La miel tiene un efecto antimicótico contra las especies de Cándida

Resumen

La incidencia de infecciones por Cándida está aumentando en todo el mundo. La gravedad de estas infecciones se ve agravada por el aumento de los niveles de resistencia a los medicamentos. Reportamos que ciertas mieles tienen una actividad antifúngica significativa contra aislados clínicos de especies de Candida. Es importante destacar que la concentración inhibitoria mínima de estas mieles sería alcanzable en un entorno clínico.

Introducción

La miel se ha utilizado como medicamento durante miles de años y se ha demostrado que es un agente antimicrobiano eficaz 1. Esta actividad antimicrobiana se deriva principalmente de la producción de peróxido de hidrógeno a partir de la glucosa y el oxígeno por la glucosa oxidasa, una enzima 2 derivada de la abeja. La miel de ciertas especies de flora de Leptospermo nativa de Australia y Nueva Zelanda contiene componentes fitoquímicos adicionales que mejoran aún más su actividad antibacteriana 3. Aún no se ha determinado la naturaleza exacta de esos componentes.

Aunque varios estudios in vitro han demostrado las propiedades antibacterianas de la miel 3-5, pocos han examinado la acción contra los hongos. La incidencia de infecciones fúngicas está aumentando tanto en la comunidad como en el entorno hospitalario, con Candida spp. entre los organismos líderes. Candida albicans causa infecciones orales, más del 50% de los casos de candidemia 6-9 y más del 90% de la candidiasis vaginal 10, 11. Recientemente ha habido un aumento de informes de especies de candida no pertenecientes a C. albicans en estudios clínicos. Candida glabrata se ha convertido en la no C dominante. especies de candida de albicans involucradas en infecciones vaginales y del torrente sanguíneo 9, 12-14, mientras que la candida dubliniensis a menudo está implicada en la candidiasis orofaríngea 15. La infección con especies de candida no C. albicans tiene implicaciones clínicas importantes, ya que muchas son resistentes a la terapia antifúngica convencional a base de triazol. Otras terapias antifúngicas convencionales son tóxicas o de eficacia limitada, y existe una creciente necesidad de nuevos agentes antifúngicos potentes. El objetivo del presente estudio fue determinar la eficacia de varias mieles frente a aislados clínicos de C. albicans, C. glabrata y C. dubliniensis.

Materiales y métodos

Aislados clínicos de C. albicans, C. glabrata y C. dubliniensis se probaron con cuatro mieles diferentes: una miel Jarrah sin procesar con actividad de peróxido de hidrógeno (actividad antibacteriana total (descrita en 16) equivalente al 30,2% de fenol 17); Medihoney® Barrera Antibacteriana de miel, una mezcla patentada de mieles de Leptospermo y peróxido de hidrógeno (actividad fitoquímica ≥18% de fenol equivalente); Comvita® Wound Care 18+, una miel de leptospermo pura (actividad fitoquímica ≥18% de fenol equivalente); y una miel artificial, utilizada para simular los altos niveles de azúcar que se encuentran en la miel (7,5 g de sacarosa, 37,5 g de maltosa, 167,5 g de glucosa y 202,5 g de fructosa en 85 ml de agua estéril).

La concentración inhibitoria mínima (CMI) de cada miel se determinó con base en el método de microdilución NCCLS 18. El cincuenta por ciento (p/v) de soluciones madre de miel en medio RPMI-1640 (con glutamina y sin bicarbonato (Sigma)) se prepararon inmediatamente antes de cada ensayo y el filtro se esterilizó a través de filtros de poros de 0,2 µm (Miliporos). Las soluciones madre se diluyeron con el medio RPMI-1640 en placas de microtitulado de 96 pocillos para obtener concentraciones finales de miel que aumentaron en incrementos de 1% (p/v). Las suspensiones de aislados de candida se prepararon en solución salina estéril al 0,85% y la transmitancia a 530 nm se ajustó al 80-88%. Las suspensiones se diluyeron en medio RPMI-1640 y se añadieron 25 µl a cada pocillo de la placa de microtitulado inmediatamente después de la preparación de las soluciones de miel, lo que dio como resultado un inóculo final de 0,5–2,5×103 ufc/ml. Después de la incubación a 35oC durante 24 h, la CMI se registró como la concentración más baja de miel que impidió el crecimiento visible. Cada aislado de Candida se probó por duplicado y los ensayos se repitieron en un día separado. Se utilizó la prueba U de Mann-Whitney para evaluar grupos estadísticamente significativos. Las correlaciones se realizaron mediante la prueba de orden de rango de Spearman.

Resultados

Los resultados de la susceptibilidad de C. albicans, C. glabrata y C. dubliniensis a varias mieles se muestran en la Tabla 1. La miel de Jarrah fue significativamente más activa contra las tres especies de Candida (P < 0.00001). Las actividades antifúngicas de las mieles florales fueron significativamente mayores que la miel artificial contra C. albicans y C. glabrata (P < 0.002), pero para C. dubliniensis, solo la miel Jarrah fue significativamente más activa (P < 0.00001). C. dubliniensis fue más susceptible al efecto osmótico de todas las mieles y a los efectos antifúngicos de la miel de Jarrah, exhibiendo MICs significativamente más bajos que las otras especies (P < 0.00001). C. glabrata, que es innatamente menos susceptible a muchos antifúngicos convencionales 19, fue la menos susceptible a las mieles analizadas (P < 0,00001).

resistencia a los Medicamentos se encontraban en los perfiles disponibles para 20 de los aislamientos. Doce de ellos eran resistentes o sensibles a dosis dependientes de itraconazol y/o fluconazol. Todos estos aislados fueron inhibidos por la miel, sin relación estadística entre la susceptibilidad antifúngica y la sensibilidad a la miel (P > 0,05).

Discusión

Observaciones limitadas han encontrado que la miel tiene un efecto inhibitorio contra C. albicans en vitro20–22, sin embargo, en ninguno de estos estudios se utilizaron mieles estandarizadas o métodos de ensayo. Solo un estudio publicado ha utilizado miel con actividad conocida equivalente a fenol para examinar la actividad antifúngica 23. En este estudio se compararon los efectos de la miel de pasto con la miel de leptospermo contra hongos dermatofitos. De acuerdo con los resultados del presente estudio, se encontró que la miel tipo peróxido de hidrógeno tiene un mayor efecto antifúngico.

El presente estudio no encontró relación estadística entre la susceptibilidad antifúngica y la sensibilidad a la miel. Esto es de particular importancia teniendo en cuenta la creciente tasa de resistencia a los fármacos azólicos entre los aislados de Candida 8, 24, 25, y el hallazgo de que la profilaxis a base de azoles aumenta el riesgo de infección con sustancias no C. Albicanescandida, que puede ser menos sensible a las dosis habituales de medicamentos 6, 24.

Aunque este estudio demuestra el efecto antimicótico de la miel in vitro, hay algunas consideraciones prácticas para su uso in vivo. En primer lugar, la miel se limita a los tratamientos tópicos y no se puede utilizar para tratar la candidemia, la forma más grave de candidiasis. Sin embargo, como el principal factor de riesgo de infección del torrente sanguíneo es la colonización o infección de sitios externos, como los catéteres permanentes, o la mucosa oral o vaginal 19, la miel se puede usar de forma profiláctica para prevenir infecciones más graves. Se encontró que la miel entera colocada directamente alrededor de los catéteres era al menos tan efectiva como la povidona yodada 26 o la mupirocina 27 para prevenir la infección en el sitio de salida. En segundo lugar, como la miel es soluble en agua, puede ser diluida o eliminada por los fluidos corporales, particularmente la saliva en la cavidad oral. Un estudio piloto realizado por English et al. 28 encontraron una reducción significativa en las puntuaciones medias de placa y sitios de sangrado en pacientes a los que se les administró un «cuero de miel» masticable; esta misma técnica podría aplicarse para el tratamiento de la candidiasis oral. En otros sitios del cuerpo, la aplicación regular de miel al 100% mantendría una concentración muy por encima de la MIC deseada. La miel también podría incorporarse a un pesario para el tratamiento de la candidiasis vaginal. Otro problema práctico es la presencia de catalasa en los fluidos corporales que tiene el potencial de reducir la actividad de peróxido de hidrógeno. Sin embargo, los informes de casos y los ensayos clínicos sugieren que se retiene suficiente actividad para permitir que la miel sea efectiva en el entorno clínico 29, 30. Los resultados del estudio actual abogan por ensayos clínicos controlados para establecer la miel como un agente antimicótico tópico.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por la subvención del Comité de Abejas de la Corporación de Investigación y Desarrollo de Industrias Rurales, número US-128. Los aislados clínicos fueron amablemente proporcionados por el Instituto de Patología Clínica e Investigación Médica del Hospital Westmead, Sydney, Australia; y Universidad de Ciencias Médicas de Mazandaran, Sari, Irán. Las muestras de miel fueron amablemente proporcionadas por Medihoney Pty. Ltd., Queensland, Australia; Comvita Medical Ltd., Te Puke, Nueva Zelanda; y la Asociación de Apicultores de Australia Occidental.