de inflamação induzida por clindamicina resistência em estafilococos podem ser detectados pelo método de difusão em disco usando a Clindamicina e a Eritromicina discos. D o teste é realizado por difusão de disco, colocando um disco de eritromicina de 15 µg na proximidade de um disco de clindamicina de 2 µg numa placa de ágar que foi inoculada com um isolado estafilocócico.; a placa é então incubada durante a noite.
Um achatamento da zona de inibição ao redor do disco de Clindamicina proximal para o disco de Eritromicina (produção de uma zona de inibição em forma de letra “D”) é considerado um resultado positivo e indica que a Eritromicina tem induzido a Clindamicina resistência (positivo “D-teste de zona”). No caso dos isolados resistentes à eritromicina, os testes de indução podem ajudar os laboratórios a determinar se os resultados da clindamicina devem ser comunicados como sensíveis (quando o teste de indução é negativo) ou como resistentes (quando o teste de indução é positivo).mecanismo de Acção da eritromicina e clindamicina e desenvolvimento de Resistência eritromicina (um macrólido) e clindamicina (uma lincosamida) representam duas classes distintas de agentes antimicrobianos que inibem a síntese proteica ligando-se às subunidades ribossomais 50S das células bacterianas. Em staphylococci, a resistência a ambos estes agentes antimicrobianos pode ocorrer através da metilação do seu local alvo ribossómico. Tal resistência é normalmente mediada por genes erm.significado clínico da resistência indutível à clindamicina: resistência à Macrólida-lincosamida-estreptogramina B (MLSB), que é mediada pelo mecanismo de modificação lateral alvo, resulta em resistência à eritromicina, clindamicina e estreptogramina B. Este mecanismo pode ser
- constitutivo, em que a metilase rRNA é sempre produzida,
se forem efectuados testes in vitro, os isolados de Staphylococcus aureus com resistência constitutiva são resistentes à eritromicina e à clindamicina.a eritromicina é um indutor eficaz da resistência à Macrólida-lincosamida-streptogramina B (MLSB). Os isolados com resistência indutível são resistentes à eritromicina, mas parecem susceptíveis à clindamicina nos testes de rotina do invitro.a clindamicina é um agente atractivo para a terapêutica empírica de suspeitas de infecções por S. aureus devido às suas excelentes propriedades farmacocinéticas e farmacodinâmicas. Foram documentadas falhas clínicas da terapêutica com clindamicina para o tratamento de infecções por MRSA em estirpes sensíveis à clindamicina mas resistentes à eritromicina. As falhas foram devidas à resistência indutível à clindamicina.nestes casos, In vivo, a terapêutica com clindamicina pode seleccionar mutantes constitutivos da erm, o que pode conduzir a falência clínica. A resistência à clindamicina pode ser constitutiva ou indutível. Os testes de sensibilidade aos antibióticos de rotina não conseguem identificar estas estirpes. O teste D (resistência à clindamicina indutível) é utilizado para detectar resistência à clindamicina indutível.procedimento para ensaio de resistência à clindamicina indutível (D):- preparar 0.Suspensão padrão de McFarland de isolados resistentes à eritromicina Staphylococcus aureus
- fazem uma cultura de relva de bactérias em placas de ágar de Hinton (MHA) Muller.colocar a clindamicina (2-µg ) e a eritromicina (15-µg ) disque aproximadamente 15 mm de distância (extremo a extremo medido).
- incubar a placa durante 16 a 18 horas a 37oC
interpretação do resultado do teste D
uma zona de inibição clara em forma de D em torno do disco de clindamicina é designada como o fenótipo D que está rotulado como D ou D+. Também se observam quatro outros fenótipos não de indução (designados como zona negativa , nebulosa D , resistentes e susceptíveis ) em resultados de difusão em disco