Hvad er Verhoeff-van Giesons plet?
Ira Van Gieson beskrev først verhoeff-van Gieson (VVG) farvningsprotokol i 1889 som en metode til evaluering af kollagenfibre i neuralt væv. Frederick Herman Verhoeff, en amerikansk kirurg og patolog, ændrede derefter pletten i 1908 som en metode til at differentiere kollagen og andet bindevæv og især fremhæve elastiske fibre.
hvad pletter det?
elastiske fibre er bindevævsfibre, der tillader væv at strække sig og er rigelige i aorta, for eksempel hvor de giver fleksibilitet til dette store blodkar. De er også til stede i andre væv, der har brug for fleksibilitet, såsom hud og lunge.
disse fine elastiske fibre kan typisk ikke ses på rutinemæssige hæmatoksylin og eosin (H&E)-farvede vævssektioner, derfor kræves der specielle pletter for at fremhæve dem. Du kan læse mere om H &E i disse artikler fra mikroskopi-og Billeddannelseskanalen-Del 1:Metode og Tips, Del 2: opskrifter og materialer.
selvom der er adskillige specielle pletter til identifikation af elastiske fibre, bruges VVG mest, fordi det er hurtigt og producerer intens farvning af elastiske fibre.
generelle principper for pletten
VVG er en todelt kombinationsplette, der muliggør differentiering af nogle bindevævskomponenter i et væv, som ikke let skelnes af H&e-farvning:
Verhoeff-pletkomponent: en jern-hæmatoksylin-plet, der er specifik for elastiske fibre. Det danner stærke bindinger med elastin, hovedkomponenten i elastisk bindevæv.
van Gieson stain component: en modplade, der er specifik for kollagen. Det blev opkaldt efter den amerikanske bakteriolog Ira van Gieson, og består af to sure farvestoffer – picrinsyre og syre fuchsin.
teknikken involverer farvning af vævsprøven med en hæmatoksylinfarvning sammensat af jernchlorid og jod og omfatter to hovedtrin:
(1) Overfarvning: dette trin involverer et kompleks af hæmatoksylin–jernchlorid–iod. De to sidstnævnte komponenter fungerer som mordanter for at fiksere hæmatoksylinpletten til vævene og fungerer også som iltningsmidler for at hjælpe med at omdanne hæmatoksylin til hæmatein. Farvningsmekanismen involverer sandsynligvis dannelse af hydrogenbindinger mellem hæmatoksylinet og vævet, skønt specifikationerne for denne reaktion ikke er velkendte. Da elastin har en stærk affinitet for jern-hæmatoksylinkomplekset i pletten, holder det farvestoffet længere end andre vævskomponenter. Elastin forbliver derfor farvet, selv efter at andre vævselementer er affarvet.
(2) differentiering: dette trin bruger overskydende jernchloridmordant til at nedbryde vævsmordantfarvekomplekset. For at fjerne overskydende jod anvendes natriumthiosulfat, og Van Gieson-kontrasten bruges til at fremstille kontrast med hæmatoksylinpletten. Farvestoffet tiltrækkes af det store volumen mordant i den differentierende opløsning og fjernes fra vævet. Det elastiske væv har derimod den stærkeste affinitet for jernkomponenten i pletten.
følgelig er slutproduktet af reaktionen sådan, at elastiske fibre og cellekerner farves sort af Verhoeff-komponenten. Kollagen og muskler farves rødt af Van Gieson-kontrasten, hvilket også resulterer i gul farvning af cellecytoplasma og andre vævskomponenter.
Hvem bruger Van Gieson stain?
denne plet bruges bredt til både diagnostiske og forskningsformål.
i diagnostiske laboratorier bruges VVG til at identificere tilstedeværelsen eller fraværet af elastiske fibre i væv. For eksempel kan patologer bruge det til at demonstrere tab af elastisk væv i lungen hos patienter med emfysem og udtynding og tab af elastiske fibre i blodkar hos patienter med arteriosklerose.
tilsvarende kan forskere, der undersøger nogen af disse typer sygdomme, også rutinemæssigt undersøge VVG-farvede vævssektioner for at detektere tilstedeværelsen eller fraværet af elastiske fibre i væv af interesse. Andre forskere kan simpelthen bruge pletten simpelthen til at differentiere bindevævsfibre i væv af interesse.
hvordan bruger du verhoeff-van Gieson stain i dit laboratorium?
har dette hjulpet dig? Så del venligst med dit netværk.