La zona pellucida est une couche acellulaire qui entoure la membrane plasmique des ovocytes de mammifères adultes et qui remplit une variété de fonctions importantes au cours de l’ovogenèse, de la fécondation et du développement préimplantatoire. Dans cette étude, les protéines de la zona pellucida de l’ovocyte de souris ont été identifiées et caractérisées en utilisant des zonae pellucidae isolées individuellement à partir d’ovocytes adultes avec des micropipettes opérées par la bouche. Divers critères morphologiques et biochimiques ont été utilisés pour évaluer la pureté des zonae pellucidae isolées et, dans la plupart des cas, elles se sont révélées pratiquement exemptes de contamination par d’autres protéines ovocytaires. Il a été déterminé que chaque zone pellucida en contient 4.8 ng de protéines, ce qui représente 80% ou plus du poids sec de la zona pellucida et environ 17% de la protéine totale de l’ovocyte. Des analyses électrophorétiques d’aussi peu que cinq zonae pellucidae isolés traités avec de l’acide iodosulfanilique diazotisé ont révélé la présence de seulement trois protéines radiomarquées, désignées ZP1, ZP2 et ZP3. Les trois mêmes protéines ont été identifiées par coloration au bleu de Coomassie lorsque de grands nombres de zonae pellucidae isolés (environ 750) ont été soumis à une électrophorèse sur gel de polyacrylamide SDS. Ces trois protéines migrent sous forme de larges bandes sur des gels de polyacrylamide SDS, compatibles avec leurs glycoprotéines, avec des poids moléculaires apparents de 200 000 (ZP1), 120 000 (ZP2) et 83 000 (ZP3). Les mêmes protéines ont été radiomarquées lorsque des ovocytes intacts ont été traités avec de l’acide iodosulfanilique diazotisé, un réactif qui ne pénètre pas dans la membrane plasmique de l’ovocyte, ou lorsque des zonae pellucidae isolés ont été traités avec du chlorure de 1-diméthylaminonaphtalène-5-sulfonyle marqué au 3H. Les résultats de l’analyse des acides aminés et de l’électrophorèse bidimensionnelle à haute résolution des protéines individuelles suggèrent que chaque protéine représente une chaîne polypeptidique unique. Les protéines ZP1, ZP2 et ZP3 représentent respectivement environ 36, 47 et 17% de la protéine totale de la zona pellucida. En présence d’agents réducteurs qui provoquent la dissolution de la zona pellucida, ZP1 est converti en une espèce qui migre avec un poids moléculaire apparent de 130 000, ce qui suggère qu’elle existe sous forme d’oligomère, stabilisé par des liaisons disulfures, à l’état non réduit. Les résultats de ces expériences sont discutés en termes de propriétés de la zona pellucida avant et après la fécondation et sont comparés aux résultats obtenus en utilisant des enveloppes vitellines d’œufs d’espèces animales non mammaliennes.