mierea are un efect antifungic împotriva speciilor Candida

rezumat

incidența infecțiilor cu Candida crește la nivel mondial. Natura gravă a acestor infecții este agravată de creșterea nivelului de rezistență la medicamente. Raportăm că anumite miere au activitate antifungică semnificativă împotriva izolatelor clinice ale speciilor Candida. Important, concentrația minimă inhibitoare a acestor miere ar fi realizabilă într-un cadru clinic.

Introducere

mierea a fost folosită ca medicament de mii de ani și s-a dovedit a fi un agent antimicrobian eficient 1. Această activitate antimicrobiană provine în principal din producerea de peroxid de hidrogen din glucoză și oxigen de către glucoză oxidază, o enzimă derivată din albine 2. Mierea din anumite specii de floră leptospermică originară din Australia și Noua Zeelandă conține componente fitochimice suplimentare care sporesc și mai mult activitatea antibacteriană 3. Natura exactă a acestor componente nu este încă identificată.

deși mai multe studii in vitro au demonstrat proprietățile antibacteriene ale mierii 3-5, puțini au examinat acțiunea împotriva ciupercilor. Incidența infecțiilor fungice este în creștere atât în mediul comunitar, cât și în cel spitalicesc, cu Candida spp. printre organismele de conducere. Candida albicans provoacă infecții orale, peste 50% din cazurile de candidemie 6-9 și mai mult de 90% din candidoza vaginală 10, 11. Recent, au existat rapoarte crescute de specii non-C. albicans Candida în studiile clinice. Candida glabrata a devenit non-c dominantă. albicans Candida specii implicate în fluxul sanguin și infecții vaginale 9, 12-14, în timp ce Candida dubliniensis este adesea implicată în candidoza orofaringiană 15. Infecția cu specii non-C. albicans Candida are implicații clinice importante, deoarece multe sunt rezistente la terapia antifungică convențională pe bază de triazol. Alte terapii antifungice convenționale sunt fie toxice, fie cu eficacitate limitată și există o nevoie tot mai mare de noi agenți antifungici puternici. Scopul studiului actual a fost de a determina eficacitatea diferitelor miere împotriva izolatelor clinice ale C. albicans, C. glabrata și C. dubliniensis.

materiale și metode

izolate clinice de C. albicans, C. glabrata și C. dubliniensis au fost testate împotriva a patru tipuri diferite de miere: o miere Jarrah neprelucrată cu activitate de peroxid de hidrogen (activitate antibacteriană totală (așa cum este descrisă în 16) echivalentă cu 30,2% fenol 17); Medihoney bariera antibacteriană de miere îngrijire 18+, o miere pură de Leptospermum (activitate fitochimică 18% echivalent fenol); și o miere artificială, utilizată pentru a simula nivelurile ridicate de zahăr găsite în miere (7,5 g zaharoză, 37,5 g maltoză, 167,5 g glucoză și 202,5 g fructoză în 85 ml de apă sterilă).

concentrația minimă inhibitoare (MIC) a fiecărei mieri a fost determinată pe baza metodei de microdiluție NCCLS 18. Cincizeci la sută (w/v) soluții stoc de miere în mediu RPMI-1640 (cu glutamină și fără bicarbonat (Sigma)) au fost preparate imediat înainte de fiecare test și filtru sterilizat prin filtre de pori de 0,2 mm (Millipore). Soluțiile stoc au fost diluate în continuare cu RPMI-1640 mediu în plăci de microni cu 96 de puțuri pentru a obține concentrații finale de miere care au crescut în trepte de 1% (g/v). Suspensiile de izolate Candida au fost preparate în soluție salină sterilă 0,85%, iar transmitanța la 530 nm a fost ajustată la 80-88%. Suspensiile au fost diluate în mediu RPMI – 1640, iar în fiecare godeu al plăcii de microtitru s–au adăugat câte 25 de centicli imediat după prepararea soluțiilor de miere, rezultând un inocul final de 0,5-2,5 centicli 103 cfu/ml. După incubarea la 35oC timp de 24 de ore, MIC a fost înregistrată ca cea mai mică concentrație de miere care a împiedicat creșterea vizibilă. Fiecare izolat de Candida a fost testat în două exemplare, iar testele au fost repetate într-o zi separată. Testul U Mann-Whitney a fost utilizat pentru a evalua grupuri semnificative statistic. Corelațiile au fost efectuate folosind testul Spearman rank-order.

rezultate

rezultatele sensibilității C. albicans, C. glabrata și C. dubliniensis la diferite tipuri de miere sunt prezentate în tabelul 1. Mierea Jarrah a fost semnificativ mai activă împotriva celor trei specii de Candida (P < 0,00001). Activitățile antifungice ale mierii florale au fost semnificativ mai mari decât mierea artificială împotriva C. albicans și C. glabrata (P < 0,002), dar pentru C. dubliniensis, doar mierea Jarrah a fost semnificativ mai activă (P < 0,00001). C. dubliniensis a fost mai susceptibil la efectul osmotic al tuturor mierilor și la efectele antifungice ale mierii Jarrah, prezentând Microfoane semnificativ mai mici decât celelalte specii (P < 0,00001). C. glabrata, care este mai puțin susceptibilă la multe antifungice convenționale 19, a fost cel mai puțin susceptibilă la mierea testată (P < 0,00001).