Le miel a un effet antifongique contre les espèces de Candida

Résumé

L’incidence des infections à Candida augmente dans le monde entier. La gravité de ces infections est aggravée par l’augmentation des niveaux de résistance aux médicaments. Nous rapportons que certains miels ont une activité antifongique significative contre les isolats cliniques des espèces de Candida. Il est important de noter que la concentration inhibitrice minimale de ces miels serait réalisable en milieu clinique.

Introduction

Le miel est utilisé comme médicament depuis des milliers d’années et s’est avéré être un agent antimicrobien efficace 1. Cette activité antimicrobienne provient principalement de la production de peroxyde d’hydrogène à partir de glucose et d’oxygène par la glucose oxydase, une enzyme dérivée de l’abeille 2. Le miel de certaines espèces de la flore Leptospermique originaire d’Australie et de Nouvelle-Zélande contient des composants phytochimiques supplémentaires qui améliorent encore son activité antibactérienne 3. La nature précise de ces composants n’a pas encore été identifiée.

Bien que plusieurs études in vitro aient démontré les propriétés antibactériennes du miel 3-5, peu ont examiné l’action contre les champignons. L’incidence des infections fongiques augmente dans les environnements communautaires et hospitaliers, avec Candida spp. parmi les principaux organismes. Candida albicans provoque des infections buccales, plus de 50% des cas de candidémie 6-9 et plus de 90% des candidoses vaginales 10, 11. Récemment, il y a eu une augmentation des rapports d’espèces non C. albicans Candida dans les études cliniques. Candida glabrata est devenu le non-C dominant. les espèces d’albicans Candida sont impliquées dans les infections sanguines et vaginales 9, 12-14, tandis que Candida dubliniensis est souvent impliquée dans la candidose oropharyngée 15. L’infection par des espèces de candida autres que C. albicans a des implications cliniques importantes, car beaucoup sont résistantes au traitement antifongique conventionnel à base de triazole. D’autres traitements antifongiques conventionnels sont soit toxiques, soit d’efficacité limitée, et il existe un besoin croissant de nouveaux agents antifongiques puissants. Le but de la présente étude était de déterminer l’efficacité de divers miels contre les isolats cliniques de C. albicans, C. glabrata et C. dubliniensis.

Matériaux et méthodes

Des isolats cliniques de C. albicans, C. glabrata et C. dubliniensis ont été testés contre quatre miels différents : un miel de Jarrah non transformé ayant une activité au peroxyde d’hydrogène (activité antibactérienne totale (telle que décrite en 16) équivalente à 30,2% de phénol 17); Medihoney® Antibactérien Honey Barrier, un mélange exclusif de miels Leptospermum et de peroxyde d’hydrogène (activité phytochimique ≥18% d’équivalent phénol); Comvita® Soin des plaies 18+, un miel de Leptosperme pur (activité phytochimique ≥18% équivalent phénol); et un miel artificiel, utilisé pour simuler les taux élevés de sucre présents dans le miel (7,5 g de saccharose, 37,5 g de maltose, 167,5 g de glucose et 202,5 g de fructose dans 85 ml d’eau stérile).

La concentration inhibitrice minimale (CMI) de chaque miel a été déterminée sur la base de la méthode de microdilution NCCLS 18. Cinquante pour cent (p/v) de solutions mères de miel en milieu RPMI-1640 (avec glutamine et sans bicarbonate (Sigma)) ont été préparées immédiatement avant chaque dosage et filtrées stérilisées à l’aide de filtres à pores de 0,2 µm (Millipore). Les solutions mères ont ensuite été diluées avec du milieu RPMI-1640 dans des plaques de microtitre à 96 puits pour donner des concentrations finales de miel qui ont augmenté par incréments de 1% (p / v). Des suspensions d’isolats de Candida ont été préparées dans une solution saline stérile à 0,85% et la transmittance à 530 nm a été ajustée à 80-88%. Des suspensions ont été diluées dans le milieu RPMI-1640, et 25 µl ont été ajoutés à chaque puits de la plaque de microtitre immédiatement après la préparation des solutions de miel, ce qui donne un inoculum final de 0,5–2,5×103 ufc / ml. Après incubation à 35oC pendant 24 h, la CMI a été enregistrée comme la plus faible concentration de miel qui empêchait la croissance visible. Chaque isolat de Candida a été testé en double et les dosages ont été répétés un jour séparé. Le test U de Mann-Whitney a été utilisé pour évaluer des groupes statistiquement significatifs. Les corrélations ont été effectuées à l’aide du test d’ordre de rang de Spearman.

Résultats

Les résultats de la sensibilité de C. albicans, C. glabrata et C. dubliniensis à divers miels sont présentés dans le tableau 1. Le miel de Jarrah était significativement plus actif contre les trois espèces de Candida (P< 0,00001). Les activités antifongiques des miels floraux étaient significativement plus importantes que celles du miel artificiel contre C. albicans et C. glabrata (P< 0,002), mais pour C. dubliniensis, seul le miel de Jarrah était significativement plus actif (P< 0,00001). C. dubliniensis était plus sensible à l’effet osmotique de tous les miels et aux effets antifongiques du miel de Jarrah, présentant des CMI significativement plus faibles que les autres espèces (P< 0,00001). C. glabrata, qui est naturellement moins sensible à de nombreux antifongiques conventionnels 19, était le moins sensible aux miels testés (P< 0,00001).

Des profils de résistance aux médicaments étaient disponibles pour 20 des isolats. Douze d’entre eux étaient résistants ou sensibles – dose dépendante à l’itraconazole et/ou au fluconazole. Tous ces isolats ont été inhibés par le miel, sans relation statistique entre la sensibilité antifongique et la sensibilité au miel (P> 0,05).

Discussion

Des observations limitées ont révélé que le miel avait un effet inhibiteur contre C. albicans dans vitro20-22, mais aucune de ces études n’a utilisé de miels normalisés ou de méthodes de dosage. Une seule étude publiée a utilisé du miel dont l’activité équivalente au phénol est connue pour examiner l’activité antifongique 23. Dans cette étude, les effets du miel de pâturage ont été comparés au miel de Leptospermum contre les champignons dermatophytes. Conformément aux résultats de la présente étude, le miel de type peroxyde d’hydrogène a un effet antifongique plus important.

La présente étude n’a trouvé aucune relation statistique entre la sensibilité antifongique et la sensibilité au miel. Ceci est particulièrement important compte tenu du taux croissant de résistance aux médicaments azolés parmi les isolats de Candida 8, 24, 25 et de la constatation que la prophylaxie à base d’azole augmente le risque d’infection par non-C. Espèces d’albicansCandida, qui peuvent être moins sensibles aux doses habituelles de médicaments 6, 24.

Bien que cette étude démontre l’effet antifongique du miel in vitro, il existe quelques considérations pratiques pour son utilisation in vivo. Premièrement, le miel est limité aux traitements topiques et ne peut pas être utilisé pour traiter la candidémie, la forme la plus grave de candidose. Cependant, comme le principal facteur de risque d’infection de la circulation sanguine est la colonisation ou l’infection de sites externes, tels que les cathéters intérieurs ou les muqueuses buccales ou vaginales 19, le miel peut être utilisé à titre prophylactique pour prévenir des infections plus graves. Le miel entier placé directement autour des cathéters s’est avéré au moins aussi efficace que la povidone iodée 26 ou la mupirocine 27 pour prévenir l’infection au site de sortie. Deuxièmement, comme le miel est soluble dans l’eau, il peut être dilué ou éliminé par les fluides corporels, en particulier la salive dans la cavité buccale. Une étude pilote menée par English et al. 28 a constaté une réduction significative des scores moyens de plaque et des sites de saignement chez les patients ayant reçu un « cuir de miel » à croquer; cette même technique pourrait être appliquée pour le traitement de la candidose buccale. Sur d’autres sites du corps, une application régulière de miel à 100% maintiendrait une concentration bien supérieure à la CMI souhaitée. Le miel pourrait également être incorporé dans un pessaire pour le traitement de la candidose vaginale. Un autre problème pratique est la présence de catalase dans les fluides corporels qui a le potentiel de réduire l’activité du peroxyde d’hydrogène. Cependant, les rapports de cas et les essais cliniques suggèrent qu’une activité suffisante est conservée pour permettre au miel d’être efficace en milieu clinique 29, 30. Les résultats de la présente étude plaident pour des essais cliniques contrôlés visant à établir que le miel est un agent antifongique topique.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par la subvention du comité des abeilles de la Rural Industries Research and Development Corporation numéro US-128. Les isolats cliniques ont été gracieusement fournis par l’Institut de Pathologie Clinique et de Recherche Médicale de l’Hôpital Westmead, Sydney, Australie; et Université des Sciences médicales de Mazandaran, Sari, Iran. Des échantillons de miel ont été gentiment fournis par Medihoney Pty. Ltd., Queensland, Australie; Comvita Medical Ltd., Te Puke, Nouvelle-Zélande; et la Western Australian Beekeepers Association.