¿Qué es la tinción de Verhoeff-van Gieson?
Ira Van Gieson describió por primera vez el protocolo de tinción Verhoeff-van Gieson (VVG) en 1889 como un método para evaluar las fibras de colágeno en el tejido neural. Frederick Herman Verhoeff, un cirujano y patólogo estadounidense, modificó la tinción en 1908, como un método para diferenciar el colágeno y otros tejidos conectivos, y resaltar las fibras elásticas en particular.
¿Qué mancha?
Las fibras elásticas son fibras de tejido conectivo que permiten que los tejidos se estiren, y son abundantes en la aorta, por ejemplo, donde proporcionan flexibilidad a este vaso sanguíneo grande. También están presentes en otros tejidos que necesitan flexibilidad, como la piel y los pulmones.
Estas fibras elásticas finas normalmente no se pueden ver en secciones de tejido teñidas con hematoxilina y eosina de rutina (H&E), por lo que se requieren tinciones especiales para resaltarlas. Puede leer más sobre H& E en estos artículos del Canal de Microscopía e Imágenes-Parte 1:Método y Consejos, Parte 2: Recetas y Materiales.
Aunque hay numerosas manchas especiales para la identificación de fibras elásticas, la VVG se usa más comúnmente porque es rápida y produce una tinción intensa de las fibras elásticas.
Principios generales de la tinción
VVG es una tinción combinada de dos partes que permite la diferenciación de algunos componentes del tejido conectivo en un tejido que no se distinguen fácilmente por H&Tinción E:
componente de tinción de Verhoeff: una tinción de hierro-hematoxilina específica para fibras elásticas. Forma fuertes enlaces con elastina, el componente principal del tejido conectivo elástico.
componente de tinción de van Gieson: una contra-tinción específica para el colágeno. Lleva el nombre del bacteriólogo estadounidense Ira van Gieson, y comprende dos tintes ácidos: ácido pícrico y fucsina ácida.
La técnica consiste en teñir la muestra de tejido con una tinción de hematoxilina compuesta de cloruro férrico y yodo, y consta de dos pasos principales:
(1) Sobre tinción: este paso implica un complejo de hematoxilina–cloruro férrico–yodo. Estos dos últimos componentes actúan como mordientes para fijar la mancha de hematoxilina a los tejidos, y también actúan como agentes oxidantes para ayudar a convertir la hematoxilina en hemateína. El mecanismo de tinción probablemente implica la formación de enlaces de hidrógeno entre la hematoxilina y el tejido, aunque los detalles de esta reacción no son bien conocidos. Dado que la elastina tiene una fuerte afinidad por el complejo hierro-hematoxilina en la tinción, retiene el tinte más tiempo que otros componentes del tejido. Por lo tanto, la elastina permanece manchada incluso después de que se decoloran otros elementos del tejido.
(2) Diferenciación: este paso utiliza un exceso de mordiente de cloruro férrico para descomponer el complejo de tinte de mordiente de tejido. El tiosulfato de sodio se utiliza para eliminar el exceso de yodo, y la contratintura de van Gieson se utiliza para producir contraste con la tinción de hematoxilina. El tinte es atraído por el gran volumen de mordiente en la solución diferenciadora y se elimina del tejido. El tejido elástico, por otro lado, tiene la afinidad más fuerte por el componente de hierro de la mancha.
En consecuencia, el producto final de la reacción es tal que las fibras elásticas y los núcleos celulares se tiñen de negro por el componente Verhoeff. El colágeno y el músculo se tiñen de rojo con la contra-tinción de van Gieson, que también produce tinción amarilla del citoplasma celular y otros componentes de los tejidos.
¿Quién usa la tinción de Van Gieson?
Esta tinción se utiliza ampliamente para fines de diagnóstico e investigación.
En los laboratorios de diagnóstico, la VVG se utiliza para identificar la presencia o ausencia de fibras elásticas en los tejidos. Por ejemplo, los patólogos pueden usarlo para demostrar la pérdida de tejido elástico en el pulmón en pacientes con enfisema, y el adelgazamiento y la pérdida de fibras elásticas en los vasos sanguíneos de pacientes con arteriosclerosis.
De manera similar, los investigadores que investigan cualquiera de estos tipos de enfermedades también pueden examinar rutinariamente secciones de tejido teñidas con VVG para detectar la presencia o ausencia de fibras elásticas en los tejidos de interés. Otros investigadores pueden simplemente usar la tinción simplemente para diferenciar fibras de tejido conectivo en tejidos de interés.
¿Cómo se usa la tinción Verhoeff-van Gieson en su laboratorio?
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