Neuronale Stammzellen (NSCs) führen während der Entwicklung zum zentralen Nervensystem (ZNS) und tragen zur zellulären Plastizität des Gehirns erwachsener Säugetiere bei. Die Isolierung und In-vitro-Kultur von NSCs bietet die einzigartige Möglichkeit, grundlegende Fragen zur Zellproliferation, Schicksalswahl, Differenzierung und synaptischen Reifung unter experimentell definierten Bedingungen zu beantworten. Die theoretische Grundlage der NSC-Biologie beruht im Wesentlichen auf den drei definierenden Eigenschaften, die ein einzelner NSC erfüllen muss: Selbsterneuerung, Multipotenz und Klonalität. Ein beliebtes Zellkulturwerkzeug, der Neurosphere Assay, wird seit 1992 verwendet, um diese Schlüsselmerkmale von NSCs zu untersuchen. Ähnliche Tests werden jetzt für andere somatische Stammzellen einschließlich Krebsstammzellen verwendet. Jüngste Fortschritte auf dem Gebiet der Stammzellen wurden erzielt, indem das Neurosphärenkonzept überarbeitet und sein tatsächliches Potenzial und seine Grenzen aufgezeigt wurden. Dieser Artikel diskutiert die unmittelbaren Konsequenzen dieser Ergebnisse und betont die Notwendigkeit eines verbesserten und allgemein akzeptierten Protokolls für die Charakterisierung von NSCs in vitro.