VII.B Her2|neu受容体によって活性化される経路
受容体チロシンキナーゼシグナル伝達は、ホスホリパーゼC-γ(PLC-γ)、PI-3-キナーゼ、Gtp酵素活性化タンパク質(GAP)、Shc、Grb2、srcファミリーキナーゼ、SH2ドメイン含有ホスファターゼを含む多くのSH2含有基質によって媒介される。 受容体チロシンキナーゼによるキナーゼ基質の活性化は、イノシトールリン酸およびジアシルグリセロール中間体のような第二メッセンジャーの放出をもたらす。 さらに、受容体チロシンキナーゼによるRas経路の活性化は、RasおよびMAPキナーゼ経路を含むセリン/スレオニンタンパク質カスケードの調節をもたらす。 最終的に、シグナル伝達は、遺伝子の核転写に影響を与えるか、または細胞周期の進行および他の細胞活動を調節するタンパク質修飾を引き起こす。 Ｈｅｒ２／ｎｅｕ過剰発現によって駆動される形質転換に関与するいくつかの重要なシグナル伝達経路の概要を、図１ ０に示す。 4.
図。 4. Her2/neu癌遺伝子に関連するシグナル伝達経路。 Her2/neuの変換の可能性に貢献すると考えられているいくつかのシグナル伝達経路が示されています。チロシンキナーゼシグナル伝達は、成長、増殖、および生存を制御する複数の経路を活性化することが知られている。
チロシンキナーゼシグナル伝達は、成長、増殖、および生存を制御する複数の経路を活性化することが知られている。 各経路の相対的な寄与は確認することが困難であり、細胞型特異的であり得る。 しかし，ＭＡＰキナーゼ経路の活性化は多くの状況で重要であると思われる。 我々は、erbB受容体複合体のレベルを変換するMAPキナーゼ活性の持続的な、維持されていない活性化を誘導する様々なタイプのトランスフェクト細胞で示して Lederたちは、トランスジェニックマウスモデルから確立された腫瘍株に対する経路特異的薬理学的阻害剤の効果を調べることにより、異なるシグナル伝達経路の重要性を調べた。 Neuトランスジェニックマウス由来の腫瘍ラインは、MAPキナーゼ経路で上昇した活性を示した; さらに，これらの腫よう株の成長はＭＡＰキナーゼ経路の薬理学的阻害剤によって阻害されたが，異なる起源の乳腺腫よう株はこの薬剤によって影響されなかった。 これらのデータは、MAPキナーゼ経路のRas活性化がHer2/neu誘導増殖の重要なコンポーネントであることを示唆している。
我々は、プロテアソームがHer2/neu発現腫瘍における細胞増殖および形質転換の調節に重要な役割を果たす可能性があることを実証しました。
P185neuの過剰発現によって形質転換NIH/3T3細胞は、表現型の復帰につながることが知られているモノクローナル抗体で処理しました。 これらの処理された細胞を、２つのサンプル間で存在量が異なるｍＲＮＡ種を同定することができるスクリーニング技術である、差動ｍ ＲＮＡ表示を用いて、未処理の細胞と比較した。 TBP1は、もともとHIV Tat結合タンパク質-1に高い相同性を持つタンパク質としてクローニングされ、抗体処理細胞におけるmRNAレベルの上昇を示した。 この結果の意義を試験するために、ＴＢＰ１ｃＤＮＡを使用して形質転換細胞をトランスフェクトした。 TBP1発現は、減少した細胞増殖によって測定された形質転換表現型の復帰につながった、柔らかい寒天中のコロニー形成を減少させ、大幅に無胸腺マ これにより、プロテアソームの調節因子が腫瘍抑制因子様の活性を有することが同定された。 我々は、プロテアソーム機能のダウンレギュレーションは、それによって細胞増殖を制限し、細胞周期阻害剤の分解を制限することを期待しています。
細胞周期調節がHer2/neuの形質転換能力に重要であるという考えと一致して、サイクリンD1はneu形質転換におけるその重要性が認識されている。
細胞周期調節がher2/neuの形質転換能力に重要であるという考えと一致している。 Leeたちは、サイクリンD1タンパク質レベルがneuトランスジェニックマウスモデルとneu形質転換細胞株の両方で上昇したことに注目した。 サイクリンD1誘導は、Her2/neu内の重要な残基の変異によって廃止することができます。 形質転換は、サイクリンD1アンチセンス、理論的には、特異的に標的タンパク質の合成を防止する実験技術によってin vivoで阻害されることが示された。 細胞周期経路のドミナントネガティブおよび薬理学的阻害剤の使用を通じて、p185neuによるサイクリンD1の誘導は、RAS/MAPキナーゼ経路に依存していたが、PI-3-キナーゼ経路には依存していなかったことが決定された。 これらの実験は、MAPキナーゼ経路の重要性とHer2/neuによる細胞周期制御の重要な調節を強化する。 ＭＡＰキナーゼ経路は、ＥｒｂＢシグナル伝達にとって非常に重要であることが示されているが、ＰＩ−３−キナーゼ経路のような他の主要なシグナル伝達経路の意義は、決して割引かれることができない。 その重要性が明らかにされているPI-3-キナーゼ経路の主要な下流エフェクターは、Akt生存キナーゼ経路である。 多くの成長因子シグナルの下流エフェクターとして、この経路は抗アポトーシスシグナルを提供する。 今回、Mendelsohnたちは、乳がん細胞株と正常な不死化ヒト上皮細胞の両方において、FAS誘導アポトーシスによるEGFの防御的役割を明らかにした。 EGF刺激によって与えられた保護は、Aktシグナル伝達に依存することが示された。 Liuたちは、erbBファミリーのリガンドであるHeregulinがAktの活性化をもたらし、さらにAktの活性化がher2に対する阻害抗体によってブロックされ、Aktの活性化にお 我々は、腫瘍抑制BRCA1はerbb2活性化に応答してリン酸化されていることを示しており、この変更はまた、Aktシグナル伝達によって影響されるといういく
erbBシグナル伝達が生存につながることは、化学感受性および放射線感受性に対するHer2/neuの効果に関するデータを考えると驚くべきことではない。
化学療法剤および放射線療法の両方による殺傷の主要な側面は、アポトーシスの誘導によるものであることが現在明らかである。 高悪性度グリア悪性腫瘍は、標準的な治療戦略に対して特に難治性であり、したがって、これらの治療戦略を改善する可能性のある方法は、大きな臨床 我々は、グリアとp185neu過剰発現によって形質転換された他の細胞は、表現型的にちょうど膜、p185t691stopの下に細胞内切り捨てとp185変異体の導入によ 表現型復帰を引き起こすことに加えて、p185t691stopを介したキナーゼシグナルの無効化は、γ照射、DNA損傷のメディエーターによって誘導されたアポトーシスに感作された細胞をシグナル伝達する。 さらに、このアポトーシス応答は、生存がp53機能の喪失によって強化されると考えられているヒト腫瘍の割合が高いことを考えると、臨床的見地から奨励されているp53非依存性であることが示された。 切断されたp185の発現と同様に、p185neuに対するモノクローナル抗体による治療は、表現型の復帰およびキナーゼ受容体の無効化につながる可能性があり、 Pietrasたちは、このような抗体による治療が、おそらくp21cipなどの調節タンパク質の誘導の失敗によるDNA修復の減少をもたらすことを実証した。 複数のグループは、キナーゼ受容体の無効化が抗腫瘍剤の有効性を高めることができることを実証しているが、Her2/neu過剰発現は、本質的な化学抵抗性を提 Pegramと共同研究者は、細胞培養とマウスモデルの両方でこの問題を調査し、Her2/neuの過剰発現だけでは薬剤耐性を付与するのに十分ではないことを見出し、her2/neuが腫瘍のより迅速な再増殖のために薬剤耐性を付与するように見える可能性があることを示唆した。 総称して、しかし、her2/neuとアポトーシスの役割の研究は、生存経路は、受容体チロシンキナーゼのシグナル伝達の重要な側面であり、受容体チロシンキナーゼシグナリングのこのコンポーネントは、変換と表現型復帰のメカニズムを理解するための中心であることを示唆している。