ce este pata lui Verhoeff-van Gieson?
Ira Van Gieson a descris pentru prima dată Protocolul de colorare Verhoeff-van Gieson (VVG) în 1889 ca o metodă de evaluare a fibrelor de colagen din țesutul neuronal. Frederick Herman Verhoeff, chirurg și patolog American, a modificat apoi pata în 1908, ca metodă de diferențiere a colagenului și a altor țesuturi conjunctive și de evidențiere a fibrelor elastice în special.
ce pătează?
fibrele elastice sunt fibre de țesut conjunctiv care permit țesuturilor să se întindă și sunt abundente în aorta, de exemplu, unde oferă flexibilitate acestui vas de sânge mare. Ele sunt, de asemenea, prezente în alte țesuturi care au nevoie de flexibilitate, cum ar fi pielea și plămânul.
aceste fibre elastice fine nu pot fi observate în mod obișnuit pe secțiunile de țesut colorate cu hematoxilină și eozină de rutină (H&E), prin urmare sunt necesare pete speciale pentru a le evidenția. Puteți citi mai multe despre H & E în aceste articole din canalul de microscopie și imagistică-Partea 1:Metodă și sfaturi, Partea 2: rețete și materiale.
deși există numeroase pete speciale pentru identificarea fibrelor elastice, VVG este cel mai frecvent utilizat deoarece este rapid și produce o colorare intensă a fibrelor elastice.
principii generale ale colorației
VVG este o colorare combinată în două părți care permite diferențierea unor componente ale țesutului conjunctiv într-un țesut care nu se disting ușor prin H&e colorare:
componenta colorației Verhoeff: o pată de fier-hematoxilină specifică fibrelor elastice. Formează legături puternice cu elastina, componenta principală a țesutului conjunctiv elastic.
componenta van Gieson stain: o contra-pată specifică colagenului. A fost numit după bacteriologul american Ira van Gieson și cuprinde doi coloranți acizi – acid picric și acid fuchsin.
tehnica implică colorarea specimenului de țesut cu o pată de hematoxilină compusă din clorură ferică și iod și cuprinde două etape principale:
(1) suprasolicitarea: această etapă implică un complex de hematoxilină–clorură ferică–iod. Ultimele două componente acționează ca mordanți pentru a fixa pata de hematoxilină pe țesuturi și, de asemenea, acționează ca agenți oxidanți pentru a ajuta la transformarea hematoxilinei în hemateină. Mecanismul de colorare implică probabil formarea legăturii de hidrogen între hematoxilină și țesut, deși specificul acestei reacții nu este bine cunoscut. Deoarece elastina are o afinitate puternică pentru complexul de fier-hematoxilină din pată, aceasta ține colorantul mai mult decât alte componente tisulare. Prin urmare, elastina rămâne colorată chiar și după decolorarea altor elemente tisulare.
(2) diferențiere: acest pas folosește excesul de clorură ferică mordant pentru a descompune complexul de colorant țesut-Mordant. Tiosulfatul de sodiu este utilizat pentru a elimina excesul de iod, iar contra-pata van Gieson este utilizată pentru a produce contrast cu pata de hematoxilină. Colorantul este atras de volumul mare de mordant în soluția de diferențiere și îndepărtat din țesut. Țesutul elastic, pe de altă parte, are cea mai puternică afinitate pentru componenta de fier a petei.
în consecință, produsul final al reacției este de așa natură încât fibrele elastice și nucleele celulare sunt colorate în negru de componenta Verhoeff. Colagenul și mușchii sunt colorați în roșu de contra-pata van Gieson, ceea ce duce, de asemenea, la colorarea galbenă a citoplasmei celulare și a altor componente tisulare.
cine folosește pata Van Gieson?
această pată este utilizată pe scară largă atât în scopuri de diagnostic, cât și de cercetare.
în laboratoarele de diagnosticare, VVG este utilizat pentru a identifica prezența sau absența fibrelor elastice în țesuturi. De exemplu, patologii îl pot folosi pentru a demonstra pierderea țesutului elastic în plămâni la pacienții cu emfizem și subțierea și pierderea fibrelor elastice în vasele de sânge ale pacienților cu arterioscleroză.în mod similar, cercetătorii care investighează oricare dintre aceste tipuri de boli pot, de asemenea, să examineze în mod obișnuit secțiunile de țesut colorate cu VVG pentru a detecta prezența sau absența fibrelor elastice în țesuturile de interes. Alți cercetători pot folosi pur și simplu pata pur și simplu pentru a diferenția fibrele țesutului conjunctiv în țesuturile de interes.
cum folosești pata Verhoeff-van Gieson în laboratorul tău?
te-a ajutat asta? Apoi, vă rugăm să partajați cu rețeaua.