高発色性

DNAの熱変性は、融解とも呼ばれ、二重らせん構造を巻き戻して一本鎖DNAを形成させる。 溶液中のDNAがその融解温度(通常8 0℃以上)を超えて加熱されると、二本鎖DNAが巻き戻されて一本鎖DNAが形成される。 基盤はunstackedになり、こうしてより多くのライトを吸収できます。 それらの本来の状態では、DNAの塩基は260nm波長領域の光を吸収する。 塩基がスタックされなくなると、最大吸光度の波長は変化しないが、吸収量は37%増加する。 二つの一本鎖に解離する二本鎖DNA鎖は、鋭い協調遷移を生成する。

高発色性は、温度変化としてDNAの状態を追跡するために使用することができます。 遷移/融解温度(T m)は、UV光の吸光度が最大値と最小値の間で5 0%である温度、すなわちDNAの5 0%が変性される温度である。 一価の陽イオンの集中の十倍の増加は16.6°C.によって温度を増加させます。

hyperchromic効果は変性にDNAの吸光度の顕著な増加です。 DNAの二本鎖は、主にスタッキング相互作用、水素結合および相補的な塩基間の疎水性効果によって一緒に結合される。 水素結合は芳香環の共鳴を制限するため、サンプルの吸光度も制限されます。 DNA二重らせんを変性剤で処理すると、二重らせん構造を保持する相互作用力が破壊される。 二重らせんは、ランダムなコイル状の立体配座にある二つの一本鎖に分離します。 このとき、多くの塩基が遊離形態であり、相補的な塩基と水素結合を形成しないため、塩基-塩基相互作用が減少し、DNA溶液のUV吸光度が増加する。 その結果、一本鎖DNAの吸光度は、同じ濃度の二本鎖DNAの吸光度よりも3 7%高くなる。

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