Inducible clindamycin resistance i stafylokokker kan være oppdaget Ved Diskdiffusjonsmetode Ved Bruk Av Clindamycin Og Erytromycin disker. D-testen utføres ved diskdiffusjon, og plasserer en 15-µ Erytromycin-disk i nærheten av en 2-µ Clindamycin-disk på en agarplate som har blitt inokulert med et stafylokokkisolat; platen inkuberes deretter over natten.
en utflating av sonen av hemming rundt Clindamycin disk proksimal til Klindamycin disk.erytromycinskive (som produserer en inhiberingssone formet som bokstaven d) regnes som et positivt resultat og indikerer at erytromycin har indusert klindamycinresistens (en positiv «d-sonetest»). For erytromycinresistente isolater kan induksjonstester hjelpe laboratorier med å avgjøre om resultatene For Clindamycin skal rapporteres som følsomme (når induksjonstesten er negativ) eller som resistente (når induksjonstesten er positiv).
Virkningsmekanisme For Erytromycin og Klindamycin og Utvikling av Resistens
Erytromycin (et makrolid) og klindamycin (et linkosamid) representerer to forskjellige klasser av antimikrobielle midler som hemmer proteinsyntese ved binding TIL 50s ribosomale underenheter av bakterieceller. I stafylokokker kan resistens mot begge disse antimikrobielle midlene oppstå gjennom metylering av deres ribosomale målsted. Slike resistens er vanligvis mediert av erm-gener.
Klinisk signifikans Av Induserbar Klindamycinresistens:
resistens Mot Makrolid-linkosamid-streptogramin B (MLSB), som medieres av modifikasjonsmekanismen til målsiden, resulterer i resistens Mot Erytromycin, Klindamycin Og streptogramin B. Denne mekanismen kan være
- Konstitutiv, hvor rRNA-metylasen alltid produseres,
hvis In vitro-testing utføres, Er staphylococcus aureus-isolater med konstitutiv resistens resistente mot Erytromycin og Clindamycin. - Eller kan induseres, hvor metylase bare produseres i nærvær av et induserende middel (Merk: Erytromycin er en effektiv induktor Av Makrolid-linkosamid-streptogramin B (MLSB) resistens). Isolater med induserbar resistens er resistente Mot Erytromycin, men synes følsomme For Klindamycin i rutinemessig invitro-testing.
Klinisk signifikans Av Inducible Clindamycin resistens testing (D Test)
Clindamycin er et attraktivt middel for empirisk terapi for mistenkte s. aureus infeksjoner på grunn av sine gode farmakokinetiske og farmakodynamiske egenskaper. Klinisk svikt ved behandling med klindamycin ved BEHANDLING AV MRSA-infeksjoner er dokumentert for stammer som var klindamycinsensitive, men resistente mot erytromycin. Feilene skyldtes induserbar resistens mot clindamycin.
I Slike tilfeller Kan Behandling Med Clindamycin in vivo velges for konstitutive erm-mutanter, noe som kan føre til klinisk svikt. Klindamycinresistens kan være konstitutiv eller induserbar. Rutinemessige antibiotiske følsomhetstester kan ikke identifisere disse stammene. D-testen (inducible clindamycin resistance) brukes til å oppdage inducible clindamycin resistance.
Fremgangsmåte For Induktiv Klindamycinresistens (D) Test:
- Forbered 0.5 McFarland standard suspensjon Av Erytromycinresistente staphylococcus aureus isolater
- Lag en plenkultur av bakterier i Muller Hinton Agar (MHA) plater.
- sett clindamycin (2-µ ) og Erytromycin (15-µ ) disker omtrent 15 mm fra hverandre(målt kant til kant).
- Inkuber platen i 16 til 18 timer ved 37oC
Tolkning av resultat Av D Test
en klar, d-formet sone av hemming rundt Clindamycin disken er betegnet Som d fenotype som er merket Som D eller D+. Fire andre ikke-induksjonsfenotyper (betegnet som negativ , uklar d-sone , resistent og mottakelig ) observeres også i diskdiffusjonsresultater