az indukálható klindamicin rezisztencia a staphylococcusokban lehet a Clindamycin és Erythromycin lemezeket tartalmazó Lemezdiffúziós módszerrel detektálták. A D tesztet lemezdiffúzióval hajtják végre, egy 15-6G eritromicin lemezt helyezve egy 2-6G klindamicin lemez közelében egy agarlemezre, amelyet staphylococcus izolátummal oltottak be; a lemezt ezután egy éjszakán át inkubáljuk.
a gátlás zónájának ellaposodása a Clindamycin lemez körül, közel a klindamicin lemezhez az eritromicin lemez (amely a D betűhöz hasonló gátlási zónát eredményez) pozitív eredménynek tekinthető, és azt jelzi, hogy az eritromicin klindamicin rezisztenciát indukált (pozitív “d-zóna teszt”). Az eritromicin-rezisztens izolátumok esetében az indukciós tesztek segíthetnek a laboratóriumoknak meghatározni, hogy a klindamicin eredményeit érzékenynek (ha az indukciós teszt negatív) vagy rezisztensnek (ha az indukciós teszt pozitív) kell-e jelenteni.
Az eritromicin és a klindamicin hatásmechanizmusa és a rezisztencia kialakulása
Az eritromicin (makrolid) és a klindamicin (linkozamid) az antimikrobiális szerek két különböző osztályát képviselik, amelyek gátolják a fehérjeszintézist azáltal, hogy a baktériumsejtek 50S riboszomális alegységeihez kötődnek. Staphylococcusokban mindkét antimikrobiális szerrel szembeni rezisztencia riboszomális célhelyük metilezésével fordulhat elő. Az ilyen ellenállást általában az erm gének közvetítik.
az indukálható klindamicin-rezisztencia klinikai jelentősége:
a makrolid-linkozamid-sztreptogramin B (MLSB) rezisztencia, amelyet a céloldali módosítási mechanizmus közvetít, az eritromicinnel, a klindamicinnel és a streptogramin B-vel szembeni rezisztenciát eredményez. Ez a mechanizmus lehet
- konstitutív, ahol az rRNS-metiláz mindig termelődik,
Ha In vitro vizsgálatot végeznek a konstitutív rezisztenciával rendelkező Staphylococcus aureus izolátumok rezisztensek az eritromicinnel és a klindamicinnel szemben. - vagy indukálható, ahol a metiláz csak indukáló szer jelenlétében termelődik (Megjegyzés: Az eritromicin a makrolid-linkozamid-streptogramin B (MLSB) rezisztencia hatékony induktora). Az indukálható rezisztenciával rendelkező izolátumok rezisztensek az eritromicinnel szemben, de a rutin invitro tesztelés során fogékonynak tűnnek a klindamicinre.
az indukálható klindamicin rezisztencia teszt (D teszt) klinikai jelentősége
a klindamicin kiváló farmakokinetikai és farmakodinámiás tulajdonságai miatt vonzó szer a feltételezett S. aureus fertőzések empirikus terápiájában. Az MRSA-fertőzések kezelésére szolgáló klindamicin-terápia klinikai kudarcait klindamicin-érzékeny, de eritromicin-rezisztens törzsek esetében dokumentálták. A kudarcokat a klindamicinnel szembeni indukálható rezisztencia okozta.
ilyen esetekben In vivo a klindamicinnel végzett terápia kiválaszthatja a konstitutív erm mutánsokat, ami klinikai kudarchoz vezethet. A klindamicin-rezisztencia lehet konstitutív vagy indukálható. A rutin antibiotikum-érzékenységi vizsgálatok nem tudják azonosítani ezeket a törzseket. A D (indukálható klindamicin-rezisztencia) Tesztet alkalmazzák az indukálható klindamicin-rezisztencia kimutatására.
eljárás indukálható klindamicin rezisztencia (D) teszt:
- Készítsen 0-t.5 Az eritromicin-rezisztens Staphylococcus aureus izolátumok McFarland standard szuszpenziója
- baktériumtenyészetet hoz létre Muller Hinton Agar (MHA) lemezeken.
- a klindamicin (2-6G ) és az eritromicin (15-6G ) korongokat egymástól kb. 15 mm-re kell elhelyezni (széltől szélig mérve).
- inkubáljuk a lemezt 16-18 órán át 37oc-on
A D teszt eredményének értelmezése
a klindamicin lemez körüli tiszta, D alakú gátlási zónát jelöljük D fenotípusként, amelyet D vagy D+jelöléssel látunk el. Négy másik nem indukciós fenotípus (negatív , ködös D zóna , rezisztens és érzékeny) szintén megfigyelhető a lemezdiffúziós eredményekben