2 HZB bildning
HzB består av oxiderad denaturerad Hb. De känns ofta inte igen på rutinmässigt färgade blodfilmer, eftersom de antingen inte är färgade eller fläckar på samma sätt som den återstående intakta Hb. Om de är av tillräcklig storlek (1 till 2 kg) kan de uppträda som bleka inneslutningar i RBC eller som nippelliknande utsprång från ytan på RBC. HzB kan visualiseras som mörka, refraktila inneslutningar i nya metylenblå” våta ” preparat och som ljusblå inneslutningar med retikulocytfläckar (Harvey, 2001).
följande sekvens av oxidantutlöst biokemiska händelser som leder till HZB-bildning föreslås (Allen och Jandl, 1961; Chiu och Lubin, 1989; Hebbel och Eaton, 1989; låg, 1989; Mawatari och Murakami, 2004): (1) ferrohemes oxideras till ferrihemes (MetHb). (2) reaktiva SH-grupper av MetHb oxideras (cystein 93 i den humana HB-bronkialkedjan) och blandade disulfidbindningar bildas efter interaktion med GSSG (genereras också som svar på oxidativ stress). Denna glutationylering av Metb kan vara skyddande, eftersom dessa globin SH-grupper kan regenereras via glutaredoxin, och eventuellt thioredoxin, system (Klatt och Lamas, 2000). (3) när ytterligare oxidation fortsätter oxideras normalt ”begravda” SH-grupper av Metb och orsakar ytterligare glutationyleringsreaktioner och förmodligen disulfidbindningsbildning mellan globinkedjor. Dessa reaktioner är förmodligen inte reversibla (Mawatari och Murakami, 2004). (4) konformationsförändringar i globinkedjor resulterar i dissociation av tetrameren till dimerer och monomerer och hemichrombildning (hemichromes har både järnjärnets femte och sjätte koordinatpositioner upptagna av en ligand som tillhandahålls av globinkedjan). (5) Hemikromer binder till band 3 och i mindre grad andra membrankomponenter och bildar kluster av sampolymerer. (6) utfällningen och ackumuleringen av denaturerade globinmolekyler resulterar i HZB-bildning. Utfällning förstärks av dissociationen av ferriheme (hemin) – delarna från hemichromerna eftersom de resulterande fria globinkedjorna är instabila.
hemolytiska anemier associerade med HZB-bildning hos husdjur har resulterat från en mängd olika föreningar. Kost orsaker inkluderar konsumtion av lök av nötkreatur (Lincoln et al., 1992), får (Kirk och Bulgin, 1979; Knight et al., 2000; Verhoeff et al., 1985), hästar (Pierce et al., 1972), katter (Kobayashi, 1981) och hundar (Harvey och Rackear, 1985; Ogawa et al., 1986), konsumtion av vitlök av hundar och hästar (Lee et al., 2000; Pearson et al., 2005; Yamato et al., 2005), och konsumtion av kale och andra Brassica arter av idisslare (Greenhalgh et al., 1969; Smith, 1980; Suttle et al., 1987). Dipropyl och diallyl di -, tri-och tetrasulfider och eventuellt andra organiska svavelföreningar härledda från växter i Allium-släktet (lök, vitlök och gräslök) orsakar oxidativ skada på RBC. ROS bildas under redoxåtervinning av dessa föreningar eller deras metaboliter i närvaro av GSH och OxyHb (Munday et al., 2003). GSH: s roll som en källa till elektroner i denna redoxcykel kan förklara varför hundar med höga RBC GSH-koncentrationer är mer mottagliga för lökinducerad RBC-skada än hundar med normala RBC GSH-koncentrationer (Yamoto och Maede, 1992). När det gäller Brassica-arter rapporteras den hemolytiska faktorn vara dimetyldisulfid, framställd genom verkan av våmmmikrober på S-metylcysteinsulfoxid som finns i växterna (Smith, 1980).
HZB hemolytisk anemi förekommer i Florida hos nötkreatur som betar på frodiga råg (Secale cereale) betesmarker på vintern (Simpson och Anderson, 1980) och i selenbristande nötkreatur som betar på St.Augustine gräs betesmarker på sommaren (Morris et al., 1984). Naturen hos de involverade oxidanterna är okänd. Metemoglobinemi, HZB-bildning, svår intravaskulär hemolys och död har följt konsumtionen av röda lönnlöv av hästar (Alward et al., 2006; George et al., 1982; Tennant et al., 1981) och alpacas (DeWitt et al., 2004). Vissna eller torkade löv är giftiga, men nyskördade löv är det inte. Gallinsyra och andra föreningar har identifierats i bladen som kan inducera oxidativ skada (Boyer et al., 2002).
postparturient hemoglobinuri med HZB-bildning förekommer hos nötkreatur i Nya Zeeland som betar främst på flerårigt rajgräs (Lolium perenne) (Martinovich och Woodhouse, 1971). Postparturient nötkreatur kan vara mer mottagliga för utveckling av anemi eftersom ökad livsmedelskonsumtion i samband med laktation kan öka exponeringen för en oidentifierad dietoxidant. Både hypocuprosis (Gardner et al., 1976) och hypofosfatemi (Jubb et al., 1990) har ansetts bidra till svårighetsgraden av anemi hos dessa nötkreatur. Ett uppenbarligen annorlunda syndrom av postparturient hemoglobinuri har också rapporterats hos hypofosfatemiska nötkreatur i Nordamerika (MacWilliams et al., 1982). HzB har inte rapporterats hos drabbade djur, och anemi verkar utvecklas eftersom drabbade djur har minskat RBC ATP-koncentrationer (Ogawa et al., 1987, 1989).
metemoglobinemi och HZB hemolytisk anemi uppträder akut när stora mängder koppar frigörs från levern hos idisslare som har ackumulerat alltför stora mängder leverkoppar sekundärt till ökat kostintag (Brewer, 1987; Kerr och McGavin, 1991; Soli och Froslie, 1977). Zinktoxicitet har främst resulterat från konsumtion och retention av zinkinnehållande föremål i hundens mage. Källor av zink inkluderar amerikanska pennies präglade efter 1982, metallhårdvara, leksaker och salva innehållande zinkoxid (Bexfield et al., 2007; Breitschwerdt et al., 1986). Mekanismen(erna) genom vilka zink producerar hemolytisk anemi är oklar, men HzB har erkänts i vissa kliniska fall (Bexfield et al., 2007; Hammond et al., 2004; Harvey, 2001; Houston och Myers, 1993; Luttgen et al., 1990). HZB-anemi rapporterades också hos en hund efter eventuellt intag av naftalen (Desnoyers och Hebert, 1995).
kliniska fall av HZB-hemolytiska anemier har inträffat efter administrering av en mängd olika läkemedel inklusive metylenblått hos katter (Schechter et al., 1973) och hundar (Fingeroth och Smeak, 1988; Osuna et al., 1990), fenazopyridin i en katt (Harvey och Kornick, 1976), acetaminophen hos katter (Finco et al., 1975; Gaunt et al., 1981; Hjelle och Grauer, 1986) och hundar (Harvey et al., 1986; Houston och Myers, 1993), metionin hos katter (Maede et al., 1987), menadion (vitamin K3) hos hundar (Fernandez et al., 1984) och fenotiazin hos hästar (McSherry et al., 1966). Appliceringen av bensokain på inflammerad hundhud kan resultera i metemoglobinemi och Heinz kroppsbildning (Harvey et al., 1979). Heinz body hemolytisk anemi har rapporterats hos en hund som hade sprayats med skunk musk (Zaks et al., 2005). En mängd ytterligare oxidanter producerar HZB-hemolytiska anemier experimentellt hos djur (Fertman och Fertman, 1955).
katter är allmänt erkända som de arter som är mest mottagliga för HZB-bildning. Även om artskillnader i metabolism och utsöndring av olika läkemedel delvis kan redogöra för denna ökade mottaglighet, verkar katt Hb i allmänhet mer mottaglig för oxidativ denaturering än Hbs av andra arter (Harvey och Kaneko, 1976b). Närvaron av 8 till 10 reaktiva SH-grupper per HB-tetramer i katt Hb kan göra den mer mottaglig för oxidation (Mauk och Taketa, 1972); uppenbarligen har ingen annan art mer än 4 reaktiva SH-grupper per tetramer (Snow, 1962).
HzB känns sällan igen i RBC från de flesta arter, men är ofta närvarande i katt RBC på grund av känsligheten hos katt Hb för att bilda HzB, kombinerat med en dålig förmåga hos kattmjälten att ta bort HzB från RBC (Jain, 1986). Även normala katter kan ha lågt antal HzB (<5%), och ökade HZB-nummer har setts hos kattungar som matas med fiskbaserade dieter (Hickman et al., 1990), hos katter matade kommersiella mjuka fuktiga dieter innehållande propylenglykol (Christopher et al., 1989; Hickman et al., 1990), och hos katter matade barnmat innehållande lökpulver (Robertson et al., 1998). Ökad HZB-bildning kan förekomma hos katter med upprepad propofolanestesi (Andress et al., 1995; Matthews et al., 2004). Ökat HZB-antal har också dokumenterats hos katter med diabetes mellitus, hypertyreoidism och lymfom (Christopher, 1989). Diabetiska katter med ketoacidos har mer HzB och lägre hematokriter än icke-ketotiska diabetiska katter (Christopher et al., 1995). Även om RBC-överlevnad tenderar att förkortas, är anemi antingen frånvarande eller mild under de föregående tillstånden. De oxidativa reaktionerna som är involverade i dessa tillstånd är inte tydligt definierade.