Hva Er Verhoeff-van Gieson flekk?
Ira Van Gieson beskrev Først verhoeff-van Gieson (VVG) fargeprotokoll i 1889 som en metode for å evaluere kollagenfibre i nevralvev. Frederick Herman Verhoeff, En Amerikansk kirurg og patolog, endret deretter flekken i 1908, som en metode for å skille kollagen og annet bindevev, og markere elastiske fibre spesielt.
Hva flekker det?
Elastiske fibre Er bindevevsfibre som tillater vev å strekke seg, og er rikelig i aorta, for eksempel hvor de gir fleksibilitet til dette store blodkaret. De er også til stede i andre vev som trenger fleksibilitet, for eksempel hud og lunge.
disse fine elastiske fibrene kan typisk ikke ses på rutinemessige hematoksylin-og eosin-flekkete vevsseksjoner (H&E), derfor er det nødvendig med spesielle flekker for å fremheve dem. Du kan lese mer om H& E i disse artiklene Fra Mikroskopi – Og Bildekanalen-Del 1:Metode Og Tips, Del 2: Oppskrifter og Materialer.
Selv om DET er mange spesielle flekker for identifisering av elastiske fibre, ER VVG mest brukt fordi DET er raskt, og produserer intens farging av elastiske fibre.
generelle prinsipper for flekken
VVG ER en todelt kombinasjonsflekk som muliggjør differensiering av enkelte bindevevskomponenter i et vev som ikke lett kan skilles ved H&e-farging:
Verhoeff flekkkomponent: en jern-haematoksylin flekk som er spesifikk for elastiske fibre. Det danner sterke bindinger med elastin, hovedkomponenten i elastisk bindevev.
van Gieson flekk komponent: en counterstain som er spesifikk for kollagen. Den ble oppkalt Etter Den amerikanske bakteriologen Ira van Gieson, og består av to syrefarger-pikrinsyre og syrefuksin.
teknikken innebærer farging av vevsprøven med en hematoksylinflekk bestående av jernklorid og jod, og består av to hovedtrinn:
(1) Overfarging: dette trinnet innebærer et kompleks av hematoksylin–jernklorid–jod. De to sistnevnte komponentene fungerer som mordanter for å feste hematoksylinflekken til vevet, og fungerer også som oksidasjonsmidler for å bidra til å omdanne hematoksylin til hematein. Fargemekanismen innebærer sannsynligvis dannelse av hydrogenbinding mellom hematoksylin og vev, selv om spesifikkene til denne reaksjonen ikke er velkjente. Siden elastin har en sterk affinitet for jern-haematoksylin-komplekset i flekken, holder det fargestoffet lenger enn andre vevskomponenter. Elastin forblir derfor farget selv etter at andre vevselementer er avfarget.
(2) Differensiering: dette trinnet bruker overflødig jernklorid mordant for å bryte ned vev-mordant-fargestoffkomplekset. Natriumtiosulfat brukes til å fjerne overflødig jod, og van Gieson-motstoffet brukes til å produsere kontrast med hematoksylin-flekken. Fargestoffet tiltrekkes av det store volumet av mordant i differensieringsløsningen og fjernes fra vevet. Det elastiske vevet har derimot den sterkeste affiniteten for jernkomponenten i flekken.
følgelig er sluttproduktet av reaksjonen slik at elastiske fibre og cellekjerner er farget svart Av Verhoeff-komponenten. Kollagen og muskel er farget rødt av van Gieson counterstain, noe som også resulterer i gul farging av cellecytoplasma og andre vevskomponenter.
hvem bruker Van Gieson flekk?
denne flekken brukes mye for både diagnostiske og forskningsformål.
i diagnostiske laboratorier brukes VVG til å identifisere tilstedeværelse eller fravær av elastiske fibre i vev. For eksempel kan patologer bruke den til å demonstrere tap av elastisk vev i lungen hos pasienter med emfysem, og tynning og tap av elastiske fibre i blodkar hos pasienter med arteriosklerose.På Samme måte kan forskere som undersøker noen av disse typer sykdommer også rutinemessig undersøke vvg-farget vevsseksjoner for å oppdage tilstedeværelse eller fravær av elastiske fibre i vev av interesse. Andre forskere kan ganske enkelt bruke flekken bare for å skille bindevevsfibre i vev av interesse.
Hvordan bruker Du Verhoeff-van Gieson stain i laboratoriet ditt?
har dette hjulpet deg? Vennligst del med nettverket ditt.