Qual é a mancha de Verhoeff-van Gieson?Ira Van Gieson descreveu pela primeira vez o protocolo de coloração Verhoeff-van Gieson (VVG) em 1889 como um método de avaliação das fibras de colágeno no tecido neural. Frederick Herman Verhoeff, um cirurgião e patologista Americano, então modificou a mancha em 1908, como um método para diferenciar o colágeno e outros tecidos conectivos, e destacar as fibras elásticas em particular.o que mancha?
fibras elásticas são fibras de tecido conjuntivo que permitem que os tecidos se estiquem, e são abundantes na aorta, por exemplo, onde fornecem flexibilidade a este grande vaso sanguíneo. Eles também estão presentes em outros tecidos que precisam de flexibilidade, como pele e pulmão.
estas fibras elásticas finas não podem normalmente ser vistas em secções de tecido corado de rotina da hematoxilina e da eosina (H&e), pelo que são necessárias manchas especiais para as realçar. Pode ler mais sobre H&e nestes artigos a partir do canal de Microscopia e Imagiologia – Parte 1:Método e dicas, Parte 2: receitas e Materiais.
embora existam numerosas manchas especiais para identificação de fibras elásticas, VVG é mais comumente usado porque é rápido, e produz coloração intensa de fibras elásticas.
princípios Gerais da mancha
VVG é uma parte combinação mancha que permite a diferenciação de alguns componentes do tecido conjuntivo em um tecido que não são facilmente distinguidos por H&E coloração:
Verhoeff mancha componente: uma ferro-haematoxylin mancha que é específico para fibras elásticas. Forma fortes ligações com elastina, o principal componente do tecido conjuntivo elástico.componente de coloração de van Gieson: uma contra-resistência específica para o colagénio. Foi nomeado em homenagem ao bacteriologista americano Ira van Gieson, e compreende dois corantes ácidos-ácido picrico e acid fuchsin.
a técnica envolve coloração da amostra de tecido com uma mancha de hematoxilina composta por cloreto férrico e iodo, e compreende dois passos principais:
(1) Sobrestaining: esta etapa envolve um complexo de cloreto–iodo hematoxilina–férrico. Os dois últimos componentes actuam como mordentes para fixar a mancha de hematoxilina nos tecidos, e também como agentes oxidantes para ajudar a converter a hematoxilina à hemateína. O mecanismo de coloração provavelmente envolve formação de ligação de hidrogênio entre a hematoxilina e o tecido, embora as especificidades desta reação não sejam bem conhecidas. Uma vez que a elastina tem uma forte afinidade para o complexo ferro-hematoxilina na mancha, mantém o corante por mais tempo do que outros componentes do tecido. Consequentemente, a elastina permanece manchada mesmo após a descoloração de outros elementos dos tecidos.(2) diferenciação: esta etapa usa excesso de cloreto férrico mordante para quebrar o complexo de Corante de tecido-mordente. Tiossulfato de sódio é usado para remover o excesso de iodo, e a contrastain de van Gieson é usada para produzir contraste com a mancha de hematoxilina. O corante é atraído para o grande volume de mordente na solução de diferenciação e removido do tecido. O tecido elástico, por outro lado, tem a maior afinidade para o componente de ferro da mancha.consequentemente, o produto final da reação é tal que fibras elásticas e núcleos celulares são manchados de preto pelo componente Verhoeff. O colagénio e o músculo estão manchados de vermelho pela contrastain de van Gieson, o que também resulta em coloração amarela do citoplasma celular e de outros componentes do tecido.quem usa a mancha Van Gieson?esta mancha é amplamente utilizada tanto para fins de diagnóstico como de investigação.
em laboratórios de diagnóstico, VVG é usado para identificar a presença ou ausência de fibras elásticas nos tecidos. Por exemplo, os patologistas podem usá-lo para demonstrar perda de tecido elástico no pulmão em pacientes com enfisema, e desbaste e perda de fibras elásticas em vasos sanguíneos de pacientes com arteriosclerose.da mesma forma, pesquisadores que investigam qualquer um destes tipos de doenças também podem examinar rotineiramente seções de tecidos manchados por VVG para detectar a presença ou ausência de fibras elásticas nos tecidos de interesse. Outros pesquisadores podem simplesmente usar a mancha simplesmente para diferenciar fibras de tecido conectivo em tecidos de interesse.como usa a mancha de Verhoeff-van Gieson no seu laboratório?
isto ajudou-o? Então, por favor, partilhe com a sua rede.escrito por Nicola Parry