Hyperchromicity

Varme denaturering AV DNA, også kalt smelting, forårsaker dobbel helix struktur for å slappe av for å danne enkelt strandet DNA. NÅR DNA i oppløsning varmes opp over smeltetemperaturen (vanligvis mer enn 80 °C), vikles det dobbeltstrengede DNA ut for å danne enkeltstrenget DNA. Basene blir unstacked og kan dermed absorbere mer lys. I sin opprinnelige tilstand absorberer basene AV DNA lys i 260 nm bølgelengdeområdet. Når basene blir unstacked, endres bølgelengden av maksimal absorbans ikke, men mengden absorbert øker med 37%. En dobbeltstrenget DNA-streng som dissosierer til to enkeltstrenger, gir en skarp kooperativ overgang.

Hyperchromicity kan brukes til å spore TILSTANDEN TIL DNA som temperaturendringer. Overgang/smeltetemperatur ™ er temperaturen DER absorbansen AV UV-lys er 50% mellom maksimum og minimum, dvs. hvor 50% AV DNA er denaturert. En ti ganger økning av monovalent kationkonsentrasjon øker temperaturen med 16,6 °C.

den hyperkromiske effekten er den slående økningen I absorbans AV DNA ved denaturering. DE TO trådene av DNA er bundet sammen hovedsakelig av stabling interaksjoner, hydrogenbindinger og hydrofobe effekt mellom komplementære baser. Hydrogenbindingen begrenser resonansen til den aromatiske ringen, slik at absorpsjonen av prøven også er begrenset. NÅR DNA-dobbeltspiralen behandles med denaturerte midler, forstyrres interaksjonskraften som holder den doble spiralformede strukturen. Den dobbelte helixen separerer deretter i to enkeltstrenger som er i den tilfeldige spolede konformasjonen. På dette tidspunktet vil base-base-interaksjonen bli redusert, noe som øker UV-absorbansen av DNA-løsningen fordi mange baser er i fri form og ikke danner hydrogenbindinger med komplementære baser. Som et resultat vil absorbansen for enkeltstrenget DNA være 37% høyere enn for dobbeltstrenget DNA i samme konsentrasjon.

Legg igjen en kommentar

Din e-postadresse vil ikke bli publisert.