a méz gombaellenes hatást fejt ki a Candida fajok ellen

absztrakt

a Candida fertőzések előfordulása világszerte növekszik. Ezeknek a fertőzéseknek a súlyos jellegét súlyosbítja a gyógyszerrezisztencia növekvő szintje. Beszámoltunk arról, hogy egyes mézek jelentős gombaellenes hatást fejtenek ki a Candida fajok klinikai izolátumaival szemben. Fontos, hogy ezeknek a mézeknek a minimális gátló koncentrációja klinikai körülmények között elérhető lenne.

Bevezetés

a mézet évezredek óta használják gyógyszerként, és hatékony antimikrobiális szernek bizonyult1. Ez az antimikrobiális hatás elsősorban a hidrogén-peroxid glükózból és oxigénből történő előállításából származik, amelyet a méhekből származó 2 enzim glükóz-oxidáz termel. Az Ausztráliában és Új-Zélandon őshonos Leptospermum flóra egyes fajaiból származó méz további fitokémiai összetevőket tartalmaz, amelyek tovább fokozzák antibakteriális aktivitását 3. Ezen összetevők pontos jellegét még nem kell meghatározni.

bár számos in vitro vizsgálat kimutatta a méz 3-5 antibakteriális tulajdonságait, kevesen vizsgálták a gombák elleni hatást. A gombás fertőzések előfordulása növekszik mind a közösségben, mind a kórházi környezetben, Candida spp. a vezető szervezetek között. A Candida albicans orális fertőzéseket okoz, a candidaemia esetek több mint 50% – át 6-9 és a hüvelyi candidiasis több mint 90% – át 10, 11. A közelmúltban egyre több jelentés érkezett a nem C. albicans Candida fajokról a klinikai vizsgálatokban. A Candida glabrata lett a domináns nem C. albicans Candida fajok részt vesznek a véráramban és a hüvelyi fertőzésekben 9, 12-14, míg a Candida dubliniensis gyakran szerepet játszik az oropharyngealis candidiasisban 15. A nem C. albicans Candida fajokkal való fertőzésnek fontos klinikai következményei vannak, mivel sokan rezisztensek a hagyományos triazol-alapú gombaellenes terápiával szemben. Más hagyományos gombaellenes terápiák vagy mérgezőek, vagy csak korlátozott hatásúak, és egyre nagyobb szükség van új, erős gombaellenes szerekre. A jelenlegi vizsgálat célja a különböző mézek hatékonyságának meghatározása volt a C. albicans, C. glabrata és C. dubliniensis.

anyagok és módszerek

A C. albicans, a C. glabrata és a C. dubliniensis klinikai izolátumait négy különböző méz ellen vizsgáltuk: egy feldolgozatlan Jarrah méz hidrogén-peroxid aktivitással (a teljes antibakteriális aktivitás (a 16. pontban leírtak szerint) 30,2% fenol 17-nek felel meg); Medihoney ++ antibakteriális méz Barrier, Leptospermum és hidrogén-peroxid mézek szabadalmaztatott keveréke (fitokémiai aktivitás 68% fenolegyenérték); Comvita sebkezelés 18+, tiszta Leptospermum méz (fitokémiai aktivitás 18% fenolegyenérték); és egy mesterséges méz, amelyet a mézben található magas cukorszint szimulálására használnak (7,5 g szacharóz, 37,5 g maltóz, 167,5 g glükóz és 202,5 g fruktóz 85 ml steril vízben).

az egyes mézek minimális gátló koncentrációját (MIC) az NCCLS mikrodilúciós módszer alapján határoztuk meg 18. Az rpmi-1640 táptalajban (glutaminnal és hidrogén-karbonát (Sigma) nélkül) lévő méz ötven százalékos (m/v) törzsoldatát közvetlenül minden vizsgálat előtt elkészítettük, és a szűrőt 0,2 km pórusszűrőn (Millipore) sterilizáltuk. A törzsoldatokat RPMI-1640 táptalajjal tovább hígítottuk 96 lyukú mikrotitrlemezekben, hogy a méz végső koncentrációja 1% (m/v) lépésekben növekedjen. A Candida izolátumok szuszpenzióit steril 0,85% – os sóoldatban állítottuk elő, és az áteresztőképességet 530 nm-en 80-88% – ra állítottuk be. A szuszpenziókat RPMI-1640 táptalajban hígítottuk, majd a mézoldatok elkészítése után a mikrotitremez minden egyes kútjához 25 ~ ml–t adtunk, ami 0,5-2,5 ~ 103 cfu/ml végső inokulumot eredményezett. 35oC-on 24 órán át tartó inkubálást követően a MIC-t a méz legalacsonyabb koncentrációjaként regisztrálták, amely megakadályozta a látható növekedést. Minden Candida izolátumot két példányban teszteltek, és a vizsgálatokat külön napon megismételték. A Mann-Whitney U tesztet használták statisztikailag szignifikáns csoportok értékelésére. A korrelációkat a Spearman rank-order teszt segítségével végeztük.

eredmények

A C. albicans, a C. glabrata és a C. dubliniensis különböző mézekre való érzékenységének eredményeit az 1.táblázat mutatja. A Jarrah méz szignifikánsan aktívabb volt a három Candida faj ellen (P < 0,00001). A virágmézek gombaellenes aktivitása szignifikánsan nagyobb volt, mint a mesterséges méz a C. albicans és a C. glabrata ellen (P < 0.002), de a C. dubliniensis esetében csak a Jarrah méz volt szignifikánsan aktívabb (P < 0.00001). C. a dubliniensis érzékenyebb volt az összes méz ozmotikus hatására, valamint a Jarrah méz gombaellenes hatására, szignifikánsan alacsonyabb Mic-ket mutatott, mint a többi faj (P < 0,00001). A C. glabrata, amely eredendően kevésbé érzékeny számos hagyományos gombaellenes szerre 19, volt a legkevésbé érzékeny a vizsgált mézekre (P < 0,00001).

gyógyszerrezisztencia profilok 20 izolátum esetében álltak rendelkezésre. Ezek közül tizenkettő rezisztens vagy érzékeny volt-dózisfüggő az itrakonazolra és / vagy a flukonazolra. Mindezeket az izolátumokat a méz gátolta, a gombaellenes érzékenység és a mézre való érzékenység között nincs statisztikai összefüggés (P > 0,05).

megbeszélés

Korlátozott megfigyelések szerint a méz gátló hatást fejt ki a vitro20–22-ben a C. albicans ellen, azonban ezen vizsgálatok egyike sem használt szabványosított mézet vagy vizsgálati módszereket. Csak egy publikált tanulmány használt ismert fenol-ekvivalens aktivitású mézet a gombaellenes aktivitás vizsgálatára 23. Ebben a tanulmányban a legelőméz hatásait összehasonlítottuk a Leptospermum mézzel a dermatophyte gombák ellen. A jelenlegi vizsgálat eredményeivel összhangban a hidrogén-peroxid típusú méz nagyobb gombaellenes hatást mutatott.

a jelenlegi vizsgálat nem talált statisztikai összefüggést a gombaellenes érzékenység és a mézre való érzékenység között. Ez különösen fontos, figyelembe véve az azol gyógyszerekkel szembeni rezisztencia növekvő arányát a Candida 8, 24, 25 izolátumok között, valamint azt a megállapítást, hogy az azol alapú profilaxis növeli a nem C fertőzés kockázatát. albicansCandida fajok, amelyek kevésbé reagálnak a szokásos gyógyszeradagokra 6, 24.

bár ez a tanulmány bemutatja a méz gombaellenes hatását in vitro van néhány gyakorlati szempont az in vivo használatához. Először is, a méz csak helyi kezelésekre korlátozódik, és nem használható a candidaemia, a candidiasis legsúlyosabb formájának kezelésére. Mivel azonban a véráramfertőzés vezető kockázati tényezője a külső helyek kolonizációja vagy fertőzése, mint például a bentlakó katéterek, vagy az orális vagy hüvelyi nyálkahártya 19, a méz profilaktikusan alkalmazható a súlyosabb fertőzések megelőzésére. A közvetlenül a katéterek köré helyezett egész méz legalább olyan hatékonynak bizonyult, mint a povidon-jód 26 vagy mupirocin 27 a kilépési hely fertőzésének megelőzésében. Másodszor, mivel a méz vízben oldódik, a testfolyadékok, különösen a szájüregben lévő nyál hígíthatják vagy eltávolíthatják. Egy kísérleti tanulmány English et al. 28 szignifikánsan csökkentette az átlagos plakk pontszámokat és a vérzési helyeket azoknál a betegeknél, akik rágható mézbőrt kaptak; ugyanez a technika alkalmazható a szájüregi candidiasis kezelésére is. Más testrészeken a 100% – os méz rendszeres alkalmazása jóval a kívánt MIC felett tartaná a koncentrációt. A mézet be lehet építeni egy pesszáriumba a hüvelyi candidiasis kezelésére is. Egy másik gyakorlati kérdés a kataláz jelenléte a testfolyadékokban, amely csökkentheti a hidrogén-peroxid aktivitását. Az esettanulmányok és a klinikai vizsgálatok azonban azt sugallják, hogy elegendő aktivitást tartanak fenn ahhoz, hogy a méz hatékony legyen a klinikai környezetben 29, 30. A jelenlegi tanulmány eredményei azt állítják, hogy a kontrollált klinikai vizsgálatok célja a méz helyi gombaellenes szerként történő megállapítása.

Köszönetnyilvánítás

ezt a munkát a rural Industries Research and Development Corporation Honeybee Committee grant number US-128 támogatta. A klinikai izolátumokat a Westmead Kórház klinikai patológiai és orvosi Kutatóintézete szolgáltatta, Sydney, Ausztrália; Mazandaran Orvostudományi Egyetem, Sari, Irán. A mézmintákat a Medihoney Pty kedvesen biztosította. Kft., Queensland, Ausztrália; Comvita Medical Ltd., Te Puke, Új-Zéland; és a nyugat-ausztrál méhészek Szövetsége.