enquanto a inflamação que conduz à fibrose hepática foi estudada em pormenor, outros processos que não as vias inflamatórias canónicas conhecidas podem contribuir para a fibrogénese hepática, tais como trombose intrasinusoidal na patogénese da hepatopatia congestiva. Além disso, estudos recentes revelaram novas vias de comunicação intercelular para além do conceito de quimioquinas e factores de crescimento, tais como as vesículas extracelulares derivadas das células, que podem adicionalmente ligar lesões à inflamação na hepatite alcoólica.
papel dos sinusóides hepáticos na patogénese da hepatopatia congestiva
congestão hepática crónica conhecida como hepatopatia congestiva conduz a fibrose hepática e ocorre principalmente no contexto da insuficiência cardíaca do lado direito . Outras causas possíveis para a insuficiência do fluxo venoso hepático são a síndrome de Budd–Chiari ou a sobrevivência a longo prazo após uma cirurgia bem sucedida de Fontan . Neste último caso, a diminuição do índice cardíaco juntamente com o aumento da pressão Auricular direita (denominada hipertensão venosa central), que resulta da ligação directa do átrio direito à artéria pulmonar, Provoca lesões hepáticas e fibrose . Note-se que um terço destes doentes apresenta hepatomegalia e alterações nos testes da função hepática . Após 11,5 anos, mais de um quarto apresenta cirrose hepática . No entanto, a maioria dos doentes com congestão hepática crónica permanecem assintomáticos e desenvolvem compromisso da função hepática no final do curso da doença . Os resultados laboratoriais são principalmente parâmetros elevados de colestase . Embora a hepatopatia congestiva tenha sido reconhecida há anos e tenha aumentado constantemente devido à alta prevalência de insuficiência cardíaca crônica e melhoria da sobrevivência de pacientes com defeitos cardíacos congênitos complexos após a cirurgia, pouco se sabe sobre sua patogênese. Foram geradas hipóteses a partir de amostras ex-vivo retrospectivas de fígado humano, que mostraram distribuição variável de fibrose parênquima correlacionada com obliteração fibrosa de veias hepáticas e portal . O conceito geralmente aceito de extinção parênquima considerou a fibrose congestiva como uma resposta à hipoxia, pressão e necrose hepatocelular . Este conceito foi alargado por trombose venosa intra-hepática nos últimos anos. Pensa-se que o grau de trombose desencadeia o grau de necrose e fibrogénese consecutivas . De particular interesse, a fibrose na hepatopatia congestiva não parece resultar de inflamação, uma vez que não foram encontrados infiltrados inflamatórios em amostras de fígado de pacientes que foram submetidos ao procedimento Fontan . Até agora, estes conceitos não foram testados experimentalmente devido à não existência de um modelo animal adequado. No entanto, a evidência do papel da trombose na fibrogênese hepática tem aumentado nos últimos anos. Embora a posse de mutações de Factor V de Leiden tenha demonstrado ser um factor de risco na rápida progressão da fibrose do VHC , a heparina de baixo peso molecular e a varfarina impediram a fibrogénese hepática causada pelo tetracloreto de carbono no rato . Além disso, a influência do polimorfismo do Factor V de Leiden na progressão da fibrose foi confirmada experimentalmente .
Simonetto et al. agora desenvolveram um modelo murino onde geraram cirurgicamente obstrução do fluxo venoso hepático ligando parcialmente a veia cava inferior abdominal suprahepática (pIVCL), a fim de reduzir o seu diâmetro em 70 % . As alterações histológicas com necrose centrilobular, extravasamento vascular e dilatação sinusoidal bem como immunostaining para α-SMA e colágeno (com um centrilobular e perisinusoidal de distribuição) foram consistentes com os humanos congestão hepática. Além disso, não houve sinais de inflamação envolvidos na fibrogenese congestiva, enquanto foi observada inflamação significativa no que diz respeito à histologia e expressão das citoquinas pró-inflamatórias em modelos cirróticos murinos com ligação do ducto biliar. Com este modelo, Simonetto et al. pode mostrar que tanto a fibrina como a estirpe vascular mecânica estimularam o conjunto fibril de fibronectina pela HSC e confirmaram o papel da trombina na activação da HSC. De notar que um ciclo de 6 semanas de varfarina oral não só reduziu a massa do baço e do fígado, como também reduziu a fibrina intra-hepática, a α-SMA (como marcador da activação da HSC) e, finalmente, a fibrose, apoiando ainda mais o papel da trombose intra-hepática na fibrogénese . Estes resultados alargam o conceito de sinusóides hepáticos em estadios iniciais de fibrose hepática. Além disso, o desenvolvimento deste modelo murino para hepatopatia congestiva permite investigações experimentais principalmente com foco no papel de trombose e dilatação intrasinusoidal, bem como anticoagulantes orais tradicionais e mais recentes como uma opção terapêutica potencial na fibrogênese hepática.os exossomas e o seu papel na secreção fisiológica de proteínas, tais como a eliminação dos receptores de transferrina pelos reticulócitos, foram identificados há mais de duas décadas . No entanto, nos últimos anos, os exossomas têm sido cada vez mais reconhecidos como uma nova forma de comunicação intercelular, promovendo a troca de proteínas e lípidos entre as células produtoras de exossomas e as células alvo . Exossomas são vesículas extracelulares fechadas por membrana, produzidas em corpos multivesiculares (MVB) e liberadas no espaço extracelular ou em fluidos biológicos por fusão de MVB com a membrana plasmática . Eles são caracterizados pelos seguintes critérios: diâmetro de 40-100 nm, densidade de 1,13–1,19 g/mL, morfologia em forma de copa ou deflacionada em forma de futebol, e um sedimento a 100,000 ×G. Eles contêm proteínas marcadoras comuns, tais como tetraspaninas (por exemplo, CD 9, CD 10, ou CD 26), proteínas associadas ao endossoma (Alix, TSG101), proteínas de choque térmico citoplásmico, e-mais importante para a interação celular—proteínas específicas do tipo celular e ácidos nucleicos . Mais de 40.000 proteínas, 7500 RNA e 1100 moléculas lipídicas foram identificadas a partir de mais de 286 estudos exosómicos . A sinalização exossómica parece ser promovida pela interacção através de receptores desconhecidos nas células-alvo que induzem a sinalização a jusante ou através da fusão directa da membrana exosómica com a membrana da célula-alvo que liberta o seu conteúdo para a célula . Diferentes células em diferentes órgãos e tecidos foram identificados como células produtoras de exossomas ou células-alvo . No fígado, estes são epitélios hepáticos (hepatócitos, colangiócitos), células T matadoras naturais, HSC, e SEC . De interesse, As células hepáticas têm sido mostradas como alvos mesmo para exossomas provenientes de outros órgãos, como o intestino . O conhecimento atual sobre o papel dos exossomas em doenças hepáticas foi discutido anteriormente por Masyuk et al. , a OMS analisou o envolvimento dos exossomas na HCC, VHC e inflamação hepática, e seu potencial papel como marcadores de diagnóstico precoce e prognóstico a partir da urina ou sangue. Aqui, destacamos o papel da sinalização exossome no HSC-SEC crosstalk. Ligantes de ouriços são conhecidos por ativar vias a jusante nas células endoteliais através de exossomas durante a embriogénese . In a recent study, Witek et al. mostrou que esses ligandos hedgehog desempenham um papel importante na HSC-SEC crosstalk e angiogênese através de micropartículas enriquecidas com exossomas. Os HSC tratados com PDGF e os colangiócitos libertam exossomas com ligantes de ouriço, que induzem alterações dependentes de ouriço na SEC com a regulação de vários genes que conduzem a um fenótipo angiogénico. De notar, a ligação do ducto biliar em ratinhos aumentou a libertação desses exossomas, também, apoiando evidências adicionais para um papel chave das vesículas extracelulares na fibrogenese hepática . Enquanto HSC se comunica com SEC via exossomas, o mesmo parece ser verdade vice-versa. Wang et al. publicou um estudo que mostra que os exossomas derivados de SEC contendo SK1 regulam a sinalização e migração de HSC através da adesão exossómica dependente da fibronectina-integrina e da internalização exosómica dependente da dynamin-2. Em mais detalhes, O SK1 mostrou ser uma proteína exossoma derivada de SEC ativada pelo FGF-2, que tem sido conhecida por ser importante na libertação de exossomas na fibrose hepática. Exossomas sobreexpressing SK1 contained more S1P, an HSC chemotactic factor, and led to HSC migration via AKT activation in the target cell. Demonstrou –se que a adesão e a endocitose são mediadas através da interacção fibronectina (em exossomas)-integrina (em HSC) e dynamin-2, respectivamente . Assim, Wang et al. não só destacou o potencial papel dos exossomas no crosstalk HSC-SEC e fibrogenese hepática, como também adicionou conhecimentos importantes sobre como estas vesículas podem interagir com as suas células alvo. Em conclusão, os exossomas, que têm sido estudados há anos, são considerados um novo meio de SEC-HSC crosstalk na fisiopatologia da fibrose hepática e, portanto, apresentam potenciais alvos para futuras terapias(Fig. 2).
Extracellular vesicle signaling. Different ways of EV signaling have been identified. Exosomes originate from multivesicular bodies and are released at the plasma membrane. Microvesicles são maiores e derramou directamente a partir da membrana plasmática
De uma lesão e inflamação na hepatite alcoólica
hepatite Alcoólica (AH) como uma forma grave da doença hepática alcoólica (ALD), com alta mortalidade devido ao fígado ou insuficiência renal, infecção bacteriana, ou hipertensão portal pode ocorrer em qualquer fase da ALD . Embora ALD e AH contribuam significativamente para morbilidade e mortalidade relacionadas com o fígado, os mecanismos patomecânicos ainda permanecem evasivos . No entanto, existem vários conceitos para danos hepáticos induzidos pelo etanol: embora o etanol tenha um efeito direto nos hepatócitos, resultando em apoptose através da geração de acetaldeído (via ADH) e acumulação de ROS (através do aumento do metabolismo pelo CYP2E1), ele também pode atuar através de mecanismos indiretos. O consumo excessivo de álcool perturba a barreira epitelial intestinal e provoca uma alteração da flora intestinal. O aumento da permeabilidade intestinal e da disbiose resulta em níveis mais elevados de LPS ligando-se aos receptores TLR-4 das células hepáticas (tais como HSC, SEC e hepatócitos), o que induz lesões hepáticas e inflamação, como descrito acima . Embora a infiltração de neutrófilos seja a característica histológica predominante na AH e os resultados da degeneração de hepatócitos, há evidência crescente para o papel dos macrófagos residentes no fígado chamados células Kupffer, que são activados na AH tanto por lesão hepatocitária quanto pela via de sinalização LPS . De notar, a resposta à inflamação celular de Kupffer é paralela à Extensão da lesão e fibrose . Aqui, nós revisamos dois novos mecanismos patológicos envolvidos na comunicação intercelular levando a AH: microvesicles e grupo de alta mortalidade caixa 1 (HMGB1). Enquanto os exossomas são originados de MVB e são liberados na membrana plasmática por fusão das membranas EXOSSOMA e MVB, microvesicles (MV) é liberado diretamente da membrana plasmática . Eles têm um tamanho de 0,1–1 µm, contêm compostos celulares como lípidos, proteínas, RNA e microRNA, e atuam como um vetor entre as células produtoras de MV e suas células alvo . MV são cada vez mais reconhecidos como um meio de comunicação intercelular. Além disso, numerosos estudos revelaram o seu papel em doenças hepáticas com níveis de MV aumentados, formação de MV e diminuição da depuração de MV . Enquanto o MV parece contribuir para a comunicação entre as células tumorais e entre as células tumorais e seu ambiente, eles parecem ter uma função dupla na fibrose: de um lado eles promovem fibrinólise através do aumento da expressão de MMP, do outro lado eles promovem a fibrose pelo aumento da angiogênese . Num estudo muito recente, O VMM foi agora identificado como um importante patomecanismo no início dos danos induzidos pelo etanol e como uma nova forma de crosstalk entre hepatócitos e macrófagos residentes no fígado. Verma et al. pode mostrar que o etanol resulta na libertação de MV de hepatócitos através da activação da proteína pro-apoptótica caspase 3. Estes VMM demonstraram ainda estimular a activação dos macrófagos pelo ligando CD40-um membro da família TNF—e induzir citoquinas inflamatórias conduzindo a inflamação hepática .
A activação do sinalizador a jusante TLR-4 levando a inflamação estéril é promovida por produtos celulares endógenos tais como os chamados padrões moleculares associados ao perigo (Humidade) . HGMB1 é uma proteína liberada do núcleo de células feridas , atuando como um ativador do TLR-4 (como LPS ou úmidas) com um papel na lesão hepática isquêmica e hepatite viral . Num estudo recente, Seo et al. foi capaz de mostrar que hmgb1 translocata do núcleo de hepatócitos feridos com etanol, resultando em níveis intracelulares mais elevados e, em última análise, levando ao aumento da migração de HSC e SEC . Assim, eles ligam diretamente o primeiro hit de lesão hepática induzida por etanol para os dois principais jogadores nos primeiros passos de fibrogênese hepática. Note-se que o recrutamento de ambos HSC e SEC pode ser bloqueado pelos anticorpos hmgb1 e siRNA, respectivamente, promovendo novas ideias para futuras terapias.