Neural stem cells (NSCs) dają początek ośrodkowemu układowi nerwowemu (CNS) podczas rozwoju i przyczyniają się do plastyczności komórkowej dorosłego mózgu ssaków. Izolacja i kultura in vitro NSCs zapewnia wyjątkową okazję do rozwiązania podstawowych pytań dotyczących proliferacji komórek, wyboru losu, różnicowania i dojrzewania synaptycznego w eksperymentalnie zdefiniowanych warunkach. Teoretyczna podstawa biologii NSC opiera się zasadniczo na trzech definiujących właściwościach, które pojedynczy NSC musi spełniać: samoodnawianiu, multipotencji i klonalności. Popularny cell culture narzędzie, neurosphere assay, używał studiować te kluczowi cechy NSCs od 1992. Podobne testy są obecnie używane dla innych somatycznych komórek macierzystych, w tym komórek macierzystych raka. Niedawny postęp w dziedzinie komórek macierzystych został dokonany przez ponowne rozważenie koncepcji neurosfery i wykazanie jej rzeczywistego potencjału i ograniczeń. W tym artykule omówiono bezpośrednie konsekwencje tych ustaleń i podkreślono potrzebę ulepszonego i powszechnie akceptowanego protokołu do charakterystyki NSCs in vitro.