A zona pelúcida é um acelular revestimento que envolve a membrana plasmática do adulto oócitos de mamíferos e que executa uma variedade de funções importantes durante oogenesis, a fertilização, a e preimplantation desenvolvimento. No presente inquérito, as proteínas da zona pelúcida do mouse foram identificadas e caracterizadas pela utilização de zonae pellucidae isolados individualmente de oócitos totalmente crescidos com micropipetes operados pela boca. Vários critérios morfológicos e bioquímicos foram empregados para avaliar a pureza dos zonae pellucidae isolados e, na maioria dos casos, foram encontrados virtualmente livres de contaminação por outras proteínas oócitas. Foi determinado que cada zona pelúcida contém 4.8 ng de proteína, que representa 80% ou mais do peso seco da zona pelúcida e cerca de 17% da proteína total do oócito. Análises electroforéticas de apenas cinco zonae pellucidae isolados tratados com ácido iodossulfanílico diazotizado revelaram a presença de apenas três proteínas radiolabeladas, designadas ZP1, ZP2 e ZP3. As mesmas três proteínas foram identificadas pela coloração azul de Coomassie quando um grande número de zonae pellucidae isolados (aproximadamente 750) foram submetidos a electroforese em gel SDS-poliacrilamida. Estas três proteínas migram como grandes faixas em géis SDS-poliacrilamida, consistentes com suas glicoproteínas, com pesos moleculares aparentes de 200.000 (ZP1), 120.000 (ZP2) e 83.000 (ZP3). As mesmas proteínas foram radiolabeladas quando os oócitos intactos foram tratados com ácido iodossulfanílico diazotizado, um reagente que não penetra na membrana plasmática do oócito, ou quando zonae pellucidae isolados foram tratados com cloreto de 1-dimetilaminonaftaleno-5-sulfonilo marcado com 3H. Os resultados da análise dos aminoácidos e da electroforese bidimensional de alta resolução das proteínas individuais sugerem que cada proteína representa uma cadeia polipeptídica única. As proteínas ZP1, ZP2 e ZP3 representam cerca de 36, 47 e 17%, respectivamente, da proteína total da zona pelúcida. Na presença de agentes redutores que causa a dissolução da zona pelúcida, ZP1 é convertido em uma espécie que migra com um peso molecular aparente de 130.000, sugerindo que ele existe como um oligómero, estabilizada por ligações dissulfeto, mas não reduzido no estado. Os resultados destas experiências são discutidos em termos das propriedades da zona pelúcida antes e depois da fertilização e são comparados com os resultados obtidos utilizando envelopes vitelinos de ovos de espécies animais não-mamíferos.