Le cellule staminali neurali (NSC) danno origine al sistema nervoso centrale (SNC) durante lo sviluppo e contribuiscono alla plasticità cellulare del cervello dei mammiferi adulti. L’isolamento e la coltura in vitro di NSCs offre l’opportunità unica di affrontare questioni fondamentali sulla proliferazione cellulare, la scelta del destino, la differenziazione e la maturazione sinaptica in condizioni definite sperimentalmente. Il fondamento teorico della biologia NSC si basa fondamentalmente sulle tre proprietà che definiscono che un singolo NSC deve soddisfare: auto-rinnovamento, multipotenza e clonalità. Uno strumento di coltura cellulare popolare, il test neurosphere, è stato utilizzato per studiare queste caratteristiche chiave di NSCs dal 1992. Saggi simili vengono ora utilizzati per altre cellule staminali somatiche, comprese le cellule staminali tumorali. Recenti progressi nel campo delle cellule staminali sono stati fatti rivisitando il concetto di neurosfera e dimostrando il suo reale potenziale e limiti. Questo articolo discute le conseguenze immediate di questi risultati e sottolinea la necessità di un protocollo migliorato e comunemente accettato per la caratterizzazione di NSC in vitro.