VII.B Veier Aktivert Av Her2/neu-Reseptoren
Reseptortyrosinkinasesignalering medieres av ET antall sh2-holdige substrater, inkludert fosfolipase C-γ (PLC-γ), PI-3-kinase, Gtpaseaktiverende protein (GAP), Shc, Grb2, src-familiekinaser og SH2-domene-inneholder fosfataser. Aktivering av kinasesubstrater ved reseptortyrosinkinase fører til frigjøring av andre budbringere, som inositolfosfat og diacylglycerol-mellomprodukter. I tillegg fører aktivering Av Ras-signalveien via reseptortyrosinkinaser til regulering av en serin / treonin-proteinkaskade, inkludert RAS-og MAP-kinase-signalveien. Til slutt påvirker signaltransduksjon nukleær transkripsjon av gener eller forårsaker proteinmodifikasjoner, som regulerer cellesyklusprogresjon og andre cellulære aktiviteter. Et sammendrag av flere viktige signaltransduksjonsveier involvert i transformasjon drevet Av Her2 / neu overuttrykk er presentert I Fig. 4.
Fig. 4. Signaltransduksjonsveier, assosiert Med her2 / neu onkogen. Flere signaltransduksjonsveier, som antas å bidra Til transformasjonspotensialet Til Her2 / neu, er illustrert.
Tyrosinkinasesignalering er kjent for å aktivere flere veier som styrer vekst, spredning og overlevelse. Det relative bidraget til hver vei er vanskelig å fastslå og kan være celletypespesifikk. Aktivering AV MAP kinase-banen synes imidlertid å være kritisk i mange situasjoner. Vi har vist i transfiserte celler av ulike typer at transformerende nivåer av erbB-reseptorkomplekser induserer vedvarende, uuttenuert aktivering AV KARTKINASEAKTIVITETER. Leder og kollegaer har undersøkt betydningen av forskjellige signaltransduksjonsveier ved å undersøke effekten av pathway-spesifikke farmakologiske hemmere på tumorlinjer etablert fra transgene musemodeller. Tumorer linjer avledet fra neu transgene mus viste forhøyet aktivitet I MAP kinase pathway; videre ble veksten av disse tumorlinjene hemmet av EN farmakologisk hemmer AV MAP-kinaseveien, mens brysttumorlinjer av forskjellig opprinnelse ikke ble påvirket av dette midlet. Disse dataene antyder At ras-aktivering AV MAP-kinaseveien er en kritisk komponent Av Her2 / neu-indusert vekst.Vi har vist at proteasomet kan spille en kritisk rolle i reguleringen av cellevekst og transformasjon I her2 / neu-uttrykkende svulster. NIH / 3T3-celler transformert ved overuttrykk av p185neu ble behandlet med et monoklonalt antistoff som er kjent for å føre til fenotypisk reversering. Disse behandlede cellene ble sammenlignet med ubehandlede celler ved hjelp av differensiell mRNA-skjerm, en screeningsteknikk som kan identifisere mRNA-arter som varierer i overflod mellom to prøver. TBP1, opprinnelig klonet som et protein med høy homologi TIL HIV-Tat – bindende protein-1, viste forhøyede mRNA-nivåer i antistoffbehandlede celler. FOR å teste betydningen av dette resultatet ble tbp1 cDNA brukt til å transfisere transformerte celler. TBP1-ekspresjon førte til reversering av den transformerte fenotypen målt ved redusert celleproliferasjon, redusert kolonidannelse i myk agar og sterkt hemmet tumordannelse i athymiske mus. Dette identifiserte en regulator av proteasomet som å ha en tumor suppressor – lignende aktivitet. Vi forventer at nedregulering av proteasomfunksjoner vil begrense nedbrytningen av cellesyklushemmere, og dermed begrense celleveksten.I Samsvar med ideen om at cellesyklusregulering er kritisk For Transformasjonsevnen Til Her2 / neu, har cyclin D1 blitt anerkjent for sin betydning i neu-transformasjon. Lee og kolleger bemerket at cyclin D1 proteinnivåer var forhøyet i både neu transgene musemodeller og neu-transformerte cellelinjer. Cyclin D1 induksjon kan oppheves ved mutasjon av kritiske rester innenfor Her2 / neu. Transformasjon ble vist å være hemmet in vivo av cyclin D1 antisense, en eksperimentell teknikk, som teoretisk forhindrer spesifikt syntesen av et målprotein. Ved bruk av dominant-negative og farmakologiske hemmere av cellesyklusveier ble det fastslått at induksjon av cyklin D1 ved p185neu var avhengig Av Ras / MAP-kinaseveien, men ikke AV PI-3-kinaseveien. Disse forsøkene forsterker betydningen AV MAP-kinaseveien og den kritiske reguleringen Av cellesykluskontroll Av Her2 / neu. SELV OM MAP kinase-banen har vist seg å være av stor betydning for erbb-signalering, kan betydningen av andre store signalveier, som PI-3-kinase-banen, på ingen måte diskonteres. En stor nedstrøms effektor AV PI-3-kinase-banen, hvis betydning har blitt avslørt, er akt survival kinase-banen. Som en nedstrøms effektor av mange vekstfaktorsignaler gir denne banen et antiapoptotisk signal. Mendelsohn og kolleger viste en beskyttende rolle FOR EGF fra Fas-indusert apoptose i både en brystkreftcellelinje og normale immortaliserte humane epitelceller. Beskyttelsen gitt AV EGF-stimulering ble vist å stole på Akt-signalering. Liu og kolleger viste at Heregulin, en erbb-familie ligand, fører til aktivering Av Akt, og videre at Akt-aktivering er blokkert av et hemmende antistoff Mot Her2, og avslører en rolle For Her2 i Akt-aktivering. Vi har vist at tumorsuppressoren BRCA1 fosforyleres som respons på erbb2-aktivering, og det er noen bevis for at denne modifikasjonen også påvirkes av akt-signalering.
at erbB-signalering fører til overlevelse er ikke overraskende gitt data om effekten Av Her2 / neu på kjemosensitivitet og radiosensitivitet. Det er nå tydelig at et viktig aspekt ved drap av både kjemoterapeutiske midler og strålebehandling skyldes induksjon av apoptose. Høygradige gliale maligniteter er spesielt motstandsdyktige mot standard behandlingsstrategier, og derfor vil enhver metode som kan forbedre disse behandlingsstrategiene være av stor klinisk nytte. Vi har vist at glial og andre celler transformert av p185neu overuttrykk kan fenotypisk reverseres ved innføring av en p185 mutant med en intracellulær avkorting like under membranen, p185T691Stop. I tillegg til å forårsake fenotypisk reversering, er p185T691Stop-mediert deaktivering av kinasesignaliserende sensibiliserte celler til apoptose indusert av γ-bestråling, EN mediator FOR DNA-skade. Videre ble denne apoptotiske responsen vist å være p53 uavhengig, noe som er oppmuntrende fra et klinisk synspunkt, gitt den høye andelen humane svulster som overlevelse antas å bli forbedret ved tap av p53-funksjon. Behandling med monoklonale antistoffer mot p185neu, som ekspresjon av en avkortet p185, kan føre til fenotypisk reversering og deaktivering av kinasereseptorer, og vil bli diskutert senere. Pietras og kolleger viste at behandling med et slikt antistoff fører til en reduksjon I DNA-reparasjon, muligens på grunn av svikt i induksjon av regulatoriske proteiner som p21cip. Mens flere grupper har vist at deaktivering av kinasereseptorer kan øke effektiviteten av antitumormidler, er Det fortsatt kontroversielt At Her2/neu overuttrykk gir en indre kjemoresistens. Pegram og medarbeidere undersøkte dette problemet både i cellekultur og i musemodeller og fant at Her2/neu overuttrykk alene ikke var tilstrekkelig til å gi stoffresistens og foreslo At Her2 / neu kan synes å gi stoffresistens på grunn av raskere gjenvekst av svulster. Samlet sett tyder imidlertid studier Av Rollen Som Her2/neu og apoptose på at overlevelsesveier er et kritisk aspekt ved reseptortyrosinkinasesignalering, og at denne komponenten av reseptortyrosinkinasesignalering er sentral for å forstå mekanismene for transformasjon og fenotypisk reversering.