zona pellucida este un strat acelular care înconjoară membrana plasmatică a ovocitelor de mamifere complet crescute și care efectuează o varietate de funcții importante în timpul oogenezei, fertilizării și dezvoltării preimplantării. În această investigație, proteinele din zona pellucida a ovocitului de șoarece au fost identificate și caracterizate prin utilizarea zonae pellucidae izolate individual din ovocite complet crescute cu micropipete acționate prin gură. Au fost utilizate diferite criterii morfologice și biochimice pentru a evalua puritatea zonae pellucidae izolate și, în majoritatea cazurilor, s-a constatat că acestea sunt practic lipsite de contaminare cu alte proteine ovocitare. S-a stabilit că fiecare zonă pellucida conține 4.8 ng de proteine, care reprezintă 80% sau mai mult din greutatea uscată a zonei pellucida și aproximativ 17% din proteina totală a ovocitului. Analizele electroforetice a doar cinci zone izolate pellucidae tratate cu acid iodosulfanilic diazotizat au evidențiat prezența a doar trei proteine radiomarcate, desemnate ZP1, ZP2 și ZP3. Aceleași trei proteine au fost identificate prin colorarea albastră Coomassie atunci când un număr mare de zonae pellucidae izolate (aproximativ 750) au fost supuse electroforezei în gel SDS-poliacrilamidă. Aceste trei proteine migrează ca benzi largi pe gelurile SDS-poliacrilamidă, în concordanță cu faptul că sunt glicoproteine, cu greutăți moleculare aparente de 200.000 (ZP1), 120.000 (ZP2) și 83.000 (ZP3). Aceleași proteine au fost marcate radioactiv atunci când ovocitele intacte au fost tratate cu acid iodosulfanilic diazotizat, un reactiv care nu pătrunde în membrana plasmatică a ovocitelor sau când zonae pellucidae izolate au fost tratate cu clorură de 1-dimetilaminonaftalină-5-sulfonil marcată cu 3h. Rezultatele analizei aminoacizilor și electroforeza bidimensională de înaltă rezoluție a proteinelor individuale sugerează că fiecare proteină reprezintă un lanț polipeptidic unic. Proteinele ZP1, ZP2 și ZP3 reprezintă aproximativ 36, 47 și, respectiv, 17% din proteina totală a zonei pellucida. În prezența agenților reducători care determină dizolvarea zonei pellucida, ZP1 este transformat într-o specie care migrează cu o greutate moleculară aparentă de 130.000, sugerând că există ca oligomer, stabilizat prin legături disulfidice, în stare neredusă. Rezultatele acestor experimente sunt discutate în ceea ce privește proprietățile zonei pellucida înainte și după fertilizare și sunt comparate cu rezultatele obținute folosind plicuri vitelline de ouă de la specii de animale nemammaliene.