Plama Verhoeff-van Gieson: specjalna plama histologiczna dla włókien elastycznych

co to jest plama Verhoeff-van Gieson?

Ira Van Gieson po raz pierwszy opisał protokół barwienia Verhoeff-van Gieson (VVG) w 1889 roku jako metodę oceny włókien kolagenowych w tkance nerwowej. Frederick Herman Verhoeff, amerykański chirurg i patolog, zmodyfikował plamę w 1908 roku, jako metodę różnicowania kolagenu i innych tkanek łącznych, a zwłaszcza podkreślenia włókien elastycznych.

co to plami?

włókna elastyczne to włókna tkanki łącznej, które umożliwiają rozciąganie tkanek i są obfite w aorcie, na przykład, gdzie zapewniają elastyczność tego dużego naczynia krwionośnego. Są one również obecne w innych tkankach, które wymagają elastyczności, takich jak skóra i płuca.

tych drobnych włókien elastycznych nie można zazwyczaj zobaczyć na rutynowych hematoksylinach i eozynach (H& E)-zabarwionych fragmentach tkanek, dlatego wymagane są specjalne plamy, aby je podkreślić. Możesz przeczytać więcej o H & E w tych artykułach z kanału mikroskopii i obrazowania-Część 1:Metody i porady, część 2: Przepisy i materiały.

Chociaż istnieje wiele specjalnych plam do identyfikacji włókien elastycznych, VVG jest najczęściej stosowany, ponieważ jest szybki i powoduje intensywne zabarwienie włókien elastycznych.

ogólne zasady bejcy

VVG jest dwuczęściową kombinacją bejcy, która umożliwia różnicowanie niektórych składników tkanki łącznej w tkance, które nie są łatwo odróżnione przez H&e barwienie:

Składnik bejcy Verhoeffa: plama żelazowo-hematoksylinowa specyficzna dla włókien elastycznych. Tworzy silne wiązania z elastyną, głównym składnikiem elastycznej tkanki łącznej.

van Gieson stain component: przeciwstarzeniowy specyficzny dla kolagenu. Został nazwany na cześć amerykańskiego bakteriologa Ira van Giesona i zawiera dwa kwaśne barwniki – kwas pikrynowy i kwas fuchsin.

technika polega na barwieniu próbki tkankowej plamą hematoksyliny złożoną z chlorku żelaza i jodu i obejmuje dwa główne etapy:

(1) przebarwienie: ten etap obejmuje kompleks hematoksyliny–chlorek żelaza–JOD. Te dwa ostatnie składniki działają jako zaprawy, aby naprawić plamę hematoksyliny w tkankach, a także działają jako środki utleniające, aby pomóc przekształcić hematoksylinę w hemateinę. Mechanizm barwienia prawdopodobnie polega na tworzeniu wiązania wodorowego między hematoksyliną a tkanką, chociaż specyfika tej reakcji nie jest dobrze znana. Ponieważ elastyna ma silne powinowactwo do kompleksu żelazo-hematoksylina w plamie, utrzymuje barwnik dłużej niż inne składniki tkanki. Dlatego elastyna pozostaje zabarwiona nawet po odbarwieniu innych elementów tkanki.

(2) : ten etap wykorzystuje nadmiar zaprawy chlorku żelaza do rozkładu kompleksu tkankowo-zaprawowo-barwnikowego. Tiosiarczan sodu służy do usuwania nadmiaru jodu, a przeciwstaina van Giesona służy do wytworzenia kontrastu z plamą hematoksylinową. Barwnik jest przyciągany do dużej objętości zaprawy w roztworze różnicującym i usuwany z tkanki. Z drugiej strony tkanka elastyczna ma najsilniejsze powinowactwo do żelaznego składnika plamy.

w związku z tym produkt końcowy reakcji jest taki, że elastyczne włókna i jądra komórkowe są zabarwione na czarno przez składnik Verhoeffa. Kolagen i mięśnie są zabarwione na Czerwono przez przeciwstainę van Giesona, co powoduje również żółte zabarwienie cytoplazmy komórkowej i innych składników tkanki.

kto używa plamy Van Gieson?

ta plama jest szeroko stosowana zarówno do celów diagnostycznych, jak i badawczych.

w laboratoriach diagnostycznych VVG służy do identyfikacji obecności lub braku włókien elastycznych w tkankach. Na przykład, patolodzy mogą używać go wykazać utratę tkanki elastycznej w płucach u pacjentów z rozedmą płuc, i rozrzedzenie i utrata włókien elastycznych w naczyniach krwionośnych pacjentów z miażdżycą.

podobnie, naukowcy badający każdy z tych rodzajów chorób mogą również rutynowo badać sekcje tkanki barwione VVG w celu wykrycia obecności lub braku włókien elastycznych w tkankach będących przedmiotem zainteresowania. Inni badacze mogą po prostu użyć plamy po prostu odróżnić włókna tkanki łącznej w tkankach zainteresowania.

Jak wykorzystać plamę Verhoeff-van Gieson w swoim laboratorium?

czy to ci pomogło? Następnie podziel się z siecią.

napisał Nicola Parry

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.