InoculationEdit
técnicos de Laboratório inocular a amostra em certos sólidos placas de agar com o streak método da placa ou em meio de cultura líquido, dependendo de qual o objetivo do isolamento é:
- quando Se quer isolar apenas um determinado grupo de bactérias como Streptococcus do Grupo A partir de um esfregaço da garganta, pode-se usar um meio selectivo que irá suprimir o crescimento concomitante de bactérias esperado na mistura (por antibióticos presentes no agar), de modo que somente os Estreptococos são “selecionados”, i.e. visivelmente se destacam. Para isolar fungos, pode utilizar-se agar Sabouraud. Alternativamente, letal condições para os estreptococos e bactérias gram-negativas, como a elevada concentração de sais no Mannitol salt agar favorecem a sobrevivência de qualquer estafilococos presentes em uma amostra de bactérias intestinais, e o vermelho de fenol no agar funciona como um indicador de ph, mostrando se as bactérias são capazes de fermentar o manitol pelo excretor de ácido no meio. In other agar substances are added to exploit an organism’s ability to produce a visible pigment (e.g. granada de média para o Grupo B Streptococcus), que altera a bacteriana de cor, ou para dissolver o agar de sangue por hemólise, de modo que eles podem ser mais facilmente visualizados. Algumas bactérias, como as espécies de Legionella, necessitam de nutrientes específicos ou ligação às toxinas como no carvão vegetal para crescer e, portanto, devem ser utilizados meios como o ágar de extrato de carvão vegetal tamponado.se se quiser isolar o maior número possível de estirpes ou todas as estirpes possíveis, devem inocular-se diferentes meios nutritivos, bem como meios enriquecidos, tais como ágar de sangue e ágar de chocolate e meios de cultura anaeróbicos, tais como caldo de tioglicolato. Para enumerar o crescimento, as bactérias podem ser suspensos em ágar fundido antes de tornar-se sólida e, em seguida, vertido em placas de petri, o chamado “pour plate method”, que é utilizado em microbiologia ambiental e microbiologia alimentar (e.g. lácteos teste) para estabelecer o denominado “aeróbico contagem de placa’.
IncubationEdit
Após a amostra é inoculado dentro ou sobre a escolha da mídia, eles são incubados sob o apropriado atmosférica definições, tais como aeróbio, anaeróbio ou microaerophilic condições ou com adição de dióxido de carbono (5%), em diferentes definições de temperatura, por exemplo 37 °C em incubadora ou no frigorífico para o frio de enriquecimento, sob luz adequada, por exemplo, estritamente, sem luz, envolto em papel ou em uma garrafa escura para scotochromogen micobactérias, e para diferentes períodos de tempo, porque as diferentes bactérias crescem em uma velocidade diferente, variando de horas (Escherichia coli) a semanas (p.ex. mycobacteria).em intervalos regulares, técnicos de laboratório e microbiólogos inspeccionam os meios à procura de sinais de crescimento visível e registam-nos. A inspecção tem de ocorrer novamente em condições favoráveis à sobrevivência do isolado, ou seja, numa “câmara anaeróbica” para bactérias anaeróbias, por exemplo, e em condições que não ameacem a pessoa que olha para as placas de ser infectada por um micróbio particularmente infeccioso, ou seja, sob um gabinete de segurança biológica para a Yersinia pestis (peste) ou Bacillus anthracis (antraz), por exemplo.
Identifiedationedit
quando as bactérias têm visivelmente crescido, muitas vezes ainda estão misturadas. A identificação de um micróbio depende do isolamento de um indivíduo colônia, como análise bioquímica de um micróbio para determinar suas diferentes características fisiológicas depende de uma cultura pura.Para fazer uma subcultura, uma vez obras em técnica asséptica em microbiologia, o levantamento de uma única colônia fora da superfície do ágar com um loop e riscos o material em cada um dos 4 quadrantes de uma placa de agar ou todo, se a colônia era singular e não olhar misto.
Gram coloração da amostra crua antes da incubação ou coloração de material de colônia recém-cultivado ajuda a determinar se uma colônia consiste em bactérias uniformemente aparentes ou é misturada, e a cor, e a forma das bactérias permitem uma primeira classificação baseada na morfologia. Em Microbiologia Clínica são utilizadas numerosas outras técnicas de coloração para organismos específicos (coloração bacteriana rápida ácida para micobactérias). Técnicas de coloração imunológica, como a imunofluorescência direta, foram desenvolvidas para patógenos medicamente importantes que estão em crescimento lento (coloração Auramina-rodamina para micobactérias) ou difícil de crescer (como a espécie Legionella pneumophila) e onde o resultado do teste alteraria a gestão padrão e a terapia empírica.teste bioquímico de bactérias envolve um conjunto de ágar em frascos para separar a mobilidade da Não-móvel. bacteria.In 1970 uma versão miniaturizada foi desenvolvida, chamada de analytical profile index.
identificação bem sucedida via e.g. a sequenciação do genoma e a genómica dependem de culturas puras.