o mel tem um efeito antifúngico contra espécies Candida

Abstract

a incidência de infecções por Candida está a aumentar a nível mundial. A natureza grave destas infecções é agravada pelo aumento dos níveis de resistência ao fármaco. Relatamos que certos méis possuem atividade antifúngica significativa contra isolados clínicos de espécies Candida. Importante, a concentração inibitória mínima destes méis seria possível num ambiente clínico.

introdução

o mel tem sido utilizado como medicamento durante milhares de anos e tem sido considerado um agente antimicrobiano eficaz 1. Esta actividade antimicrobiana provém principalmente da produção de peróxido de hidrogénio a partir da glucose e oxigénio através da glucose oxidase, uma enzima derivada da abelha 2. O mel de certas espécies de flora Leptospermum nativa da Austrália e da Nova Zelândia contém componentes fitoquímicos adicionais que aumentam ainda mais a sua actividade antibacteriana 3. A natureza precisa destes componentes ainda não foi identificada.embora vários estudos in vitro tenham demonstrado as propriedades antibacterianas do mel 3-5, poucos examinaram a acção contra fungos. A incidência de infecções fúngicas está a aumentar tanto no ambiente comunitário como hospitalar, com Candida spp. entre os organismos líderes. Candida albicans causa infecções orais, mais de 50% dos casos de candidemia 6-9 e mais de 90% da candidíase vaginal 10, 11. Recentemente, em estudos clínicos, houve um aumento de notificações de espécies não-C. albicans Candida. Candida glabrata tornou-se a não-C dominante. as espécies albicans Candida envolvidas na circulação sanguínea e infecções vaginais 9, 12-14, enquanto Candida dubliniensis está frequentemente implicada na candidíase orofaríngea 15. A infecção por espécies não-C. albicans Candida tem importantes implicações clínicas, uma vez que muitas são resistentes à terapêutica antifúngica convencional à base de triazóis. Outras terapias antifúngicas convencionais são tóxicas ou de eficácia limitada, e há uma necessidade crescente de novos agentes antifúngicos potentes. O objectivo do estudo actual era determinar a eficácia de vários méis contra isolados clínicos de C. albicans, C. glabrata e C. dubliniensis.

Materiais e métodos

isolados Clínicos de C. albicans, C. glabrata e C. dubliniensis foram testados em relação a quatro diferentes méis: não transformados Jarrah mel com peróxido de hidrogênio atividade (total atividade antibacteriana (como descrito na 16) equivalente a de 30,2% fenol 17); Medihoney® anti-Bacteriano do Mel de Barreira, uma mistura exclusiva de Leptospermum e peróxido de hidrogénio, méis (fitoquímico atividade ≥18% fenol equivalente); Comvita® curativos 18+, um puro Leptospermum mel (fitoquímico atividade ≥18% fenol equivalente); e um mel artificial, utilizado para simular os elevados níveis de açúcar encontrados no mel (7, 5 g de sacarose, 37, 5 g de maltose, 167, 5 g de glucose e 202, 5 g de frutose em 85 ml de água estéril).a concentração inibitória mínima (MIC) de cada mel foi determinada com base no método de microdilução nccls 18. Cinquenta por cento (M/v) de soluções-mãe de mel em meio RPMI-1640 (com glutamina e sem bicarbonato (Sigma)) foram preparadas imediatamente antes de cada ensaio e filtradas através de filtros de poros de 0,2 µm (Millipore). As soluções-mãe foram ainda diluídas com meio RPMI-1640 em placas de microtítulo de 96 alvéolos para obter concentrações finais de mel que aumentaram em incrementos de 1% (M/v). As suspensões de isolados de Candida foram preparadas em solução salina estéril a 0, 85% e a transmitância a 530 nm foi ajustada para 80-88%. As suspensões foram diluídas em meio RPMI-1640 e foram adicionados 25 µl a cada alvéolo da placa de microtítulo imediatamente após a preparação das soluções de mel, resultando num inóculo final de 0,5–2,5×103 UFC/ml. Após incubação a 35oC durante 24 h, o MIC foi registado como a menor concentração de mel que impediu o crescimento visível. Cada isolado de Candida foi testado em duplicado e os testes foram repetidos em um dia separado. O teste de Mann-Whitney U foi usado para avaliar grupos estatisticamente significantes. Correlações foram realizadas usando o teste Spearman rank-order.os resultados da susceptibilidade de C. albicans, C. glabrata e C. dubliniensis a vários méis são apresentados no quadro 1. Jarrah honey was significantly more active against the three Candida species (P < 0.00001). O antifúngico atividades de méis florais foram significativamente maiores do que o mel artificial contra C. albicans e C. glabrata (P < 0.002), mas para C. dubliniensis, apenas Jarrah mel foi significativamente mais ativo (P < 0.00001). C. dubliniensis foi mais sensível ao efeito osmótico de todos os méis e aos efeitos antifúngicos do mel Jarrah, exibindo MICs significativamente mais baixos do que as outras espécies (P < 0,00001). C. glabrata, que é inatamente menos suscetível a muitos antifúngicos convencionais 19, foi o menos suscetível aos méis testados (P < 0, 00001).

Tabela 1

a Susceptibilidade de espécies de Candida para diferentes mel typesa

. Candida species (n) .
. C. albicans (18) . C. glabrata (10) . C. dubliniensis (10) .
Jarrah 18.5±2.7** 29.9±2.8** 15.4±2.8**
Medihoney® Antibacterial Honey Barrier 38.2±2.9** 43.1±4.2* 34.6±2.5
Comvita® Wound Care 18 + 39.9±1.7** 42.6±2.8** 33.4±2.5
Artificial honey 42.6±1.8 44.7±2.7 34.3±2.4
. Candida species (n) .
. C. albicans (18) . C. glabrata (10) . C. dubliniensis (10) .
Jarrah 18.5±2.7** 29.9±2.8** 15.4±2.8**
Medihoney® Antibacterial Honey Barrier 38.2±2.9** 43.1±4.2* 34.6±2.5
Comvita® Wound Care 18 + 39.9±1.7** 42.6±2.8** 33.4±2.5
Artificial honey 42.6±1.8 44.7±2.7 34.3±2.4

aValues show mean minimum inhibitory concentration (% (w/v) honey)±standard deviation.

*

P < 0.002;

**

P < 0.00001. P values assessed in comparison to artificial honey.

Tabela 1

susceptibilidade da espécie Candida a diferentes tipos de mel espécies Candida (n).

. C. albicans (18) . glabrata (10) . C. dubliniensis (10) . Jarrah 18.5±2.7** de 29,9±2.8** 15.4±2.8** Medihoney® anti-Bacteriano do Mel de Barreira de 38,2±2.9** 43.1±4.2* 34.6±2.5 Comvita® Wound Care 18 + 39.9±1.7** 42.6±2.8** 33.4±2.5 Artificial honey 42.6±1.8 44.7±2.7 34.3±2.4
. Candida species (n) .
. C. albicans (18) . C. glabrata (10) . C. dubliniensis (10) .
Jarrah 18.5±2.7** 29.9±2.8** 15.4±2.8**
Medihoney® Antibacterial Honey Barrier 38.2±2.9** 43.1±4.2* 34.6±2.5
Comvita® Wound Care 18 + 39.9±1.7** 42.6±2.8** 33.4±2.5
Artificial honey 42.6±1.8 44.7±2.7 34.3±2.4

aValues mostrar média mínima concentração inibitória (% (m/v) de mel)±desvio padrão.

*

P < 0.002;

**

P < de 0,00001. Valores de P avaliados em comparação com o mel artificial.

estavam disponíveis perfis de resistência ao fármaco para 20 dos isolados. Doze destes eram resistentes ou susceptíveis-dependentes da dose de itraconazol e/ou fluconazol. Todos estes isolados foram inibidos pelo mel, sem relação estatística entre sensibilidade antifúngica e sensibilidade ao mel (P > 0, 05).observações limitadas revelaram que o mel tem um efeito inibitório contra C. albicans em vitro20–22, no entanto nenhum destes estudos utilizou métodos padronizados de méis ou doseamento. Apenas um estudo publicado utilizou mel com actividade conhecida equivalente a fenol para examinar a actividade antifúngica 23. Neste estudo, os efeitos do mel de pasto foram comparados com o mel de Leptospermum contra fungos dermatofíticos. De acordo com os resultados do estudo em curso, verificou-se que o mel do tipo peróxido de hidrogénio tem um maior efeito antifúngico.

o estudo actual não encontrou qualquer relação estatística entre sensibilidade antifúngica e sensibilidade ao mel. Isto é particularmente importante tendo em conta a crescente taxa de resistência aos azóis entre os isolados Candida 8, 24, 25, e a conclusão de que a profilaxia baseada nos azóis aumenta o risco de infecção com não-C. as espécies de albicansCandida, que podem ser menos sensíveis às doses habituais de drogas 6, 24.embora este estudo demonstre o efeito antifúngico do mel in vitro, existem algumas considerações práticas para a sua utilização in vivo. Em primeiro lugar, o mel limita-se a tratamentos tópicos e não pode ser utilizado para tratar a candidemia, a forma mais grave de candidíase. No entanto, como o principal fator de risco para infecção da corrente sanguínea é a colonização ou infecção de sites externos, tais como cateteres de demora, ou a oral ou vaginal mucosas 19, o mel pode ser usado profilaticamente para prevenir infecções mais graves. Verificou-se que o mel inteiro colocado directamente em torno dos cateteres é pelo menos tão eficaz como o iodo de povidona 26 ou a Mupirocina 27 na prevenção da infecção no local de saída. Em segundo lugar, como o mel é solúvel em água, pode ser diluído ou removido por fluidos corporais, particularmente saliva na cavidade oral. A pilot study by English et al. Verificou-se uma redução significativa das pontuações médias da placa e dos locais de hemorragia em doentes aos quais foi administrado um “couro de mel” mastigável; esta mesma técnica pode ser aplicada no tratamento da candidíase oral. Em outros locais do corpo, a aplicação regular de 100% de mel manteria uma concentração bem acima do MIC desejado. O mel também pode ser incorporado em um pessário para o tratamento da candidíase vaginal. Outra questão prática é a presença de catalase em fluidos corporais que tem o potencial de reduzir a atividade de peróxido de hidrogênio. No entanto, relatórios de casos e ensaios clínicos sugerem que é mantida uma actividade suficiente para permitir que o mel seja eficaz no ambiente clínico 29, 30. Os resultados do estudo actual argumentam que os ensaios clínicos controlados para estabelecer o mel como um agente antifúngico tópico.

agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pela Rural Industries Research and Development Corporation Honeybee Committee grant number US-128. Os isolados clínicos foram gentilmente fornecidos pelo Westmead Hospital Institute of Clinical Pathology and Medical Research, Sydney, Austrália. ; and Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran. As amostras de mel foram gentilmente fornecidas pela Medihoney Pty. Ltd., Queensland, Australia; Comvita Medical Ltd., Te Puke, Nova Zelândia; and the Western Australian Beekeepers Association.

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