medlemmer af Ras superfamilien af proteiner fungerer som reguleret BNP/GTP skifter, der cykler mellem aktive GTP-komplekserede og inaktive BNP-komplekserede tilstande. Guaninnukleotidudvekslingsfaktorer (GEF ‘ er) stimulerer dannelsen af den GTP-bundne tilstand, mens gtpase-aktiverende proteiner (huller) katalyserer dannelsen af den BNP-bundne tilstand. Vi beskriver tre undersøgelser, der evaluerer virkningsmekanismen for GEF ‘ er for RAS (SOS1 og RasGRF/CDC25) eller Ras-relaterede Rho (Dbl og Vav) proteiner. Vækstfaktormedieret aktivering af Ras antages at være medieret ved aktivering af Ras GEF ‘ er (CDC25/GRF og SOS1/2). Selvom mekanismerne for RAS GEF-regulering er uklare, antyder nylige undersøgelser, at translokation af SOS1 til plasmamembranen, hvor Ras er placeret, kan være ansvarlig for Ras-aktivering. Vores observation, at tilsætningen af Ras-plasmamembranmålretningssekvensen til de katalytiske domæner i CDC25 og SOS1 i høj grad forbedrede deres transformations-og transaktiveringsaktiviteter (henholdsvis 10-50 gange og 5-10 gange) antyder, at membrantranslokation alene er tilstrækkelig til at forstærke GEF-aktivering af Ras. Vi har bestemt, at to Ras-relaterede proteiner, betegnet R-Ras og R-Ras2/TC21, kan udløse den ondartede transformation af NIH 3T3-celler via aktivering af Ras-signaltransduktionsvejen. Desuden observerede vi ligesom Ras og R-Ras, at TC21 GTPase-aktivitet blev stimuleret af Ras-huller. Vi observerede imidlertid, at både SOS1 og CDC25 var aktivatorer af normal TC21, men ikke R-Ras, transformerende aktiviteter. Derfor kan TC21, men ikke R-Ras, aktiveres af de samme ekstracellulære signalhændelser, der aktiverer Ras-proteiner. DBL-familieproteiner menes at fungere som GEF ‘ er og aktivatorer af den Ras-relaterede Rho-familie af proteiner. Imidlertid er en DBL-familie onkogen, betegnet Vav, rapporteret at være en GEF for Ras-proteiner. Derfor var vi interesserede i at afgøre, om DBL-familie onkogener forårsager transformation ved at udløse den konstitutive aktivering af Rho-eller Ras-proteiner. Vores resultater antyder, at DBL-onkogener forårsager transformation via en Ras-uafhængig aktivering af MAP-kinaser og Rho-familieproteiner.