Klonogent assay

eksperimentet involverer tre hovedtrin:

  1. behandlingen påføres en prøve af celler.
  2. cellerne er “belagt” i en vævskulturbeholder og får lov til at vokse.
  3. de producerede kolonier er faste, farvede og tælles.

Ved afslutningen af eksperimentet måles procentdelen af celler, der overlevede behandlingen. En grafisk repræsentation af overlevelse versus lægemiddelkoncentration eller dosis af ioniserende stråling kaldes en celleoverlevelseskurve.

til celledrabende Partikelassays bruges den overlevende fraktion af celler til at tilnærme Poisson-fordelingen af viruspartikler blandt celler og derfor bestemme antallet af CKP ‘ er, som hver celle støder på.

enhver type celle kunne anvendes i et eksperiment, men da målet med disse eksperimenter i onkologisk forskning er opdagelsen af mere effektive kræftbehandlinger, er humane tumorceller et typisk valg. Cellerne kommer enten fra forberedte” cellelinjer”, som er blevet godt undersøgt, og hvis generelle egenskaber er kendt, eller fra en biopsi af en tumor hos en patient. Cellerne sættes i petriskåle eller i plader, der indeholder flere cirkulære “brønde.”Bestemte antal celler er belagt afhængigt af eksperimentet; for et eksperiment, der involverer bestråling, er det sædvanligt at plade større antal celler med stigende dosis stråling. For eksempel kan 500 celler i en dosis på 0 eller 1 Grå stråling blive belagt, men ved 4 eller 5 Grå kan 2500 blive belagt, da meget stort antal celler dræbes på dette strålingsniveau, og virkningerne af den specifikke behandling ville være uobserverbare.

tælling af cellekolonierne sker normalt under et mikroskop og er ret kedeligt. For nylig er der udviklet maskiner, der bruger algoritmer til at analysere billeder. Disse er enten fanget af en billedscanner eller et automatiseret mikroskop, der fuldstændigt kan automatisere optællingsprocessen. En sådan automatiseret maskine fungerer ved at acceptere visse typer celleplader gennem en slot (ikke i modsætning til en CD-afspiller), tage et fotografi og uploade det til en computer til øjeblikkelig analyse. Pålidelige tællinger er tilgængelige på få sekunder.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.