Test klonogenny

eksperyment obejmuje trzy główne etapy:

  1. leczenie stosuje się do próbki komórek.
  2. komórki są „platerowane” w naczyniu do hodowli tkankowej i mogą rosnąć.
  3. produkowane kolonie są stałe, barwione i liczone.

Po zakończeniu eksperymentu mierzy się procent komórek, które przeżyły leczenie. Graficzna reprezentacja przeżycia w stosunku do stężenia leku lub dawki promieniowania jonizującego nazywana jest krzywą przeżycia komórki.

w przypadku testów cząsteczek zabijających komórki, przetrwałą frakcję komórek wykorzystuje się do przybliżenia rozkładu Poissona cząsteczek wirusa między komórkami, a tym samym określenia liczby CKPs napotkanych przez każdą komórkę.

każdy rodzaj komórki może być użyty w eksperymencie, ale ponieważ celem tych eksperymentów w badaniach onkologicznych jest odkrycie bardziej skutecznych metod leczenia raka, ludzkie komórki nowotworowe są typowym wyborem. Komórki albo pochodzą z przygotowanych „linii komórkowych”, które zostały dobrze zbadane i których ogólne cechy są znane, lub z biopsji guza u pacjenta. Komórki umieszcza się w płytkach Petriego lub w płytkach zawierających kilka okrągłych „studzienek”.”Poszczególne liczby komórek są platerowane w zależności od eksperymentu; w przypadku eksperymentu obejmującego napromieniowanie zwykle jest płytka większa liczba komórek ze zwiększającą się dawką promieniowania. Na przykład, przy dawce 0 LUB 1 szarości promieniowania, 500 komórek może być platerowane, ale przy 4 lub 5 szarości, 2500 może być platerowane, ponieważ bardzo duża liczba komórek jest zabijana na tym poziomie promieniowania i efekty konkretnego leczenia byłyby niezauważalne.

liczenie Kolonii komórkowych odbywa się zwykle pod mikroskopem i jest dość żmudne. Ostatnio opracowano maszyny, które wykorzystują algorytmy do analizy obrazów. Są one rejestrowane przez skaner obrazu lub zautomatyzowany mikroskop, który może całkowicie zautomatyzować proces liczenia. Jedna z takich automatycznych maszyn działa poprzez akceptację określonych rodzajów płyt komórkowych przez gniazdo (podobnie jak odtwarzacz CD), zrobienie zdjęcia i przesłanie go do komputera w celu natychmiastowej analizy. Niezawodne liczniki są dostępne w ciągu kilku sekund.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.