Wat is Verhoeff-van Gieson ‘ s stain?Ira van Gieson beschreef voor het eerst het Verhoeff-van Gieson (VVG) kleuring protocol in 1889 als een methode voor het evalueren van collageenvezels in neuraal weefsel. Frederick Herman Verhoeff, een Amerikaanse chirurg en patholoog, wijzigde vervolgens de vlek in 1908, als een methode om collageen en andere bindweefsels te onderscheiden, en elastische vezels in het bijzonder te benadrukken.
wat kleurt het?
elastische vezels zijn bindweefselvezels die weefsels kunnen uitrekken, en zijn overvloedig aanwezig in de aorta, bijvoorbeeld, waar ze flexibiliteit bieden aan dit grote bloedvat. Ze zijn ook aanwezig in andere weefsels die flexibiliteit nodig hebben, zoals huid en longen.
deze fijne elastische vezels kunnen niet worden waargenomen op routinematige hematoxyline en eosine (H&E)-gekleurde weefselsecties, daarom zijn speciale vlekken nodig om ze te markeren. U kunt meer lezen over H&E in deze artikelen van het microscopie-en Beeldvormingskanaal-deel 1:Methode en Tips, Deel 2: recepten en materialen.
hoewel er talrijke speciale vlekken zijn voor de identificatie van elastische vezels, wordt VVG het meest gebruikt omdat het snel is en intense kleuring van elastische vezels produceert.
algemene principes van de vlek
VVG is een tweedelige combinatievlek die differentiatie mogelijk maakt van sommige bindweefselcomponenten in een weefsel die niet gemakkelijk te onderscheiden zijn door H&e kleuring:
Verhoeff vlek component: een ijzer-hematoxyline vlek die specifiek is voor elastische vezels. Het vormt sterke banden met elastine, de belangrijkste component van elastisch bindweefsel.
van Gieson stain component: een counterstain die specifiek is voor collageen. Het is vernoemd naar de Amerikaanse bacterioloog Ira van Gieson en bestaat uit twee zure kleurstoffen – picric acid en acid fuchsin.
de techniek bestaat uit het kleuren van het weefselmonster met een hematoxylinekleur die bestaat uit ijzerchloride en jodium, en bestaat uit twee hoofdstappen:
(1) overspuiten: deze stap omvat een complex van hematoxyline–ijzerchloride–jodium. De laatste twee componenten werken als beitsmiddelen om de hematoxyline vlek op de weefsels te bevestigen, en werken ook als oxiderende middelen om hematoxyline in hemateïne om te zetten. Het kleuringsmechanisme impliceert waarschijnlijk waterstofbandvorming tussen het hematoxyline en weefsel, hoewel de bijzonderheden van deze reactie niet goed bekend zijn. Aangezien elastine een sterke affiniteit heeft voor het ijzer-hematoxylinecomplex in de vlek, houdt het de kleurstof langer vast dan andere weefselcomponenten. Elastine blijft daardoor ook gekleurd nadat andere weefselelementen zijn ontkleurd.
(2) differentiatie: deze stap maakt gebruik van overtollig ijzerchloride mordant om de afbraak van het weefsel-mordant-kleurstof complex. Natriumthiosulfaat wordt gebruikt om overtollig jodium te verwijderen, en de tegenstain van Gieson wordt gebruikt om contrast met de hematoxylinevlek te produceren. De kleurstof wordt aangetrokken door het grote volume beitsmiddel in de differentiërende oplossing en verwijderd uit het weefsel. Het elastische weefsel, aan de andere kant, heeft de sterkste affiniteit voor de ijzercomponent van de vlek.
bijgevolg is het eindproduct van de reactie zodanig dat elastische vezels en celkernen zwart worden gekleurd door de Verhoeff-component. Collageen en spier worden rood gekleurd door de tegenstain van Gieson, wat ook resulteert in gele kleuring van celcytoplasma en andere weefselcomponenten.
Wie gebruikt van Gieson stain?
deze vlek wordt op grote schaal gebruikt voor zowel diagnostische als onderzoeksdoeleinden.
in diagnostische laboratoria wordt VVG gebruikt om de aanwezigheid of afwezigheid van elastische vezels in weefsels te identificeren. Pathologen kunnen het bijvoorbeeld gebruiken om verlies van elastisch weefsel in de long bij patiënten met emfyseem aan te tonen, en het verdunnen en verlies van elastische vezels in bloedvaten van patiënten met arteriosclerose.
evenzo kunnen onderzoekers die een van deze soorten ziekten onderzoeken, ook routinematig VVG-gekleurde weefselsecties onderzoeken om de aanwezigheid of afwezigheid van elastische vezels in relevante weefsels te detecteren. Andere onderzoekers kunnen de vlek eenvoudig gebruiken om bindweefselvezels in weefsels van belang te onderscheiden.
Hoe gebruikt u Verhoeff-van Gieson stain in uw lab?
heeft dit u geholpen? Dan kunt u delen met uw netwerk.