honning har en antifungal virkning mod Candida-arter

abstrakt

forekomsten af Candida-infektioner eskalerer over hele verden. Den alvorlige karakter af disse infektioner forstærkes af stigende niveauer af lægemiddelresistens. Vi rapporterer, at visse honninger har signifikant antifungal aktivitet mod kliniske isolater af Candida-arter. Det er vigtigt, at den minimale hæmmende koncentration af disse honninger ville være opnåelig i en klinisk indstilling.

introduktion

honning er blevet brugt som medicin i tusinder af år og har vist sig at være et effektivt antimikrobielt middel 1. Denne antimikrobielle aktivitet stammer primært fra produktionen af brintoverilte fra glukose og ilt ved hjælp af glucoseoksidase, et bi-afledt 2. Honning fra visse arter af leptospermumflora, der er hjemmehørende i Australien, indeholder yderligere fytokemiske komponenter, der yderligere forbedrer dets antibakterielle aktivitet 3. Den præcise karakter af disse komponenter er endnu ikke identificeret.

selvom flere in vitro-undersøgelser har vist de antibakterielle egenskaber ved honning 3-5, har få undersøgt virkningen mod svampe. Forekomsten af svampeinfektioner er stigende i både samfund og hospital miljøer, med Candida spp. blandt de førende organismer. Candida albicans forårsager orale infektioner, over 50% af candidæmi tilfælde 6-9 og mere end 90% af vaginal candidiasis 10, 11. For nylig har der været øgede rapporter om ikke-C. albicans Candida arter i kliniske studier. Candida glabrata er blevet den dominerende Ikke-C. albicans Candida arter involveret i blodbanen og vaginale infektioner 9, 12-14, mens Candida dubliniensis ofte er impliceret i oropharyngeal candidiasis 15. Infektion med ikke-C. albicans Candida-arter har vigtige kliniske implikationer, da mange er resistente over for konventionel antifungal behandling. Andre konventionelle antifungale terapier er enten giftige eller af begrænset virkning, og der er et voksende behov for nye potente antifungale midler. Formålet med den aktuelle undersøgelse var at bestemme effektiviteten af forskellige honninger mod kliniske isolater af C. albicans, C. glabrata og C. dubliniensis.

materialer og metoder

kliniske isolater af C. albicans, C. glabrata og C. dubliniensis blev testet mod fire forskellige honninger: en uforarbejdet Jarrah-honning med brintoverilteaktivitet (Total antibakteriel aktivitet (som beskrevet i 16) svarende til 30,2% phenol 17); Medihoney Krit antibakteriel Honningbarriere, en proprietær blanding af Leptospermum og brintoverilte-honning (fytokemisk aktivitet 18% phenolækvivalent); Comvita-sårpleje 18+, en ren Leptospermum honning (fytokemisk aktivitet-18% Phenolækvivalent); og en kunstig honning, der bruges til at simulere de høje sukkerniveauer, der findes i honning (7,5 g saccharose, 37,5 g maltose, 167,5 g glucose og 202,5 g fructose i 85 ml sterilt vand).

den mindste hæmmende koncentration (MIC) af hver honning blev bestemt ud fra nccls-mikrofortyndingsmetoden 18. Halvtreds procent (vægt/v) stamopløsninger af honning i rpmi-1640 medium (med glutamin og uden bicarbonat (Sigma)) blev fremstillet umiddelbart før hvert assay og filter steriliseret gennem 0,2 liter porefiltre (Millipore). Stamopløsninger blev yderligere fortyndet med rpmi-1640 medium i 96-brønds mikrotiterplader for at give endelige honningkoncentrationer, der steg i trin på 1% (vægt/v). Suspensioner af Candida-isolater blev fremstillet i sterilt 0,85% saltvand, og transmittansen ved 530 nm blev justeret til 80-88%. Suspensioner blev fortyndet i rpmi–1640-medium, og der blev sat 25 liter til hver brønd i mikrotiterpladen umiddelbart efter tilberedning af honningopløsningerne, hvilket resulterede i et endeligt inokulum på 0,5-2,5 liter 103 CFU/ml. Efter inkubation ved 35oC i 24 timer blev MIC registreret som den laveste koncentration af honning, der forhindrede synlig vækst. Hvert Candida-isolat blev testet i to eksemplarer, og analyserne blev gentaget på en separat dag. Mann – Hvidney u-testen blev brugt til at evaluere statistisk signifikante grupper. Korrelationer blev udført ved hjælp af Spearman rank-order test.

resultater

resultater af følsomheden af C. albicans, C. glabrata og C. dubliniensis over for forskellige honninger er vist i tabel 1. Jarrah honning var signifikant mere aktiv mod de tre Candida arter (P < 0,00001). De svampedræbende aktiviteter af blomsterhonningerne var signifikant større end den kunstige honning mod C. albicans og C. glabrata (P < 0,002), men for C. dubliniensis var kun Jarrah-honning signifikant mere aktiv (P < 0,00001). C. dubliniensis var mere modtagelig for den osmotiske virkning af alle honninger og for de svampedræbende virkninger af Jarrah-honning og udviste signifikant lavere Mikrofoner end de andre arter (P < 0,00001). C. glabrata, som er medfødt mindre modtagelig for mange konventionelle svampemidler 19, var den mindst modtagelige for de testede honning (P < 0,00001).