Résistance inductible à la clindamycine dans les staphylocoques peut être détecté par une méthode de diffusion de disque utilisant des disques de Clindamycine et d’érythromycine. Le test D est effectué par diffusion de disque, en plaçant un disque d’érythromycine de 15 µg à proximité d’un disque de Clindamycine de 2 µg sur une plaque de gélose qui a été inoculée avec un isolat staphylococcique; la plaque est ensuite incubée pendant une nuit.
Un aplatissement de la zone d’inhibition autour du disque de Clindamycine proximal à la Le disque d’érythromycine (produisant une zone d’inhibition en forme de lettre D) est considéré comme un résultat positif et indique que l’érythromycine a induit une résistance à la clindamycine (un « test de zone D » positif). Pour les isolats résistants à l’érythromycine, les tests d’induction peuvent aider les laboratoires à déterminer si les résultats de la clindamycine doivent être déclarés sensibles (lorsque le test d’induction est négatif) ou résistants (lorsque le test d’induction est positif).
Mécanisme d’action de l’érythromycine et de la Clindamycine et Développement de la résistance
L’érythromycine (un macrolide) et la clindamycine (un lincosamide) représentent deux classes distinctes d’agents antimicrobiens qui inhibent la synthèse des protéines en se liant aux sous-unités ribosomiques des cellules bactériennes des années 50. Chez les staphylocoques, la résistance à ces deux agents antimicrobiens peut se produire par méthylation de leur site cible ribosomique. Une telle résistance est généralement médiée par les gènes erm.
Signification clinique de la résistance inductible à la Clindamycine:
La résistance au macrolide-lincosamide-streptogramine B (MLSB), qui est médiée par un mécanisme de modification du côté cible, entraîne une résistance à l’érythromycine, à la clindamycine et à la streptogramine B. Ce mécanisme peut être
- Constitutif, où l’ARNr méthylase est toujours produite,
Si des tests in vitro sont effectués Les isolats de Staphylococcus aureus présentant une résistance constitutive sont résistants à l’érythromycine et à la Clindamycine. - Ou peut être inductible, où la méthylase n’est produite qu’en présence d’un agent inducteur (Remarque: L’érythromycine est un inducteur efficace de la résistance au macrolide-lincosamide-streptogramine B (MLSB)). Les isolats présentant une résistance inductible sont résistants à l’érythromycine, mais semblent sensibles à la clindamycine lors des tests invitro de routine.
Signification clinique du test de résistance inductible à la Clindamycine (Test D)
La clindamycine est un agent attrayant pour le traitement empirique des infections suspectées à S. aureus en raison de ses excellentes propriétés pharmacocinétiques et pharmacodynamiques. Des échecs cliniques du traitement par la clindamycine pour le traitement des infections à SARM ont été documentés pour des souches sensibles à la clindamycine mais résistantes à l’érythromycine. Les échecs étaient dus à une résistance inductible à la clindamycine.
Dans de tels cas, In vivo, le traitement par la Clindamycine peut sélectionner des mutants MCE constitutifs, ce qui peut entraîner un échec clinique. La résistance à la clindamycine peut être constitutive ou inductible. Les tests de sensibilité aux antibiotiques de routine ne permettent pas d’identifier ces souches. Le test D (résistance inductible à la clindamycine) est utilisé pour détecter la résistance inductible à la clindamycine.
Procédure pour le Test de résistance inductible à la Clindamycine (D):
- Préparer 0.5 La suspension standard de McFarland d’isolats de Staphylococcus aureus résistants à l’érythromycine
- Fait une culture de bactéries sur pelouse dans des plaques de gélose Muller Hinton (MHA).
- Placez les disques de Clindamycine (2 µg) et d’érythromycine (15 µg) distants d’environ 15 mm (mesurés bord à bord).
- Incuber la plaque pendant 16 à 18 heures à 37oC
Interprétation du résultat du test D
Une zone d’inhibition claire en forme de D autour du disque de Clindamycine est désignée comme le phénotype D qui est marqué comme D ou D +. Quatre autres phénotypes sans induction (désignés comme négatifs, zone D brumeuse, résistants et sensibles) sont également observés dans les résultats de diffusion sur disque