mentre Candida dubliniensis è spesso implicata nella candidosi orofaringea 15. L’infezione da specie Candida non C. albicans ha importanti implicazioni cliniche, poiché molte sono resistenti alla terapia antifungina convenzionale a base di triazolo. Altre terapie antifungine convenzionali sono tossiche o di efficacia limitata e c’è un bisogno crescente di nuovi agenti antifungini potenti. Lo scopo del presente studio era quello di determinare l’efficacia di vari mieli contro isolati clinici di C. albicans, C. glabrata e C. dubliniensis.

Materiali e metodi

gli isolati Clinici di C. albicans, C. glabrata e C. dubliniensis sono stati testati contro i quattro diversi tipi di miele: un non trasformati Jarrah di miele con il perossido di idrogeno attività totale attività antibatterica (come descritto in 16), equivalente al 30.2% di fenolo 17); Medihoney® Antibatterico del Miele Barriera, una miscela brevettata di Leptospermum e perossido di idrogeno mieli (fitochimico attività ≥18% di fenolo equivalente); Comvita® per la Cura delle Ferite 18+, un puro Leptospermum miele (fitochimico attività ≥18% di fenolo equivalente); e un miele artificiale, utilizzato per simulare gli alti livelli di zucchero presenti nel miele (7,5 g di saccarosio, 37,5 g di maltosio, 167,5 g di glucosio e 202,5 g di fruttosio in 85 ml di acqua sterile).

La concentrazione minima inibitoria (MIC) di ciascun miele è stata determinata in base al metodo di microdiluizione NCCLS 18. Cinquanta per cento (w/v) soluzioni stock di miele in mezzo RPMI-1640 (con glutammina e senza bicarbonato (Sigma)) sono stati preparati immediatamente prima di ogni analisi e filtro sterilizzato attraverso filtri a pori 0,2 µm (Millipore). Le soluzioni stock sono state ulteriormente diluite con il mezzo RPMI-1640 in piastre di microtitolazione a 96 pozzetti per ottenere concentrazioni finali di miele aumentate in incrementi dell ‘ 1% (p/v). Le sospensioni di isolati di Candida sono state preparate in soluzione salina sterile allo 0,85% e la trasmittanza a 530 nm è stata regolata all ‘ 80-88%. Le sospensioni sono state diluite nel mezzo RPMI-1640 e 25 µl sono stati aggiunti a ciascun pozzetto della piastra di microtitolazione immediatamente dopo la preparazione delle soluzioni di miele, risultando in un inoculo finale di 0,5–2,5×103 cfu/ml. Dopo incubazione a 35oC per 24 h, il MIC è stato registrato come la più bassa concentrazione di miele che ha impedito la crescita visibile. Ogni isolato di Candida è stato testato in duplice copia e le analisi sono state ripetute in un giorno separato. Il test Mann-Whitney U è stato utilizzato per valutare gruppi statisticamente significativi. Le correlazioni sono state eseguite utilizzando il test Spearman rank-order.

Risultati

I risultati della suscettibilità di C. albicans, C. glabrata e C. dubliniensis a vari mieli sono mostrati nella Tabella 1. Il miele di Jarrah era significativamente più attivo nei confronti delle tre specie di Candida (P < 0,00001). Le attività antifungine dei mieli floreali erano significativamente maggiori del miele artificiale contro C. albicans e C. glabrata (P < 0.002), ma per C. dubliniensis, solo il miele Jarrah era significativamente più attivo (P < 0.00001). C. dubliniensis era più suscettibile all’effetto osmotico di tutti i mieli e agli effetti antifungini del miele di Jarrah, esibendo MIC significativamente più bassi rispetto alle altre specie (P < 0,00001). C. glabrata, che è intrinsecamente meno suscettibile a molti antifungini convenzionali 19, era il meno suscettibile ai mieli testati (P < 0.00001).