Vad är Verhoeff-van Giesons fläck?
IRA Van Gieson beskrev först Verhoeff-van Gieson (VVG) – färgningsprotokollet 1889 som en metod för att utvärdera kollagenfibrer i nervvävnad. Frederick Herman Verhoeff, en amerikansk kirurg och patolog, modifierade sedan fläcken 1908, som en metod för att differentiera kollagen och andra bindväv, och särskilt markera elastiska fibrer.
vad fläckar det?
elastiska fibrer är bindvävsfibrer som tillåter vävnader att sträcka sig och är rikliga i aorta, till exempel där de ger flexibilitet till detta stora blodkärl. De finns också i andra vävnader som behöver flexibilitet, såsom hud och lunga.
dessa fina elastiska fibrer kan vanligtvis inte ses på rutinmässigt hematoxylin och eosin (H&e)-färgade vävnadssektioner, därför krävs speciella fläckar för att markera dem. Du kan läsa mer om H& E i dessa artiklar från Microscopy and Imaging Channel-Del 1:Metod och Tips, Del 2: recept och material.
även om det finns många speciella fläckar för identifiering av elastiska fibrer, används VVG oftast eftersom det är snabbt och ger intensiv färgning av elastiska fibrer.
allmänna principer för fläcken
VVG är en tvådelad kombinationsfläck som möjliggör differentiering av vissa bindvävskomponenter i en vävnad som inte lätt kan särskiljas av H& e färgning:
Verhoeff fläckkomponent: en järn-hematoxylin fläck som är specifik för elastiska fibrer. Det bildar starka bindningar med elastin, huvudkomponenten i elastisk bindväv.
van Gieson stain component: en motfärg som är specifik för kollagen. Det namngavs efter amerikansk bakteriolog IRA van Gieson, och består av två sura färgämnen – pikrinsyra och syrafuchsin.
tekniken innebär färgning av vävnadsprovet med en hematoxylinfläck som består av järnklorid och jod och består av två huvudsteg:
(1) Överfärgning: detta steg innefattar ett komplex av hematoxylin–järnklorid–jod. De senare två komponenterna fungerar som mordanter för att fixera hematoxylinfläcken till vävnaderna och fungerar också som oxidationsmedel för att hjälpa till att omvandla hematoxylin till hematein. Färgningsmekanismen involverar förmodligen vätebindningsbildning mellan hematoxylin och vävnad, även om detaljerna i denna reaktion inte är välkända. Eftersom elastin har en stark affinitet för järn-hematoxylinkomplexet i fläcken, håller det färgämnet längre än andra vävnadskomponenter. Elastin förblir därför färgat även efter att andra vävnadselement avfärgas.
(2) differentiering: detta steg använder överskott av järnkloridmordant för att bryta ner vävnads-mordant-dye-komplexet. Natriumtiosulfat används för att avlägsna överskott av jod, och van Gieson-motfärgen används för att producera kontrast med hematoxylinfläcken. Färgen lockas till den stora volymen av mordant i den differentierande lösningen och avlägsnas från vävnaden. Den elastiska vävnaden har å andra sidan den starkaste affiniteten för fläckens järnkomponent.följaktligen är slutprodukten av reaktionen sådan att elastiska fibrer och cellkärnor färgas svart av Verhoeff-komponenten. Kollagen och muskler färgas rött av van Gieson-motfärgen, vilket också resulterar i gul färgning av cellcytoplasma och andra vävnadskomponenter.
Vem använder Van Gieson stain?
denna fläck används i stor utsträckning för både diagnostiska och forskningsändamål.
i diagnostiska laboratorier används VVG för att identifiera närvaron eller frånvaron av elastiska fibrer i vävnader. Till exempel kan patologer använda den för att visa förlust av elastisk vävnad i lungan hos patienter med emfysem, och gallring och förlust av elastiska fibrer i blodkärlen hos patienter med åderförkalkning.på samma sätt kan forskare som undersöker någon av dessa typer av sjukdomar också rutinmässigt undersöka VVG-färgade vävnadssektioner för att detektera närvaron eller frånvaron av elastiska fibrer i vävnader av intresse. Andra forskare kan helt enkelt använda fläcken helt enkelt för att skilja bindvävsfibrer i vävnader av intresse.
hur använder du Verhoeff-van Gieson stain i ditt labb?
har detta hjälpt dig? Vänligen dela med ditt nätverk.