説明
Thermo Scientific Pierce Ellman’s Reagent(DTNB)はスルフヒドリル基と反応して着色生成物を生成し、溶液中の還元システインおよび他の遊離スルフヒドリルを測定する信頼性の高い方法を提供する。
Ellman’S Reagent(5,5′-dithio-bis-)は、システインなどのスルフヒドリル含有化合物の標準曲線と比較することにより、試料中のスルフヒドリル基を推定するために使用され あるいは、スルフヒドリル基は、TNBの吸光係数（14,150M-1cm-1at412nm）を用いてアッセイすることができる。 エルマン試薬は、スルフヒドリル推定以外の用途に使用されており、プレカラム誘導体化手順を用いたhplcによるアルキルチオールの決定や、いくつかの酵素の活性部位におけるチオールの研究などに使用されている。
Ellman’S Reagentの特徴：
*スルフヒドリルアッセイ—検出可能なTNB製品を得るために遊離（還元）スルフヒドリル基（—SH）と定量的に反応する
•比色検出-着色された製品は、; ε=14,150/M·cm)
•実績のある方法—よく特徴付けられた化学は、消光係数の計算を使用して、またはシステイン標準と比較して、ペプチドまたはタンパク質スルフヒドリル基の定量を提供します
試薬特性
•代替名:DTNB,Ellman’S Reagent
•化学名:5,5′-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid)
•反応性:スルフヒドリル基(-SH)
•化学式:C14h8N2O8S2•CAS番号：69—78-3•分子量：396.35•フォーム: 黄色の結晶性粉末
DTNBは、遊離のスルフヒドリル基と反応して、混合ジスルフィドと2-ニトロ-5-チオ安息香酸（TNB）を得る。 この反応におけるDTNBの標的は、遊離スルフヒドリル基の共役塩基（R—S-）である。 したがって、この反応の速度は、（1）反応pH、（2）スルフヒドリルのpKa’、および（3）立体効果および静電効果のいくつかの要因に依存する。 ＴＮＢはこの反応で生成される着色種であり，可視範囲で高いモル吸光係数を有する。 TNBのモル吸光係数は、もともとEllman(1959)によって412nmおよびpH8.0で13,600M-1cm-1であると報告されていた。 その結果、この値は文献で頻繁に引用されています。 しかし、後の研究では、モル吸光係数は412nmで14,150M-1cm-1の値によってより正確に反映されることが示されている。 TNBの絶滅は7.6と8.6の間のpHの変化によって影響されません。 しかし、TNBの消滅は他の溶媒では異なっている。