- 定義
- 蛍光標識技術
- 蛍光ベースのアッセイ
- 蛍光ベースのアッセイは、光粒子または光子に曝された後に光を再放出する蛍光色素の能力に依存する。 励起光と発光光の波長の差、いわゆるストークスシフトは、顕微鏡やイメージングシステムで検出することができます。 各fluorophoreに特定のStokesの転位がある。 異なった試金は研究者が生体分子を集中させ、リアルタイムのそれらを観察し、相互作用を調査し、酵素の活動を調査することを可能にする。 蛍光顕微鏡蛍光顕微鏡は、細胞および細胞成分の同定および高い特異性を有する細胞生理学のモニタリングを可能にする。 蛍光顕微鏡は、光学フィルタを用いて励起光から放出された光を分離する。 二つの指標の使用はまた、同時に異なる生体分子の同時観察を可能にする。 従来のイメージングシステムは、物理的な回折限界のために200-300nmの分解能を可能にするのに対し、STED（誘導放出枯渇）としての新しい超解像蛍光顕微鏡は、こ フローサイトメトリーフローサイトメトリーは、特定の蛍光色素からの信号を測定するための基礎研究および臨床実践に広く使用されています。 細胞および粒子は、標識された抗体またはリガンドによって産生される蛍光を定量化する検出器の光ビームを通過するときに分析され、最終的に「実 これらのマーカーは、細胞表面または細胞内部の特定の分子に結合し、それらの検出および定量を可能にする。 サイズおよび体積としてのいくつかのパラメータは、単一細胞上で測定することができ、異なる細胞型を単離し、特徴付けることができる（Nolan JT and Condello D,2013）。 フローサイトメトリーは、免疫学、血液学、移植医学、腫瘍学、遺伝学などの分野で幅広い用途を見出しています。 蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）は、染色体上の特定のDNA配列の局在を可能にします。 蛍光DNAまたはRNAプローブは、相補的な標的DNA配列をハイブリダイズおよび同定するために使用される。 魚は伝統的に、例えばヒトゲノムプロジェクトの間に、染色体上の遺伝子をマッピングするために使用されてきた。 今日、蛍光in situハイブリダイゼーションは、主に染色体異常の検出または癌細胞の分析における診断目的のために使用される（O’Connor C、2008）。 蛍光相関分光法（FCS）蛍光相関分光法（FCS）は、化学的、生物学的または物理的な影響によって引き起こされる蛍光色素の蛍光強度の時間的変化の分析を FCSは、薬物とDNAとの相互作用を調査するために最初に導入され、現在ではタンパク質の濃度と凝集レベルを決定し、分子相互作用を観察するための敏感なツールとなっています(Tian Y et al,2011)。 マイクロアレイマイクロアレイは、異なる条件下での遺伝子発現の研究を可能にします。 何千もの遺伝子は、DNAチップ上で同時に検査することができます。 これらは、蛍光標識されたmRNA/cDNA分子に選択的に結合することができる既知のDNA配列を含む小さな斑点で印刷された顕微鏡スライドである。 ハイブリダイゼーションの後、ＤＮＡチップが読み出され、データが遺伝子発現プロファイルを作成するために使用される（Ｈｏｅｎ ＰＡＣ ｅ ｔ ａ ｌ，２ ０ ０ ３）。 蛍光ラベル：ライブセルイメージング
- PromoCell蛍光ラベリング
定義
蛍光ラベリングは、蛍光イメージング（nature.com新しい蛍光体の利用可能性は、生体分子の高感度な検出とそれらの相互作用の分析の可能性を劇的に変えました。 改良された蛍光染料は今細胞構造および細胞プロセスの前に不可能な調査を可能にしています。 蛍光標識は、低濃度でも高感度であり、長期間にわたって安定であり、標的分子の機能を妨害しないため、多くの利点を提供する。 標識された細胞の標的化されたイメージングは、in vitroおよびin vivoでそれらを追跡することを可能にする。 同じサンプルの異なったfluorophoresを使用してまた複数の分子の同時観察を同時に可能にすることができます。 最も一般的に使用される蛍光体は、フルオレセインイソチオシアネート（FITC）、ローダミン（TRITC）、クマリンおよびシアニンの誘導体である。 これらの合成有機染料は、生体分子をタンパク質、ペプチド、抗体、核酸、細菌または酵母として標識するために使用される。 緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）のような天然に存在する蛍光色素も、生きた細胞を遺伝的に標識するために使用することができる。
- 蛍光タンパク質標識
蛍光標識は、研究者がタンパク質の立体配座ダイナミクスと分子相互作用を調査したり、より良い彼らの生物学的機能を理解するために、その動きを追跡することを可能にする（Modesti M、2011）。 受容体-リガンド結合、タンパク質構造および酵素活性へのより良い洞察を得るために、単一のペプチドも標識することができる。 蛍光色素によって分類される抗体はimmunofluorescenceの試金の抗原を検出するために生物医学的な研究で広く利用されて、またimmunodiagnosticsの必要な用具です。 信頼性の高い結果を確実にするために、フルオロフォア抱合は、抗体の抗原結合特性を妨害すべきではない（Nath N et al,2016）。 - 核酸の蛍光標識
蛍光ベースのアッセイは、核酸の構造、機能およびダイナミクスの生物物理学的研究において主要な役割を果たしている。 標識法およびイメージングシステムの最近の進歩は、DNAおよびRNAの、および他の細胞成分との相互作用のin vivoでの直接観察を可能にしている。 核酸の生細胞イメージングは、クロマチンの組織と遺伝子発現調節をよりよく理解するための新しいパスを開いています。 （Dirks RW et al、2018）。 - 多糖類の蛍光標識
ヘパリンなどの複雑な多糖類は、細胞外マトリックスの構造成分である。 これらの多糖類は、細胞接着、遊走および増殖に必須である（Ｐｒｉｇｅｎｔ−Ｒｉｃｈａｒｄ Ｓ．ｅｔ ａ ｌ，１ ９ ９ ８）。 いくつかの化合物は、それらの抗凝固剤、抗血栓性、抗炎症性、抗ウイルス性および抗血管新生性のためにも知られている。 蛍光ベースの方法は、新しい生物活性多糖類を同定し、それらの生物学的機能を特徴付けることを容易にする（Roger O et al、2002）。 - 脂質の蛍光標識
細胞脂質は、エネルギー貯蔵、細胞膜の形成、および細胞内シグナル伝達プロセスのための細胞において重要な役割を果たす（Maekawa m.And Fairn G、2014）。 親油性色素ナイルレッドは、細胞内脂質の位置および組織を分析するために細胞内脂質を染色するために広く使用されている（Greenspan P et al,1985）。 さらに、脂質動態を研究するために、生きた細胞における特異的標識も可能である（Schultz C et al,2010）。
蛍光標識技術
一般的に使用される蛍光標識方法は、化学的、酵素的、ペプチド/タンパク質タグおよび遺伝子標識技術を使用する（Sahoo H、2012、Toseland CP、2013）。化学標識技術：蛍光色素は、化学修飾（共有結合または非共有結合）を介して標的分子にドッキングする。
- 化学標識技術：蛍光色素は、化学修飾（共有結合ま 化学分類方法にfluorophoresの広い範囲と強く、行い易く、非常に有効であるので複数の利点があります。 それらはin vivoよりもむしろin vitroの調査のためにより適しています。
- 酵素標識技術：酵素反応は、in vivoおよびin vitroでの高速、高効率かつ選択的標識を可能にし、タンパク質または全細胞を標的とするために使用するこ しかし、標識のサイズが大きいために、標的分子の機能との干渉が起こり得る。
- ペプチド/タンパク質タグ：最近開発され、非常に有望な技術は、折り畳みや分子の機能を破壊しない短い蛍光タグの取り込みを介してタンパク質の特異的かつ選択的な標識を可能にする。 この技術は、実行することも容易であり、ペプチドタグ特異性に応じて、単一のタンパク質の異なる部位を調査するために使用することができる。
- 遺伝的標識：遺伝的標識は、タンパク質ドメイン、小さなペプチドまたは蛍光色素でマークされ、in vivoで染色体に沿った部位に特異的に付着することが このアプローチは欠失または重複のような染色体の異常の検出を可能にします。
- マルチカラーラベリング: 生きている細胞イメージ投射と流れのcytometryの適用のための共通の条件は多数のfluorescently付けられた蛋白質に同時に続くか、または検出する機能である。 この目的のために、非常に大きなストークスシフトを有する特別に設計された染料を使用することができ、異なる生化学プロセスの同時監視を可能に
蛍光ベースのアッセイ
蛍光ベースのアッセイは、光粒子または光子に曝された後に光を再放出する蛍光色素の能力に依存する。
蛍光ベースのアッセイは、光粒子または光子に曝された後に光を再放出する蛍光色素の能力に依存する。 励起光と発光光の波長の差、いわゆるストークスシフトは、顕微鏡やイメージングシステムで検出することができます。 各fluorophoreに特定のStokesの転位がある。 異なった試金は研究者が生体分子を集中させ、リアルタイムのそれらを観察し、相互作用を調査し、酵素の活動を調査することを可能にする。
- 蛍光顕微鏡
蛍光顕微鏡は、細胞および細胞成分の同定および高い特異性を有する細胞生理学のモニタリングを可能にする。 蛍光顕微鏡は、光学フィルタを用いて励起光から放出された光を分離する。 二つの指標の使用はまた、同時に異なる生体分子の同時観察を可能にする。 従来のイメージングシステムは、物理的な回折限界のために200-300nmの分解能を可能にするのに対し、STED（誘導放出枯渇）としての新しい超解像蛍光顕微鏡は、こ
- フローサイトメトリー
フローサイトメトリーは、特定の蛍光色素からの信号を測定するための基礎研究および臨床実践に広く使用されています。 細胞および粒子は、標識された抗体またはリガンドによって産生される蛍光を定量化する検出器の光ビームを通過するときに分析され、最終的に「実 これらのマーカーは、細胞表面または細胞内部の特定の分子に結合し、それらの検出および定量を可能にする。 サイズおよび体積としてのいくつかのパラメータは、単一細胞上で測定することができ、異なる細胞型を単離し、特徴付けることができる（Nolan JT and Condello D,2013）。 フローサイトメトリーは、免疫学、血液学、移植医学、腫瘍学、遺伝学などの分野で幅広い用途を見出しています。
- 蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）
蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）は、染色体上の特定のDNA配列の局在を可能にします。 蛍光DNAまたはRNAプローブは、相補的な標的DNA配列をハイブリダイズおよび同定するために使用される。 魚は伝統的に、例えばヒトゲノムプロジェクトの間に、染色体上の遺伝子をマッピングするために使用されてきた。 今日、蛍光in situハイブリダイゼーションは、主に染色体異常の検出または癌細胞の分析における診断目的のために使用される（O’Connor C、2008）。
- 蛍光相関分光法（FCS）
蛍光相関分光法（FCS）は、化学的、生物学的または物理的な影響によって引き起こされる蛍光色素の蛍光強度の時間的変化の分析を FCSは、薬物とDNAとの相互作用を調査するために最初に導入され、現在ではタンパク質の濃度と凝集レベルを決定し、分子相互作用を観察するための敏感なツールとなっています(Tian Y et al,2011)。
- マイクロアレイ
マイクロアレイは、異なる条件下での遺伝子発現の研究を可能にします。 何千もの遺伝子は、DNAチップ上で同時に検査することができます。 これらは、蛍光標識されたmRNA/cDNA分子に選択的に結合することができる既知のDNA配列を含む小さな斑点で印刷された顕微鏡スライドである。 ハイブリダイゼーションの後、ＤＮＡチップが読み出され、データが遺伝子発現プロファイルを作成するために使用される（Ｈｏｅｎ ＰＡＣ ｅ ｔ ａ ｌ，２ ０ ０ ３）。
蛍光ラベル：ライブセルイメージング
蛍光顕微鏡は、細胞および細胞成分の同定および高い特異性を有する細胞生理学のモニタリングを可能にする。 蛍光顕微鏡は、光学フィルタを用いて励起光から放出された光を分離する。 二つの指標の使用はまた、同時に異なる生体分子の同時観察を可能にする。 従来のイメージングシステムは、物理的な回折限界のために200-300nmの分解能を可能にするのに対し、STED（誘導放出枯渇）としての新しい超解像蛍光顕微鏡は、こ
フローサイトメトリーは、特定の蛍光色素からの信号を測定するための基礎研究および臨床実践に広く使用されています。 細胞および粒子は、標識された抗体またはリガンドによって産生される蛍光を定量化する検出器の光ビームを通過するときに分析され、最終的に「実 これらのマーカーは、細胞表面または細胞内部の特定の分子に結合し、それらの検出および定量を可能にする。 サイズおよび体積としてのいくつかのパラメータは、単一細胞上で測定することができ、異なる細胞型を単離し、特徴付けることができる（Nolan JT and Condello D,2013）。 フローサイトメトリーは、免疫学、血液学、移植医学、腫瘍学、遺伝学などの分野で幅広い用途を見出しています。
蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）は、染色体上の特定のDNA配列の局在を可能にします。 蛍光DNAまたはRNAプローブは、相補的な標的DNA配列をハイブリダイズおよび同定するために使用される。 魚は伝統的に、例えばヒトゲノムプロジェクトの間に、染色体上の遺伝子をマッピングするために使用されてきた。 今日、蛍光in situハイブリダイゼーションは、主に染色体異常の検出または癌細胞の分析における診断目的のために使用される（O’Connor C、2008）。
蛍光相関分光法（FCS）は、化学的、生物学的または物理的な影響によって引き起こされる蛍光色素の蛍光強度の時間的変化の分析を FCSは、薬物とDNAとの相互作用を調査するために最初に導入され、現在ではタンパク質の濃度と凝集レベルを決定し、分子相互作用を観察するための敏感なツールとなっています(Tian Y et al,2011)。
マイクロアレイは、異なる条件下での遺伝子発現の研究を可能にします。 何千もの遺伝子は、DNAチップ上で同時に検査することができます。 これらは、蛍光標識されたmRNA/cDNA分子に選択的に結合することができる既知のDNA配列を含む小さな斑点で印刷された顕微鏡スライドである。 ハイブリダイゼーションの後、ＤＮＡチップが読み出され、データが遺伝子発現プロファイルを作成するために使用される（Ｈｏｅｎ ＰＡＣ ｅ ｔ ａ ｌ，２ ０ ０ ３）。
タイムラプス蛍光顕微鏡を用いた細胞プロセスの速度論的観察は、ライブセルイメージングは、細胞の生 タイムラプス顕微鏡における一つの主要な課題は、光漂白に起因する光毒性効果を最小限に抑えることです。 露光は漸進的に蛍光性信号の減少と細胞を傷つけることができる遊離基の形成に導く蛍光分子を破壊します。 したがって、生細胞イメージングの方法では、できるだけ光の露出を減らすことと、細胞を観察するための有用な信号を得ることとのバランスを見つけることが重要である。 科学者はまた密接に生体内の原動力を複製することを可能にする生理学的な環境を作成する必要があります。 （EttingerおよびWittmann T、2014）。
PromoCell蛍光ラベリング
新しい蛍光色素の可用性は、生体分子の高感度な検出とその相互作用の分析の可能性を劇的に変えました。 改良された蛍光染料は今細胞構造および細胞プロセスの前に不可能な調査を可能にしています。 PromoCellは多様な生体分子の蛍光標識のための良質のfluorophoresの広い範囲を提供します: 蛋白質の分類、抗体の分類、核酸の分類（dnaの分類、RNAの分類）、また完全な分類のキットおよび使用可能な蛍光抱合物を分類します。
私たちのPromoFluor染料は、よく知られている、主要なfluorophoresへの費用対効果の高い代替品であり、青から遠赤までの波長スペクトルにまたがっています。 それらは顕著な蛍光性の強度およびphotostability、強い光吸収、高い蛍光性のquantumの収穫およびよい水容解性を示し、蛍光顕微鏡検査、蛍光in situのハイブリダイゼーション（FISH）、蛍光相関分光法（FCS）およびマイクロアレイ（蛋白質、DNA）に使用することができる。 そのうちのいくつかは理想的に多色刷りの分類するか、または流れのcytometryの適用に適するそれらを作る特大のStokesの転位を提供する。 PromoFluorの染料は利用できます例えば。 NHSのエステル、マレイミドおよびアミノ変更されたラベルとして共有結合の準備ができたまたはビオチン、phalloidinおよびdeoxynucleotides(dUTPs)が付いている抱合物として。 さらに、私達はまた異なったPromoFluorの染料を良質蛋白質&の抗体の分類のキットに提供します。