ブドウ球菌の誘導性のクリンダマイシンの抵抗はディスク拡散方法によって検出することができますクリンダマイシンとエリスロマイシンを使用しています。 Dテストはブドウ球菌の隔離集団が接種された寒天の版に2μ gクリンダマイシンディスクへの近さに15μ gエリスロマイシンディスクを置くディスク; プレートは、その後、一晩インキュベートされます。
エリスロマイシンディスクに近位のクリンダマイシンディスクの周りの阻害ゾーンの平坦化(エリスロマイシンディスクのゾーンを生成する)文字dのような形をした阻害)は陽性の結果と考えられ、エリスロマイシンがクリンダマイシン耐性を誘導したことを示す(陽性の”dゾーンテスト”)。 エリスロマイシン耐性分離株の場合、誘導試験は、クリンダマイシンの結果が感受性(誘導試験が陰性の場合)または耐性(誘導試験が陽性の場合)として報告されるべきかどうかを研究室が判断するのに役立ちます。
エリスロマイシンとクリンダマイシンの作用機序と耐性の発達
エリスロマイシン(マクロライド)とクリンダマイシン(リンコサミド)は、細菌細胞の50sリボソームサブユニットに結合することによってタンパク質合成を阻害する抗菌剤の二つの異なるクラスを表す。 ブドウ球菌では、これらの抗菌剤の両方に対する耐性は、それらのリボソーム標的部位のメチル化を介して起こり得る。 このような抵抗性は、典型的には、erm遺伝子によって媒介される。
誘導性クリンダマイシン耐性の臨床的意義:
マクロライド-リンコサミド-ストレプトグラミンB(MLSB)耐性は、標的側修飾機構によって媒介され、エリスロマイシン、クリンダマイシン、およびストレプトグラミンBに対する耐性をもたらす。 このメカニズムは、することができます
- Rrnaメチラーゼが常に生成される構成的、
in vitro試験が行われている場合黄色ブドウ球菌単離物は、構成的抵抗性を有するエリスロマイシンおよびクリンダマイシンに耐性があります。 - またはメチラーゼが誘導剤の存在下でのみ生成される場合、誘導性であり得る(注:エリスロマイシンはマクロライド-リンコサミド-ストレプトグラミンB(MLSB)抵抗性の有効な誘導剤である)。 誘導性の抵抗の隔離集団はエリスロマイシンに対して抵抗力があるが、定期的なinvitroのテストのClindamycinに敏感ようである。
誘導性クリンダマイシン耐性試験(D試験)の臨床的意義
クリンダマイシンは、その優れた薬物動態学的および薬力学的特性のために、疑われる黄色ブドウ球菌感染症の経験的治療のための魅力的な薬剤である。 MRSA感染症の治療のためのクリンダマイシン療法の臨床的失敗は、クリンダマイシン感受性であるがエリスロマイシン耐性であった株について文書化されている。 失敗はクリンダマイシンに対する誘導性抵抗性によるものであった。
このような場合、In vivoでは、クリンダマイシンによる治療は、臨床的障害につながる可能性のある構成的erm変異体を選択することができる。 クリンダマイシン耐性は、構成的または誘導性であり得る。 定期的な抗生物質の感受性テストはこれらの緊張を識別できません。 D(誘導性クリンダマイシン耐性)試験は、誘導性クリンダマイシン耐性を検出するために用いられる。
誘導性クリンダマイシン耐性(D)試験のための手順:
- 0を準備する。エリスロマイシン耐性黄色ブドウ球菌分離株の5McFarland標準懸濁液
- ミュラーヒントン寒天(MHA)プレート内の細菌の芝生培養を行います。
- クリンダマイシン(2-μ g)とエリスロマイシン(15-μ g)のディスクを約15mm離して置く(エッジからエッジまで測定)。
- プレートを16-18時間37℃でインキュベートする
Dテストの結果の解釈
クリンダマイシンディスクの周りの明確なD字型の阻害ゾーンは、DまたはD+とラベル付けされたD表現型として指定されている。 他の四つの非誘導表現型(陰性、かすんだDゾーン、耐性、および感受性として指定)もディスク拡散の結果で観察されています