hunajalla on sienilääke Candida-lajeihin

Abstrakti

Candida-infektioiden esiintyvyys lisääntyy maailmanlaajuisesti. Näiden infektioiden vakavuutta pahentaa lääkeresistenssin lisääntyminen. Ilmoitamme, että tietyillä hunajilla on merkittävä sienilääke Candida-lajien kliinisiä isolaatteja vastaan. Tärkeää on, että näiden hunajien pienin estävä pitoisuus olisi saavutettavissa kliinisessä ympäristössä.

Johdanto

hunajaa on käytetty lääkkeenä tuhansia vuosia, ja sen on todettu olevan tehokas antimikrobinen aine 1. Tämä antimikrobinen vaikutus johtuu pääasiassa vetyperoksidin tuottamisesta glukoosista ja hapesta glukoosioksidaasin, mehiläisistä peräisin olevan entsyymi 2: n, avulla. Hunaja tietyistä Leptospermum-kasvilajeista, jotka ovat kotoisin Australiasta ja Uudesta-Seelannista, sisältää muita fytokemikaalisia komponentteja, jotka parantavat edelleen sen antibakteerista aktiivisuutta 3. Näiden komponenttien tarkkaa luonnetta ei ole vielä selvitetty.

vaikka useat in vitro-tutkimukset ovat osoittaneet hunajan 3-5 antibakteeriset ominaisuudet, harvat ovat tutkineet sen vaikutusta sieniin. Sieni-infektioiden esiintyvyys lisääntyy sekä yhteisö-että sairaalaympäristöissä Candida spp: llä. johtavien organismien joukossa. Candida albicans aiheuttaa suun tulehduksia, yli 50% kandidemiatapauksista 6-9 ja yli 90% emättimen kandidiaasi 10, 11. Viime aikoina kliinisissä tutkimuksissa on raportoitu enemmän muita kuin C. albicans Candida-lajeja. Candida glabratasta on tullut hallitseva ei-C. albicans Candida-lajit osallistuvat veri-ja emätintulehduksiin 9, 12-14, kun taas Candida dubliniensis on usein osallisena suunielun kandidiaasissa 15. Infektio ei-C. albicans Candida-lajeilla on tärkeitä kliinisiä seurauksia, koska monet ovat resistenttejä tavanomaiselle triatsolipohjaiselle sienilääkitykselle. Muut tavanomaiset sienilääkkeet ovat joko myrkyllisiä tai niiden teho on rajallinen, ja uusia voimakkaita sienilääkkeitä tarvitaan yhä enemmän. Nykyisen tutkimuksen tavoitteena oli selvittää eri hunajien teho C. albicans, C.-bakteerin kliinisiä isolaatteja vastaan. glabrata ja C. dubliniensis.

materiaalit ja menetelmät

C. albicansin, C. glabratan ja C. dubliniensiksen kliiniset isolaatit testattiin neljää eri hunajaa vastaan: käsittelemätöntä Jarrah-hunajaa, jonka vetyperoksidiaktiivisuus (kokonaisbakteeriaktiivisuus (kuvattu 16 kohdassa) vastaa 30, 2% fenolia 17); Medihoney® Antibacterial Honey Barrier, leptospermumin ja vetyperoksidihunajien oma seos (fytokemiallinen aktiivisuus ≥18% fenoliekvivalenttia); Comvita® – haava care 18+, puhdas Leptospermum hunaja (phytochemical activity ≥18% Fenoliekvivalentti); ja keinotekoinen hunaja, jota käytetään simuloimaan hunajan korkeita sokeripitoisuuksia (7,5 g sakkaroosia, 37,5 g maltoosia, 167,5 g glukoosia ja 202,5 g fruktoosia 85 ml: ssa steriiliä vettä).

kunkin hunajan pienin inhibitorinen pitoisuus (MIC) määritettiin nccls-mikrodiluutiomenetelmällä 18. Hunajan viisikymmentä prosenttia (w/v) kantaliuoksia rpmi-1640-väliaineessa (glutamiinin kanssa ja ilman bikarbonaattia (Sigma)) valmistettiin juuri ennen kutakin määritystä ja suodatin steriloitiin 0,2 µm huokossuodattimilla (Millipore). Kantaliuoksia laimennettiin edelleen rpmi-1640-väliaineella 96-kuoppaisissa mikrotiitterilevyissä, jotta saatiin lopulliset hunajapitoisuudet, jotka kasvoivat 1%: n (w/v) lisäyksin. Candida-isolaattisuspensiot valmistettiin steriilissä 0, 85% keittosuolaliuoksessa ja läpäisevyys 530 nm: ssä säädettiin 80-88%: iin. Suspensiot laimennettiin rpmi–1640-elatusaineella ja 25 µl lisättiin mikrotiitterilevyn kuhunkin kuoppaan välittömästi hunajaliuoksien valmistuksen jälkeen, jolloin lopullinen inokulaatti oli 0, 5-2, 5×103 pmy/ml. Kun MIC oli inkuboitu 35oc: ssa 24 tunnin ajan, se kirjattiin pienimmäksi hunajapitoisuudeksi, joka esti näkyvän kasvun. Jokainen Candida-isolaatti testattiin kahtena kappaleena ja määritykset toistettiin erillisenä päivänä. Mann-Whitney U-testiä käytettiin tilastollisesti merkittävien ryhmien arviointiin. Korrelaatiot suoritettiin keihäsmiehen arvojärjestyskokeella.

tulokset

tulokset C. albicansin, C. glabratan ja C. dubliniensiksen alttiudesta erilaisille hunajille on esitetty taulukossa 1. Jarrah honey oli huomattavasti aktiivisempi kolmea Candida-lajia vastaan (P < 0, 00001). Kukkahunajien antifungaaliset vaikutukset olivat huomattavasti suuremmat kuin keinotekoisella hunajalla C. albicansia ja C. glabrataa vastaan (P < 0.002), mutta C. dubliniensiksellä vain Jarrah-hunaja oli huomattavasti aktiivisempaa (p < 0.00001). C. dubliniensis oli alttiimpi kaikkien hunajien osmoottiselle vaikutukselle ja Jarrah-hunajan antifungaalisille vaikutuksille, sillä sen Mikrofonit olivat huomattavasti muita lajeja alhaisemmat (p < 0, 00001). C. glabrata, joka on luonnostaan vähemmän herkkä monille tavanomaisille sienilääkkeille 19, oli vähiten herkkä tutkituista hunajista (p < 0, 00001).

Lääkeaineresistenssiprofiilit olivat saatavilla 20 isolaatista. Näistä kaksitoista oli joko resistenttejä tai herkkiä-annoksesta riippuvia itrakonatsolille ja / tai flukonatsolille. Hunaja esti kaikkia näitä isolaatteja, eikä sienilääkkeiden herkkyydellä ja herkkyydellä hunajalle ole tilastollista yhteyttä (p > 0, 05).

Keskustelu

rajallisissa havainnoissa hunajalla on todettu estävä vaikutus C. albicans–bakteeria vastaan vitro20-22: ssa, mutta yhdessäkään näistä tutkimuksista ei käytetty standardoituja hunajamenetelmiä tai määritysmenetelmiä. Vain yhdessä julkaistussa tutkimuksessa on käytetty hunajaa, jolla tiedetään olevan fenolia vastaava vaikutus, sienilääkkeiden aktiivisuuden tutkimiseen 23. Tässä tutkimuksessa laidunhunajan vaikutuksia verrattiin Leptospermum-hunajaan dermatofyyttisieniä vastaan. Nykyisen tutkimuksen tulosten mukaan vetyperoksidityyppisellä hunajalla havaittiin olevan suurempi sienilääke-vaikutus.

nykyisessä tutkimuksessa ei havaittu tilastollista yhteyttä sienilääkkeiden herkkyyden ja herkkyyden hunajalle välillä. Tämä on erityisen tärkeää, kun otetaan huomioon, että resistenssi atsolilääkkeille kasvaa Candida-isolaattien 8, 24 ja 25 keskuudessa, ja havainto siitä, että atsolipohjainen estohoito lisää ei-C-infektion riskiä. albicansCandida-lajit, jotka saattavat olla vähemmän reagoivia tavallisille lääkeannoksille 6, 24.

vaikka tämä tutkimus osoittaa hunajan antifungaalisen vaikutuksen in vitro, sen käytölle In vivo on joitakin käytännön näkökohtia. Ensinnäkin hunaja rajoittuu paikallisiin hoitoihin, eikä sitä voida käyttää kandidemian, kandidiaasin vakavimman muodon, hoitoon. Kuitenkin, koska johtava riskitekijä verenkiertoon infektio on kolonisaatio tai infektio ulkoisten sivustojen, kuten indwelling katetrit, tai suun tai emättimen mucosae 19, hunajaa voidaan käyttää ennaltaehkäisevästi estää vakavampia infektioita. Suoraan katetrien ympärille asetetun kokonaisen hunajan todettiin ehkäisevän ulostulokohdan infektiota vähintään yhtä tehokkaasti kuin povidonijodi 26 tai mupirosiini 27. Toiseksi, koska hunaja on vesiliukoista, sitä voidaan laimentaa tai poistaa kehon nesteiden, erityisesti syljen, avulla suuontelossa. Pilottitutkimus English et al. 28 todettiin plakin keskiarvojen ja vuotokohtien vähentyneen merkittävästi potilailla, joille annettiin pureskeltavaa hunajanahkaa; tätä samaa tekniikkaa voitaisiin käyttää suun kandidiaasin hoitoon. Muilla kehon alueilla säännöllinen 100-prosenttisen hunajan levittäminen säilyttäisi pitoisuuden reilusti yli halutun mikrofonin. Hunajaa voitaisiin myös sisällyttää pessaariin emättimen kandidiaasin hoitoon. Toinen käytännön kysymys on katalaasin esiintyminen kehon nesteissä, joilla on mahdollisuus vähentää vetyperoksidin aktiivisuutta. Tapausselostukset ja kliiniset tutkimukset viittaavat kuitenkin siihen, että hunajalla säilyy riittävä aktiivisuus, jotta se voi olla tehokas kliinisessä ympäristössä 29, 30. Tämän tutkimuksen tulokset puoltavat kontrolloituja kliinisiä tutkimuksia hunajan osoittamiseksi paikallisesti käytettäväksi sienilääkkeeksi.

tunnustukset

tätä työtä tuki maaseutuelinkeinojen tutkimus-ja kehittämisyhtiö Mehiläistoimikunnan apurahanumero US-128. Kliinisiä isolaatteja tarjosi ystävällisesti Westmead Hospital Institute of Clinical Pathology and Medical Research, Sydney, Australia; ja Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran. Hunajanäytteitä toimitti ystävällisesti Medihoney Pty. Ltd., Queensland, Australia; Comvita Medical Ltd., Te Puke, Uusi-Seelanti; ja Länsi-Australian mehiläishoitajien yhdistys.

,

.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

, et al.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

,

,

.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

, et al.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

,

div>

, et al.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

,

s ,

, et al.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

,

.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

,

, et al.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

,

.

,

,

, vol.

(pg.

–

)

.

,

,

, vol.

(pg.

–

)